高效液相色譜—電感耦合等離子質(zhì)譜法分析水產(chǎn)品中有機(jī)錫的形態(tài)

冷桃花等

1 引 言

錫是一種廣泛應(yīng)用于食品包裝行業(yè)的金屬材料之一，金屬錫本身是無(wú)毒的，但一些有機(jī)錫化合物的毒性卻非常高[1]。有機(jī)錫化合物被廣泛用于船舶防污涂料、農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑、塑料工業(yè)等[2～4]，常見(jiàn)的有機(jī)錫化合物有三甲基錫（TMT）、三乙基錫（TET）、二丁基錫（DBT）、三丁基錫（TBT）、二苯基錫（DPhT）和三苯基錫（TPhT）等，其生理活性以三錫型為最強(qiáng)。由于有機(jī)錫化合物在各個(gè)行業(yè)的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致其在環(huán)境中的含量得到了大量的累積，這對(duì)人類(lèi)的健康而言是一種潛在的危害。有機(jī)錫能干擾牡蠣中鈣的代謝，使貝殼加厚，可食用部分減少，還可導(dǎo)致腹足類(lèi)動(dòng)物由雌性向雄性轉(zhuǎn)變，通過(guò)改變其雌雄比例進(jìn)而影響其種群繁[5]。目前，已有多篇報(bào)道[6～12]證實(shí)世界各地的海岸港口檢測(cè)到了有機(jī)錫的存在。

近年來(lái)，許多研究者用各種分離檢測(cè)手段對(duì)有機(jī)錫進(jìn)行分析，一種是用氣相色譜法[13～17]對(duì)有機(jī)錫進(jìn)行分離檢測(cè)，一種是用高效液相色譜法[17～19]對(duì)有機(jī)錫進(jìn)行分離檢測(cè)。食品中有機(jī)錫的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法采用了氣相色譜法（GB/T5009.215）[20]，該方法樣品前處理過(guò)程復(fù)雜，需要多步的凈化和衍生，不容易實(shí)驗(yàn)規(guī)?；僮?，且針對(duì)不同的樣品，其不同的基質(zhì)勢(shì)必影響樣品的提取效率，尤其是該技術(shù)所需要的衍生化步驟很難掌握，導(dǎo)致回收率不穩(wěn)定。液相色譜法可以很好地分離有機(jī)錫化合物，且可以避免衍生化步驟，簡(jiǎn)化了樣品前處理步驟，但紫外檢測(cè)器的靈敏度較低，難以滿(mǎn)足現(xiàn)實(shí)的需求。高效液相色譜與電感耦合等離子質(zhì)譜的聯(lián)用在有機(jī)錫化合物分析當(dāng)中得到了廣泛應(yīng)用，且取得了初步的成效[21～23]。2008年，于振花等[22]應(yīng)用HPLCICPMS聯(lián)用技術(shù)研究了海產(chǎn)品中5種有機(jī)錫TMT、DBT、TBT、DPhT和TPhT，其中DPhT和DBT的回收率較低。2011年，李湘等[23]應(yīng)用HPLCICPMS詳細(xì)探討了海洋沉積物中的TMT，TET，TPhT和TBT的分離，4種有機(jī)錫化合物在24 min得到了很好分離，分離度、峰形均較好。從目前報(bào)道的文獻(xiàn)報(bào)道可知，HPLCICPMS聯(lián)用分析技術(shù)應(yīng)用于有機(jī)錫的分析主要針對(duì)3～5種有機(jī)錫化合物，使用的色譜柱多為T(mén)CC18以及ACE C18柱，容易對(duì)目標(biāo)化合物產(chǎn)生吸附，導(dǎo)致回收率偏低。

本研究在前期研究[24]的基礎(chǔ)上，采用30%（V/V）乙酸甲醇溶液為提取劑，低溫超聲萃取30 min，利用Eclipse Plus C18反相色譜柱，優(yōu)化色譜分離條件，建立了水產(chǎn)品中7種有機(jī)錫化合物TMT， MBT， DBT， TBT， MPhT， DPhT和TPhT同時(shí)分離的HPLCICPMS的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)化樣品處理過(guò)程，極大縮短了樣品處理流程，提高了效率。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

7500型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀、1200 series型高效液相色譜儀、ZORBAX Eclipse Plus C18反相色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）、ZORBAX SB C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）、ZORBAX 300SCX（150 mm×4.6 mm，5 μm）、ZORBAX Eclipse XDB C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），美國(guó)Agilent公司；AL204型萬(wàn)分位電子分析天平（梅特勒托利多儀器（上海）有限公司）；Sigma 416K離心機(jī)（美國(guó)Sigma公司）；IKA T25 digital Ultra Turrax勻漿機(jī)（美國(guó)IKA公司）；超聲波清洗儀（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）。

三甲基氯化錫（96.0%）、一苯基氯化錫（98%）、二苯基氯化錫（96.0%）、三苯基氯化錫（99.0%）、一丁基氯化錫（94.0%）、二丁基氯化錫（97.0%）、三丁基氯化錫（97.0%）， 德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司；乙酸（色譜純）、甲醇（色譜純）、三乙胺（色譜純），美國(guó)Sigma公司；其它化學(xué)試劑均為優(yōu)級(jí)純。超純水（電阻率≥18.2 MΩ·cm，美國(guó)Millipore公司）。

3.2.2 超聲時(shí)間對(duì)樣品加標(biāo)回收率的影響 采用2.3節(jié)方法處理樣品，考察了超聲時(shí)間對(duì)樣品提取回收率的影響。由圖4可知，樣品回收率隨著時(shí)間增加而提高，至10 min時(shí)達(dá)到最大，MPhT， DPhT和TPhT隨著超聲時(shí)間的繼續(xù)增加，回收率下降。其它化合物的回收率也相比10 min時(shí)回收率下降。因此，本研究選取超聲時(shí)間為10 min。

3.2.3 提取劑的體積及提取劑中乙酸的含量對(duì)樣品加標(biāo)回收率的影響 根據(jù)2.3方法處理樣品，比較了提取劑的體積及提取劑中乙酸的含量對(duì)樣品加標(biāo)回收率的影響。隨著提取體積的增加，樣品中TMT， MBT， DPhT， DBT， TPhT和TBT的回收率逐漸增高（圖4A），至提取劑量達(dá)到30 mL時(shí)，回收率達(dá)到最大。而MPhT在提取劑體積10 mL時(shí)回收率最高，隨提取劑體積的繼續(xù)增加，其回收率略有降低。綜合考慮，本研究選擇30 mL提取劑進(jìn)行樣品前處理。

3.4 實(shí)際樣品的檢測(cè)

應(yīng)用本研究?jī)?yōu)化的方法對(duì)市售的幾種貝類(lèi)水產(chǎn)品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，大部分濕樣貝類(lèi)水產(chǎn)品中未檢出有機(jī)錫，僅在濕制生蠔檢出12.5 μg/kg TPhT。而相對(duì)于干制水產(chǎn)品而言，毛蛤干粉中TBT和TPhT均有檢出，含量分別為53.4和98.1 μg/kg，與文獻(xiàn)＼[20＼]結(jié)果基本一致。牡蠣、花蛤、蟶子等干粉中也存在TPhT，含量分別為8.12， 12.2和14.3 μg/kg。本研究還在蟶子樣品中檢測(cè)到TMT，其含量為20.3 μg/kg，部分實(shí)際樣品檢出見(jiàn)圖5。

4 結(jié) 論

采用HPLCICPMS測(cè)定水產(chǎn)品中7種有機(jī)錫化合物，優(yōu)化色譜分離條件和樣品前處理方法，利用高效液相色譜Eclipse Plus C18色譜柱分析7種有機(jī)錫化合物，線(xiàn)性范圍0～50 μg/L，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R>0.995，檢出限0.11～0.60 μg/kg，7種有機(jī)錫化合物的回收率在72.1%～111.7%之間，7種有機(jī)錫化合物的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均在10%以?xún)?nèi)。本方法樣品前處理簡(jiǎn)便快速、線(xiàn)性范圍寬、精密度高、重現(xiàn)性好，能有效地同時(shí)處理和分析7種有機(jī)錫化合物，適用于水產(chǎn)品中7種有機(jī)錫化合物的測(cè)定。endprint

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