生長(zhǎng)抑素類似物對(duì)急性胰腺炎患者TLR4受體表達(dá)的影響

徐澤全，賈移山

(1.重慶市永川區(qū)人民醫(yī)院，重慶 402160;2.重慶市第三人民醫(yī)院，重慶 400014)

急性胰腺炎(AP)是胰腺發(fā)生病變后，胰腺細(xì)胞內(nèi)的胰酶外泄對(duì)胰腺本身造成損害，加重胰腺病變形成惡性循環(huán)病程呈逐漸加重的急腹癥[1]。因此，了解胰腺病變情況，打破病變后形成的惡性循環(huán)是治療急性胰腺炎的重要手段[2]。胰腺炎患者體內(nèi)的炎性因子會(huì)顯著增高，已知的研究結(jié)果表明，炎癥的強(qiáng)度可反映胰腺炎的病況。TLR4是胰腺炎患者中較早出現(xiàn)的炎性因子，其參與的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路是胰腺炎患者的重要介導(dǎo)炎性反應(yīng)信號(hào)傳導(dǎo)通路。生長(zhǎng)抑素類似物可抑制急性胰腺炎患者的炎性反應(yīng)，減少胰腺的內(nèi)外分泌及胃、小腸和膽囊的分泌，降低酶活性，對(duì)胰腺細(xì)胞有保護(hù)作用。筆者選取TLR4受體表達(dá)水平為觀察指標(biāo)，對(duì)我院收治的134例急性胰腺炎患者進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院消化內(nèi)科及重癥監(jiān)護(hù)室(ICU)2012年10月至2014年12月收治的134例急性胰腺炎患者，其中男72例，女62例;年齡 27～65歲，平均(58.7±6.9)歲;輕型急性胰腺炎(MAD)101例，重型急性胰腺炎(SAP)33例。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):急性胰腺炎特征性腹痛;血清淀粉酶活性增至正常值3倍以上;影像學(xué)支持急性胰腺炎診斷;患者及其家屬均簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):不宜使用生長(zhǎng)抑素的孕婦、哺乳期婦女、兒童;引起血淀粉酶、尿淀粉酶改變的其他疾病，如腹膜炎、消化性潰瘍穿孔、腎功能不全、闌尾炎、腮腺疾病及肺癌等[3]。將134例患者按治療方法分為試驗(yàn)組64例和常規(guī)組70例。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 治療方法

根據(jù)患者情況，參考美國(guó)胃腸病學(xué)院(ACG)制訂的急性胰腺炎治療指南選擇治療方式，如防治休克、改善微循環(huán)、抑制胰腺分泌、營(yíng)養(yǎng)支持、合理運(yùn)用抗菌藥物、血液凈化、維護(hù)重要臟器功能等[4]。試驗(yàn)組加用醋酸奧曲肽注射液(成都天臺(tái)山制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字 H20031207，規(guī)格為每支 1 mL ∶0.1 mg)0.1 mg 靜脈注射，再以25 μg/h的速率靜脈滴注[5]，并觀察患者用藥期間不良反應(yīng)，如出現(xiàn)惡心或嘔吐癥狀應(yīng)減緩滴注速度或停藥，必要時(shí)采取相關(guān)措施。奧曲肽有可能誘發(fā)1型糖尿病患者發(fā)生低血糖，糖尿病患者應(yīng)注意每3 h測(cè)1次血糖。

1.3 TLR 4檢測(cè)方法及觀察指標(biāo)

收集治療前后患者靜脈血各6 mL，置EDTA抗凝管中，混勻放置待用。將收集的血液在12 h內(nèi)采用Ficoll密度梯度離心法分離出外周血的單個(gè)核細(xì)胞。細(xì)胞總RNA制備:Trizol一步法分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞，測(cè)定單個(gè)核細(xì)胞總RNA的純度和濃度，利用RNA電泳技術(shù)確保RNA的完整性。半定量反轉(zhuǎn)錄·聚合酶鏈反應(yīng):逆轉(zhuǎn)錄試劑盒采用日本Takara的產(chǎn)品，按試劑盒說(shuō)明書(shū)半定量檢測(cè)半定量反轉(zhuǎn)錄·聚合酶鏈反應(yīng)法單個(gè)核TLR4 mRNA表達(dá)水平，TLR4引物上游為5'－GCC GGA AAG TTA TTG TGG TGG T －3'，下游為 5'－ATG GGT TTT AGG CGC AGA GTT T－3'，內(nèi)參物為2－GM，引物由上海生工生物工程有限公司合成，94℃變性30 s，53℃退火30 s，72℃延伸1 min，經(jīng)過(guò)40個(gè)循環(huán)后再72℃延伸7 min，TLR4的擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為356 bp，2－GM擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度為164 bp，電泳瓊脂糖凝膠濃度為1.5%。UVisoft軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，基因表達(dá)的相對(duì)含量為目的條帶與內(nèi)參條帶的平均灰度之比[6]。癥狀改善時(shí)間:包括腹痛、脹、上腹壓痛及發(fā)熱。囑患者癥狀有所變化時(shí)及時(shí)通知管床醫(yī)生，管床醫(yī)生被告知后，再次查體時(shí)確認(rèn)患者自述其中1項(xiàng)或多項(xiàng)有明顯減輕屬實(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。計(jì)數(shù)資料行 χ2檢驗(yàn);計(jì)量資料以X ± s表示，行 t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)為 α=0.05，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 兩組患者TLR4表達(dá)水平(X±s)

3 討論

急性胰腺炎的發(fā)病與膽道疾病、暴飲暴食、酗酒有關(guān)，其中膽道疾病臨床發(fā)病較危險(xiǎn)，尤其SAP疾病進(jìn)程快，死亡率超過(guò)20%，其中比例最高的是死于單核－巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的“二次打擊”。胰腺炎的發(fā)病和疾病進(jìn)程與TLR4的表達(dá)密切相關(guān)[7]。生長(zhǎng)抑素類似物可減少胰腺的內(nèi)外分泌作用，胰腺的內(nèi)分泌是自我消化吞噬的基礎(chǔ)，造成胰腺不斷自我消化及吞噬;同時(shí)，生長(zhǎng)抑素類似物可降低酶活性，進(jìn)一步降低底胰酶對(duì)胰腺的破壞作用。

本研究結(jié)果顯示，治療后兩組患者TLR4水平與治療前相比均顯著下降，且試驗(yàn)組下降更明顯(P＜0.05);試驗(yàn)組患者的癥狀改善時(shí)間明顯短于常規(guī)組(P＜0.05)，說(shuō)明生長(zhǎng)抑素類似物對(duì)改善患者病情有明顯療效。大鼠胰腺炎加重時(shí)，體內(nèi)TLR4水平升高的同時(shí)，體內(nèi)的腫瘤壞死因子－α(TNF－α)和白細(xì)胞介素－6(IL－6)均有所升高，同時(shí)抗炎性細(xì)胞因子IL－10有所下降，因此越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為，TLR4可作為臨床急性胰腺炎的監(jiān)測(cè)指標(biāo)[8]。

綜上所述，生長(zhǎng)抑素類似物可改善急性胰腺炎患者預(yù)后，縮短治療周期，降低醫(yī)療成本;TLR4可輔助監(jiān)測(cè)胰腺炎患者的病情。

[1]張秀平，曹立瀛，劉四清，等.金黃益膽顆粒對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠胰腺組織中 ICAM－1，TGF－β1表達(dá)的影響[J].世界華人消化雜志，2011，19(18):1 880 －1 885.

[2]孫 備，程卓鑫，賈 光.重癥急性胰腺炎治療新亮點(diǎn):多學(xué)科與微創(chuàng)化[J].中國(guó)實(shí)用外科雜志，2012，32(7):525 －527.

[3]岑 晶，顧 鋒，金自孟，等.長(zhǎng)效生長(zhǎng)抑素類似物聯(lián)合手術(shù)治療肢端肥大癥療效分析[J].中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志，2012，32(7):543－546.

[4]Li J，Wang R，Tang C.Somatostatin and octreotide on the treatment of acute pancreatitis－basic and clinical studies for three decades[J].Current Pharmaceutical Design，2011，17(16):1 594 － 1 601.

[5]Singh S，Chang HY，Richards TM，et al.Glucagonlike peptide 1 －based therapies and risk of hospitalization for acute pancreatitis in type 2 diabetes mellitus:A population－based matched case－control study[J].JAMA Internal Medicine，2013，173(7):534 － 539.

[6]Wang G，Wen J，Wilbur RR，et al.The effect of somatostatin，ulinastatin and salvia miltiorrhiza on severe acute pancreatitis treatment[J].American Journal of the Medical Sciences，2013，346(5):371 － 376.

[7]Wang YF，Wu M，Ma BJ，et al.Role of high mobility group box－1 and protectionofgrowthhormoneandsomatostatininsevereacutepancreatitis[J].Brazilian Journal of Medical and Biological Research，2014，47(12):1 075－1 084.

[8]衛(wèi)文俊，陶霖玉，李 蓉，等.烏司他丁對(duì)重癥急性胰腺炎患者早期外周血單核細(xì)胞Toll樣受體4表達(dá)的影響[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2012，31(1):97 －100.