沈明華,張煥邦,黃國(guó)發(fā),莫重輝*
(1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院,青海西寧810016;2.青海省湟中縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,青海湟中811600)
瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)是瑞香科狼毒屬多年生草本植物,分布廣泛,根系發(fā)達(dá),吸水吸肥能力強(qiáng),具有抗干旱、生長(zhǎng)迅速、繁殖快等特點(diǎn)。在牧草群落中占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位,與其他植物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)和空間,如果誤服、誤用,輕者會(huì)造成人畜中毒,重者會(huì)造成死亡,直接影響到畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展,是我國(guó)天然草原上主要有毒植物之一[1]。
改革開(kāi)放以來(lái),我國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)持續(xù)穩(wěn)定增長(zhǎng),隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人們對(duì)生態(tài)環(huán)境、草產(chǎn)品、畜產(chǎn)品等的要求也逐步提高,草地有毒植物的防除和利用受到社會(huì)各界的重視,為此政府組織廣大農(nóng)業(yè)、生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、毒理、畜牧獸醫(yī)和草地科技工作者,圍繞草地有毒植物及其危害開(kāi)展了長(zhǎng)期的調(diào)查研究和廣泛的學(xué)術(shù)交流,在有毒植物鑒定、毒性的確證、毒素分離提取、動(dòng)物中毒的流行病學(xué)、臨床診斷、毒草病理、毒理機(jī)制以及預(yù)防治療等方面取得很大成果[2-5]。在藥用價(jià)值方面眾多研究表明瑞香狼毒主要含有黃酮類(lèi)、二萜類(lèi)、香豆素類(lèi)及木脂素類(lèi)化學(xué)成分,具有抗腫瘤、抗驚厥、抗癲癇、抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗氧化等多種藥理作用[6-9]。其干燥根可入藥,作為傳統(tǒng)藏藥材,瑞香狼毒在藏醫(yī)藥中的應(yīng)用歷史悠久。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)瑞香狼毒化學(xué)成分和抗腫瘤、抗艾滋病等方面的研究取得了迅速的發(fā)展,對(duì)其化學(xué)成分及藥理作用方面的研究也有不少報(bào)道,但有關(guān)瑞香狼毒對(duì)綿羊血液學(xué)方面的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)研究了兩種劑量瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)羊血液常規(guī)指標(biāo)的影響,以期為瑞香狼毒的毒性效應(yīng)研究及其開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。
1.1.1 瑞香狼毒 2013年8月采于青海省湟中縣土門(mén)關(guān)鄉(xiāng),采集瑞香狼毒花果期地上部分,陰干,粉碎備用。
1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 臨床健康試驗(yàn)綿羊8只,雌雄兼有,選自青海省某養(yǎng)殖場(chǎng)。驅(qū)除體內(nèi)外寄生蟲(chóng),手術(shù)植入永久性瘤胃瘺管,待創(chuàng)口愈合后,隨機(jī)分為2組即瑞香狼毒低劑量組和高劑量組。
1.1.3 儀器設(shè)備 MEK-8222K 型血細(xì)胞全自動(dòng)分析儀(日本產(chǎn));EDTAK2抗凝管。
1.2.1 染毒方法 試驗(yàn)前所有試驗(yàn)綿羊空腹稱(chēng)重定為初始體重,低劑量組按2.5g/kg的劑量、高劑量組按5g/kg的劑量稱(chēng)取瑞香狼毒干草粉,拌少量水,每天清晨空腹經(jīng)瘤胃瘺管一次投服,然后使其自由采食青干草和自由飲水,每只羊每天飼喂150g精料。每天觀察試驗(yàn)綿羊飲食、精神狀態(tài)、運(yùn)動(dòng)情況、中毒癥狀及中毒癥狀出現(xiàn)的時(shí)間并詳細(xì)記錄。連續(xù)飼喂32d時(shí)停止投服瑞香狼毒粉,并繼續(xù)觀察兩周。
1.2.2 檢測(cè)項(xiàng)目與方法 試驗(yàn)前及試驗(yàn)期間每隔4d頸靜脈采集抗凝血,在血細(xì)胞全自動(dòng)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、紅細(xì)胞壓積(HCT)等血液常規(guī)指標(biāo)。
1.2.3 數(shù)據(jù)處理 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。
所有試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間體重明顯下降,但在整個(gè)試驗(yàn)期間食欲正常,飲水量增加,表現(xiàn)出輕微的精神沉郁、垂頭、喜臥、靠墻站立、眼神呆滯,行動(dòng)遲緩。在試驗(yàn)第18天左右試驗(yàn)羊開(kāi)始出現(xiàn)不同程度的腹瀉癥狀,高劑量組試驗(yàn)羊比低劑量組試驗(yàn)羊腹瀉較為嚴(yán)重,表現(xiàn)為糞便稀軟不成形,糞便污染后肢被毛,試驗(yàn)第19天,低劑量組1只試驗(yàn)羊腹瀉死亡,試驗(yàn)第23 天高劑量組1 只試驗(yàn)羊精神沉郁,全身發(fā)抖,最后因衰竭而死亡。在試驗(yàn)第32天停止投服狼毒粉后所有試驗(yàn)羊逐漸停止腹瀉,精神好轉(zhuǎn)。
由圖1可見(jiàn),低劑量組試驗(yàn)羊在試驗(yàn)第8天開(kāi)始體重明顯降低(P<0.05);高劑量組試驗(yàn)羊在第12天開(kāi)始體重明顯降低(P<0.05),且在整個(gè)試驗(yàn)期間體重呈下降趨勢(shì)。
圖1 試驗(yàn)羊體重變化趨勢(shì)Fig.1 Weight change trend of tested sheep
2.3.1 RBC、Hb、HCT 的動(dòng)態(tài)變化 由表1可知,各試驗(yàn)組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞(RBC)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、血紅蛋白(Hb)在整個(gè)試驗(yàn)期間沒(méi)有明顯變化(P>0.05),組間也均無(wú)差異(P>0.05)。
2.3.2 WBC 的動(dòng)態(tài)變化 由表2可知,高劑量組白細(xì)胞(RBC)在試驗(yàn)第4天后明顯下降(P<0.05),第20天后又升高(P>0.05)。
表1 各組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積的動(dòng)態(tài)變化Table 1 Dynamic changes of red blood cells,lemoglobin and hematocrit of tested sheep in each group
瑞香狼毒是一種含黃酮類(lèi)化合物的有毒有害植物[2]。常建軍等[5]給家兔灌服瑞香狼毒中提取的粗黃酮類(lèi)化合物后,家兔出現(xiàn)喜臥、不愿運(yùn)動(dòng)、精神沉郁等臨床表現(xiàn),試驗(yàn)第6天~第8天出現(xiàn)腹瀉,其中3只家兔在試驗(yàn)第7天~第8天出現(xiàn)呼吸困難,表現(xiàn)為昂頭張口呼吸,于試驗(yàn)第9天~第10天因呼吸衰竭而死亡。陳永輝等[10]報(bào)道從異地新引進(jìn)的家畜在瑞香狼毒滋生的草地上放牧?xí)r,由于其對(duì)瑞香狼毒幼苗(芽)的識(shí)別能力差,常因誤食而發(fā)生中毒,多為急性中毒,主要表現(xiàn)為嘔吐、腹痛、腹瀉、四肢無(wú)力、臥地不起、全身痙攣、頭向后彎、心悸亢進(jìn)、糞便帶血,嚴(yán)重時(shí)虛脫或驚厥死亡。本試驗(yàn)中兩種劑量的試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間體重均明顯下降,表現(xiàn)出輕微的精神沉郁、垂頭、喜臥、靠墻站立、眼神呆滯、行動(dòng)遲緩等臨床表現(xiàn),在試驗(yàn)第18天左右試驗(yàn)羊開(kāi)始出現(xiàn)不同程度的腹瀉癥狀,高劑量組試驗(yàn)羊比低劑量組試驗(yàn)羊腹瀉較為嚴(yán)重,這與資料報(bào)道綿羊瑞香狼毒中毒癥狀相一致,表明瑞香狼毒對(duì)家畜中樞神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)有強(qiáng)烈的刺激作用。
表2 各組試驗(yàn)羊血液中白細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化Table 2 Dynamic change of white blood cells of tested sheep in each group
動(dòng)物血液生理生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體狀況的重要指標(biāo),是動(dòng)物疾病臨床診斷和治療的重要依據(jù)。血液對(duì)于維持動(dòng)物機(jī)體的正常生命活動(dòng)具有極其重要的意義,血液指標(biāo)能客觀地反映動(dòng)物機(jī)體的生理機(jī)能及代謝狀況。從本試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果來(lái)看,各試驗(yàn)組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞(RBC)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、血紅蛋白(Hb)在整個(gè)試驗(yàn)期間沒(méi)有明顯變化(P>0.05),兩組之間也無(wú)明顯變化(P>0.05),說(shuō)明這兩種劑量下瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)綿羊的造血系統(tǒng)尚未造成損傷,僅高劑量組白細(xì)胞(RBC)在試驗(yàn)第4天后 明 顯 下 降(P <0.05),20d 后 又 升 高(P >0.05),說(shuō)明高劑量組瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)羊白細(xì)胞初期具有一定的抑制作用。
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