松弛素、盆底電生理與女性盆底功能障礙性疾病的相關(guān)性研究*

蔡柏岑 韓燕華 蘇園園 石賀元 姚書(shū)忠

女性盆底功能障礙性疾病為中老年女性群體常見(jiàn) 病，以尿失禁及盆腔器官脫垂為主。根據(jù)相關(guān)資料調(diào)查結(jié)果，女性一生中出現(xiàn)盆底功能障礙性疾病的幾率在11%左右，其中1/3患者修復(fù)手術(shù)次數(shù)超過(guò)1次[1-2]。目前，妊娠、絕經(jīng)、陰道分娩、盆底肌肉薄弱、長(zhǎng)期腹壓偏大（肥胖，咳嗽）等被臨床公認(rèn)為該病最主要危險(xiǎn)因素，此外營(yíng)養(yǎng)性因素、醫(yī)源性因素及遺傳因素等也與該病有重要關(guān)系[3]。近年來(lái)，不少臨床研究證實(shí)，松弛素、盆底電生理等與女性盆底功能障礙性疾病之間有著較大相關(guān)性[4-5]。本文選擇本院收治行全子宮切除術(shù)婦科良性疾病患者進(jìn)行研究，探析松弛素、盆底電生理與女性盆底功能障礙性疾病之間相關(guān)性，為疾病預(yù)防提供指導(dǎo)，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次選擇本院2012年5-8月收治的擬行全子宮切除術(shù)的婦科良性疾病住院患者100例進(jìn)行研究，均經(jīng)過(guò)詳細(xì)盆底功能檢查予以確診。年齡34~56歲，平均（48.5±7.3）歲；體重54~73 kg，平均（64.5±12.4）kg；懷孕次數(shù)1~7次，平均（3.2±0.4）次。83例患者均已絕經(jīng)，其中1例合并慢性咳嗽，4例合并糖尿病，8例合并便秘、痔瘡，20例合并高血壓，9例因工作原因需長(zhǎng)期抬重物，均無(wú)吸煙史。其中4例為子宮內(nèi)膜病變，7例為卵巢良性腫瘤，10例為子宮腺肌病，13例為盆腔臟器脫垂，66例為子宮肌瘤。13例行陰式全子宮切除，26例行腹腔鏡切除，61例為開(kāi)腹切除，平均手術(shù)時(shí)間（120.0±41.3）min，術(shù)中平均出血量（87.2±9.7）mL。

1.2 方法 于患者入院后了解基本病史并進(jìn)行相關(guān)化驗(yàn)檢查。術(shù)前1天行盆底POP-Q檢測(cè)、常規(guī)婦科雙合診，同時(shí)手檢盆底肌力明確盆底功能、盆腔臟器脫垂情況。

1.2.1 盆底肌力測(cè)定方法 應(yīng)用廣州杉山公司U8盆底康復(fù)治療系統(tǒng)行盆底電生理檢測(cè)并測(cè)定患者盆底肌力：將肌電位探頭放進(jìn)患者陰道內(nèi)，另一端與治療儀相連，記錄測(cè)定結(jié)果。

1.2.2 血清采集方法 手術(shù)當(dāng)天采集6 mL患者上肢靜脈血，2000 r/min速度下離心20 min后保存于-80 ℃溫度下待測(cè)。

1.2.3 組織標(biāo)本收集方法 術(shù)中留取離體1 h內(nèi)無(wú)菌組織標(biāo)本，剪取子宮穹窿附近陰道壁組織，盡量選取未被電灼破壞部分，大小在1.0 cm×0.5 cm左右。若無(wú)多余陰道組織可剪取，可選擇穹窿附近宮頸組織。生理鹽水洗凈剪取組織并將血液與雜質(zhì)漂洗去，分成2個(gè)部分放置在凍存管中并盡量轉(zhuǎn)移到液氮罐中保存。

1.2.4 血清松弛素H2的測(cè)定方法 用人松弛素H2（Relaxin H2）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）試劑盒測(cè)定血清松弛素H2。美國(guó)進(jìn)口國(guó)內(nèi)分裝96孔及48孔各1組，試劑盒組成包括封板膜、密封袋、酶標(biāo)包被板、1800 pg/mL標(biāo)準(zhǔn)品溶液、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、酶標(biāo)試劑、樣品稀釋液、顯色劑A液、顯色劑B液、濃縮洗滌液及終止液。測(cè)定步驟：（1）稀釋標(biāo)準(zhǔn)品與加樣：酶標(biāo)包被板上設(shè)10個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品孔，在一、二孔中分別加入100 μL標(biāo)準(zhǔn)品，之后加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液后混勻。從一、二孔中各取100 μL溶液分別加入三、四孔，同時(shí)分別加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液后混勻，之后以此類推，最后在九、十孔中分別加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液混勻后各取50 μL棄掉。（即是說(shuō)稀釋后各孔加樣量均為50 μL，濃度依次為1200、800、400、200、100 pg/mL）。（2）加樣：分別設(shè)待測(cè)樣品孔、空白孔，于待測(cè)樣品孔中加入40 μL樣品稀釋液，之后加10 μL待測(cè)樣品，確保加樣樣品不觸及孔壁，混勻。（3）溫育：封板膜進(jìn)行封板，37 ℃溫度下溫育半小時(shí)。（4）配液：30倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋30倍備用。（5）洗滌：將封板膜揭掉，棄液體后甩干，孔內(nèi)加滿洗滌液，靜置半分鐘棄掉，重復(fù)5次，拍干。（6）加酶：除空白孔外每孔加入50 μL酶標(biāo)試劑。（7）溫育與洗滌：操作同上。（8）顯色：每孔先加入50 μL顯色劑A，之后加入50 μL顯色劑B，震蕩混勻后于37 ℃避光下顯色15 min。（9）終止：每孔加入50 μL終止液以終止反應(yīng)。（10）測(cè)定：用空白孔進(jìn)行調(diào)零，加終止液15 min內(nèi)450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔吸光度。之后計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)物濃度、吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并將樣品吸光度代入方程中計(jì)算樣品濃度乘以稀釋倍數(shù)即可得到血清松弛素H2實(shí)際濃度。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) 盆底肌力分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：肌肉收縮持續(xù)時(shí)間為0 s，肌力為0級(jí)，持續(xù)1 s為I級(jí)，持續(xù)2 s為Ⅱ級(jí)，3 s為Ⅲ級(jí)，4 s為Ⅳ級(jí)，5 s或以上為V級(jí)；盆腔器官脫垂分度參照POP-Q分度標(biāo)準(zhǔn)：脫垂臟器最遠(yuǎn)端位于處女膜內(nèi)，距處女膜距離大于1 cm，為1度[6]；脫垂臟器最遠(yuǎn)端在處女膜邊緣1 cm內(nèi)，為2度；脫垂臟器最遠(yuǎn)端在處女膜外，與處女膜邊緣距離超過(guò)1 cm但小于+（TVL-2 cm），為3度；下生殖道完全脫出，脫垂最遠(yuǎn)端超過(guò)+（TVL-2 cm），為4度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析與處理，計(jì)量資料以（x-±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，比較采用 字2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清松弛素H2水平與患者年齡及絕經(jīng)情況相關(guān)性分析結(jié)果 83例絕經(jīng)患者所測(cè)得血清松弛素H2水平為（157.4±263.9）pg/mL，17例未絕經(jīng)患者為（212.9±355.8）pg/mL，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.742，P=0.460）；患者年齡（X）與血清松弛素H2水平（Y）相關(guān)性回歸方程為：Y=2.987X+22.118，R2=0.006，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.2 不同盆腔器官脫垂分度患者松弛素水平的比較 輕度（1、2度）松弛素水平為（175.5±69.9）pg/mL，重度（3、4度）松弛素水平為（227.6±93.4）pg/mL（t=4.023，P=0.000），分度越高，血清松弛素水平越高，提示患者血清松弛素水平與盆腔器官脫垂分度存在一定相關(guān)性。

2.3 血清松弛素H2水平與盆底電生理各參數(shù)相關(guān)性分析結(jié)果 患者血清松弛素H2水平與POP各徑線、盆底肌力等參數(shù)之間無(wú)明顯相關(guān)性，見(jiàn)表1。

表1 血清松弛素H2水平與盆底電生理各參數(shù)相關(guān)性

3 討論

盆腔器官脫垂主要原因?yàn)榕璧字С纸Y(jié)構(gòu)缺陷、損傷進(jìn)而導(dǎo)致功能障礙所造成，近年來(lái)有臨床研究針對(duì)其與盆底功能障礙性疾病展開(kāi)分析，以妊娠期及產(chǎn)后婦女作為研究對(duì)象，證實(shí)松弛素與女性盆腔臟器脫垂存在一定相關(guān)性。國(guó)內(nèi)婦產(chǎn)科中，RLX相關(guān)研究也均與妊娠有關(guān)[7]。例如，有學(xué)者對(duì)比盆腔器官脫垂患者與正常婦女，發(fā)現(xiàn)前者血清松弛素質(zhì)量濃度為（406.7±311.2）ng/L，明顯比對(duì)照組（199.4±208.7）ng/L更高（P<0.05），同時(shí)絕經(jīng)女性血清松弛素質(zhì)量濃度為（172.0±197.5）ng/L，也明顯比未絕經(jīng)婦女（587.5±716.8）ng/L更高（P<0.05）[8]。

松弛素在體內(nèi)廣泛分布，為參與多種功能調(diào)節(jié)活性多肽，具有抗纖維化、穩(wěn)定心血管系統(tǒng)環(huán)境、抑制肺膠原沉積、促進(jìn)子宮新生血管形成、促進(jìn)肌肉再生及抗炎等作用，松弛素與其受體耦聯(lián)可在盆底膠原降解過(guò)程中發(fā)揮主導(dǎo)作用，加快機(jī)體陰道膠原降解速度，膠原含量降低之后就會(huì)引發(fā)陰道壁松弛，支持作用隨之減弱，終而引發(fā)盆底功能障礙性疾病[9-10]，這是不少臨床專家認(rèn)為其與盆底功能障礙性疾病存在相關(guān)性理論基礎(chǔ)。而有關(guān)研究顯示，孕晚期血清松弛素水平與產(chǎn)后盆底肌綜合肌力存在一定相關(guān)性[11]，檢測(cè)產(chǎn)后婦女進(jìn)行盆底肌肉肌力后予以盆底康復(fù)治療，治療后康復(fù)組盆底肌力復(fù)測(cè)結(jié)果顯示，Ⅰ、Ⅱ類肌纖維正常率顯著高于對(duì)照組[12]。但本研究中，絕經(jīng)與未絕經(jīng)女性之間血清松弛素水平的比較并無(wú)顯著差異，且患者年齡與血清松弛素H2水平之間也無(wú)顯著相關(guān)性。但在盆腔器官脫垂分級(jí)方面存在一定相關(guān)性，其中輕度（1、2度）脫垂患者松弛素水平顯著低于重度（3、4度），分度越高，血清松弛素水平越高。另外，血清松弛素H2水平與患者盆底電生理Aa、Ba、C、GH、PB、TVL、肌力深Ⅰ、肌力深Ⅱ、肌力淺Ⅰ、肌力淺Ⅱ等各參數(shù)逐一進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)兩者之間也無(wú)顯著相關(guān)性。

這一結(jié)論與其他研究結(jié)果有所不同，推測(cè)原因有以下幾種：（1）血清松弛素水平與妊娠有密切關(guān)系，孕期及非孕期患者該激素水平存在較大差異，可比性低。（2）盆底功能障礙性疾病致病因素較多，單獨(dú)用血清松弛素水平進(jìn)行評(píng)估難以獲得想要結(jié)果。（3）樣本本身盆腔臟器脫垂程度、BMI的不同也可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果[13-14]。

綜上所述，松弛素及盆底電生理與盆底功能障礙性疾病之間無(wú)顯著相關(guān)性，無(wú)法全面反映患者盆腔松弛程度，但與患者盆腔器官脫垂分度有一定關(guān)系，需進(jìn)一步行大樣本研究予以證實(shí)。

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