腸癌組織中微小染色體維持蛋白2的高表達與腸癌肝轉移及臨床病理特征的關系

王治偉，李福廣，熊裕民，趙子龍

論著·臨床

腸癌組織中微小染色體維持蛋白2的高表達與腸癌肝轉移及臨床病理特征的關系

王治偉，李福廣，熊裕民，趙子龍

目的 探究腸癌組織中微小染色體維持蛋白2(MCM2) 的高表達與腸癌肝轉移及臨床病理特征的關系。方法 2009年1月—2014年1月收治大腸癌患者215例，其中肝轉移88例為肝轉移組，另127例為無肝轉移組，同時選擇60例健康者為健康對照組。比較3組血漿MCM2水平，以及肝轉移組與無肝轉移組腸癌組織MCM2表達情況，分析MCM2表達與臨床病理特征的關系。結果 與健康對照組比較，腸癌肝轉移組和無肝轉移組MCM2水平均升高(P<0.05)，且肝轉移組MCM2水平高于無肝轉移組(P<0.05)；腸癌肝轉移組MCM2高表達率為76.1%(67/88)，高于腸癌無肝轉移組的46.5%(59/127)(P<0.05)；MCM2高表達與腸癌TNM分期、分化程度及淋巴轉移密切相關(χ2=5.005、4.263、4.388，P<0.05)。結論 MCM2高表達與大腸癌肝轉移、TNM分期、分化程度、淋巴轉移密切相關。

腸癌；肝轉移；微小染色體維持蛋白2；臨床病理

大腸癌發(fā)病率較高，部分大腸癌患者在確診時已出現(xiàn)肝轉移[1]。腸癌肝轉移患者預后差，近遠期生存率低[2～4]。大腸癌中存在腫瘤細胞異常增殖，微小染色體維持蛋白2(minichromosome maintenance protein 2，MCM2)為DNA復制時的重要相關標志物，與腫瘤細胞異常增殖有關，在正常情況下表達水平不高，而在細胞過度增殖時其水平可不斷升高[5，6]。由于MCM2的表達特異性，其現(xiàn)已成為腫瘤診斷的主要標志物[7]?，F(xiàn)探討MCM2的表達與腸癌肝轉移及臨床病理的關系，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2009年1月—2014年1月我院收治的大腸癌患者215例為研究對象，均經(jīng)病理證實為大腸癌。剔除在隨訪過程中失去聯(lián)系的患者。215例中男133例，女82例；年齡34～75(54±5)歲。其中出現(xiàn)肝轉移88例(肝轉移組)：男52例，女36例;年齡34～71(56±6)歲, 病程3～7(4±1)年；合并糖尿病19例，合并高血壓22例，接受過放射治療25例，有家族遺傳史41例。腸癌無肝轉移患者127例(無肝轉移組)：男81例，女46例;年齡34～75(52±4)歲；病程2～6(3±1)年；合并糖尿病15例，合并高血壓20例，接受過放射治療16例，有家族遺傳史38例。選擇同期在我院健康體檢的健康者60例為健康對照組：男32例，女28例;年齡35～75(54±4)歲。3組在性別、年齡等基本資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。腸癌患者肝轉移組和無肝轉移組在病程、基礎合并癥、既往治療史、家族遺傳史方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲我院倫理委員會審批通過，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 觀測指標與方法[4，5]

1.2.1 血漿MCM2測定(ELISA法): 3組于清晨空腹狀態(tài)下抽取外周肘靜脈血5 ml，3 500 r/min離心10 min，上清液-80℃保存待測；采用雙抗體夾心ELISA法檢測MCM2水平；試劑盒購自于上海華大科技有限公司，嚴格按照說明書操作。

1.2.2 癌組織 MCM2測定(免疫組化法)：選用的病理組織蠟塊在切片后脫蠟，再經(jīng)免疫組化法進行顯色。選擇英國Abcan公司提供的鼠抗人MCM2多克隆抗體，最后用蘇木素進行復染程序后在顯微鏡下觀察，當細胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒記為MCM2陽性細胞。其中在顯微鏡( XTJ-4600，梧州光學儀器廠)觀察區(qū)域內細胞陽性比例超過50%記為高表達，相反≤50%記為低表達。

2 結 果

2.1 血漿MCM2水平比較 與健康對照組比較，腸癌肝轉移組、無肝轉移組血漿MCM2水平均升高(P<0.05)，肝轉移組MCM2水平高于無肝轉移組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組血漿MCM2水平及癌組織MCM2表達情況比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與無肝轉移組比較，bP<0.052.2 腸癌組織MCM2高表達比較 腸癌肝轉移組癌組織MCM2高表達率為76.1%，顯著高于腸癌無肝轉移組的46.5%(P<0.01)。見表1，圖1、2(見插頁4)。

2.3 腸癌組織MCM2表達與臨床病理特征的關系 根據(jù)腸癌組織MCM2表達情況將215例患者分為高表達亞組(126例)和低表達亞組(89例)。結果顯示，MCM2高表達與腸癌TNM分期、分化程度及淋巴轉移密切相關(P<0.05)。見表2。

表2 MCM2表達與臨床病理特征的關系 [例(%)]

3 討 論

大腸癌為消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率居消化道惡性腫瘤第2位，病死率高，其中腸癌伴發(fā)肝轉移患者預后極差，近遠期生存率低[8]。一般大腸癌在發(fā)病早期得到確診并進行及時治療不僅能提高生存率，亦可降低肝轉移發(fā)生率。MCM2是DNA復制中的主要組成物[9]，在DNA復制前期，通過與主要過程因子的結合形成復合體，從而引起DNA的復制。當惡性腫瘤細胞不斷增殖時可出現(xiàn)MCM2高表達。MCM2獨特的性質使得其成為腫瘤標志物，其對腫瘤的發(fā)生及嚴重程度的判定均有較高的價值[10]。研究顯示，MCM2的異常表達與大腸癌肝轉移密切相關[11，12]。本結果顯示，腸癌伴肝轉移組MCM2水平明顯高于腸癌無肝轉移組及健康對照組，而免疫組化結果亦顯示，腸癌伴肝轉移組癌組織中MCM2高表達率高于腸癌無肝轉移組。表明MCM2的異常表達與腸癌肝轉移密切相關，MCM2的高表達可能參與了腸癌肝轉移的發(fā)生過程。

本結果顯示，MCM2高表達與腸癌肝轉移、TNM分期、分化程度及淋巴轉移等因素有關。與Schmidt等[12]的研究結果相符。表明大腸癌肝轉移患者MCM2表達水平相對更高，MCM2表達與腫瘤嚴重程度、淋巴轉移存在一定相關性。MCM2主要是在DNA復制中對細胞分裂起作用來加大細胞增殖速度，從而作為腫瘤標志物。在大腸癌轉移的患者中由于細胞增殖轉移的需要，導致所需MCM2越多，進一步刺激了MCM2的表達，兩者相互惡性循環(huán)，能高效代表腫瘤轉移水平[10]。當TNM分期越高，即大腸癌越嚴重時就會出現(xiàn)擴散及轉移，所以MCM2水平不斷增高。同樣，在分化程度越大、淋巴轉移的患者中也觀察到MCM2水平升高。這也說明MCM2表達水平的高低在一定程度上能代表TNM分期和分化程度，并能輔助判斷是否出現(xiàn)肝轉移和淋巴轉移[13，14]。大腸癌肝轉移患者多會選擇肝切除來治療疾病，也有部分患者堅持放化療來治療。但肝轉移后的惡化程度在一定程度上影響預后結果，若在治療前能準確判斷大腸癌嚴重程度能幫助患者選擇最佳治療方案[15，16]。不僅增大治療效率，還減少患者經(jīng)濟壓力。因此，MCM2水平對大腸癌肝轉移具有較高的研究價值，可以作為診斷及預后的觀察指標。

綜上所述，大腸癌中血漿MCM2出現(xiàn)異常表達，組織中MCM2高表達與大腸癌肝轉移、TNM分期、分化程度、淋巴轉移密切相關。

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9 Liu Y,He G,Wang Y,et al.MCM-2 is a therapeutic target of Trichostatin A in colon cancer cells[J].Toxicol Lett,2013,221(1):23-30.

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《疑難病雜志》可直接使用的英文縮略語

T(體溫) R(呼吸) HR(心率) BP(血壓)

SBP(收縮壓) DBP(舒張壓) ECG(心電圖) EEG(腦電圖)

Hb(血紅蛋白) RBC(紅細胞) WBC(白細胞) N(中性粒細胞)

L(淋巴細胞) M(單核細胞) E(嗜酸粒細胞) PLT(血小板)

ESR(紅細胞沉降率) HCT(紅細胞壓積) TG(三酰甘油) TC(總膽固醇)

CH(膽固醇) LDL-C(低密度脂蛋白膽固醇) HDL-C(高密度脂蛋白膽固醇) SCr(血肌酐)

UA尿酸 NO(一氧化氮) BUN(血尿素氮) T3(三碘甲狀腺原氨酸)

T4(甲狀腺素) ALT(丙氨酸氨基轉移酶) AST(天冬氨酸氨基轉移酶) APTT(活化部分凝血活酶時間)

PaO2(動脈血氧分壓) PaCO2(動脈血二氧化碳分壓) SaO2動脈血氧飽和度 IU或U(酶活力的國際單位)

The expression of minichromosome maintenance protein 2 in colorectal cancer with liver metastases and the clinical significance

WANGZhiwei*,LIFuguang,XIONGYumin,ZHAOZilong.*DepartmentofSurgery,AnkangCentralHospital,ShanxiProvince,Ankang725000,China

Objective To explore the relationship between the expression of 2 (MCM2) in colorectal cancer tissues and the clinical pathological characteristics of colorectal cancer.Methods From January 2009 to January 2014, 215colorectal cancer patients were enrolled, 88 patients with hepatic metastasis as liver metastases group, 127 cases as non-liver metastasis group, and 60 cases of healthy people as healthy control group. MCM2 levels in the 3 groups were compared, and the expression of MCM2 in the liver metastasis group and non-liver metastasis group were compared. The relationship between MCM2 expression and clinical pathological features was analyzed.Results Compared to the health control group, colon cancer liver metastasis group and non-liver metastases group’s level of MCM2 increased (P<0.05), and liver metastasis group’s level of MCM2 was higher than those in non-liver metastasis group (P<0.05); liver metastasis group’s MCM2 expression rate was 76.1% (67/88), which was higher than non-liver metastasis group’s 46.5% (59/127) (P<0.05); MCM2 expression and Colon Cancer TNM staging, differentiation degree and lymph node metastasis is closely related (χ2=5.005，4.263，4.388,P<0.05).Conclusion The high expression of MCM2 is related to liver metastasis of colorectal cancer, TNM staging, differentiation, lymphatic metastasis.

Colorectal cancer; Hepatic metastasis; Minichromosome maintenance protein 2; Clinical pathology

725000 陜西省安康市中心醫(yī)院普通外科(王治偉、李福廣、熊裕民)，病理科(趙子龍)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2015.11.007

2015-06-04)