痛風消顆粒的主要藥效學研究＊

劉建忠 ，周 興 ，漆 偉 ，郭 亮 ，廖興隆 ，劉紅露 ，唐榮珠 ，張 莉 ，羅先欽 ，郭劍華

(1.重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院，重慶 400010;2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

痛風消顆粒的功能主治為清利濕熱、活血止痛，臨床用于治療急性痛風性關節(jié)炎。本研究中擬通過藥效學試驗，為臨床用藥提供參考依據，現報道如下。

1 儀器、試藥與動物

AU480型全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特有限公司);TR－180型生物組織全自動染色機(湖北泰維醫(yī)療科技有限公司)。痛風消顆粒(重慶市中醫(yī)骨科醫(yī)院提供，批號為20140801，規(guī)格為每1 mL相當于5 g原生藥);秋水仙堿片(滇虹藥業(yè)集團玉溪生物制藥有限公司，批號為20130802);別嘌醇片(重慶青陽藥業(yè)有限公司，批號為130104);醋酸地塞米松片(浙江仙琚制藥股份有限公司，批號為1306111);阿司匹林(拜耳醫(yī)藥保健有限公司，批號為BJ16773);復方丹參片(廣州白云山和記黃埔中藥有限公司，批號為H3A003)。SD大鼠(雌雄各半，動物合格證號0003202;全雄，動物合格證號0003211)、KM小鼠(雌雄各半，動物合格證號0003202，0003929)，由重慶市中藥研究院實驗動物研究所提供;KM小鼠，全雄，動物合格證號0020093，由中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學實驗動物中心提供。

2 方法與結果

2.1 對大鼠痛風性關節(jié)炎模型的影響[1－3]

將雄性SD大鼠60只隨機分為6組，即空白對照組(A組)，模型組(B組)，秋水仙堿片組(0.2 mg/kg，C組)，痛風消顆粒高、中、低劑量組(相當于每 1 kg 體重 20，10，5 g，D1，D2，D3組)，每組10只。按組別給予相應藥物，給藥劑量為每100 g體重1 mL，每日1次，連續(xù)給藥14 d。給藥第11天造模前測定動物右側踝關節(jié)周徑，造模后2 h，給藥第12，13天再次測定右容積，計算足腫脹度及腫脹率。造模后2 h及給藥第12，13天后2 h分別按Coderre步態(tài)分級標準進行評分。取踝關節(jié)，10%甲醛溶液固定，HE染色，光鏡下進行關節(jié)滑膜組織形態(tài)學觀察。結果見表1。B組大鼠關節(jié)滑膜組織出現充血、炎癥細胞浸潤、腫脹和部分動物一定程度壞死;C組關節(jié)滑膜組織炎癥細胞浸潤、腫脹有明顯改善;D1組關節(jié)滑膜組織充血、腫脹有明顯改善，D2及D3組關節(jié)滑膜組織充血、炎癥細胞浸潤、腫脹均有明顯改善和修復。

2.2 對小鼠高尿酸血癥模型的影響[4－5]

將雄性KM小鼠60只隨機分為6組，即空白對照組(A組)，模型組(B組)，陽性對照組(別嘌醇片60 mg/kg，C組)，痛風消顆粒高、中、低劑量組(相當于每 1 kg 體重 40，20，10 g 生藥，D1，D2，D3組)，每組10只。按組別給予相應藥物，給藥劑量為每10 g體重0.2 mL，每日1次，連續(xù)給藥6 d。末次給藥后1 h，除A組外，各組均腹腔注射黃嘌呤混懸液1 200 mg/kg，1 h后摘眼球取血，以3 000 r/min的轉速離心，用全自動生化分析儀測血清尿酸含量。結果見表2。

表1 痛風消顆粒對大鼠痛風性關節(jié)炎模型的影響(X ± s，n=10)

表2 痛風消顆粒對小鼠高尿酸血癥模型、二甲苯致耳腫脹及醋酸致扭體反應的影響(X ± s，n=10)

2.3 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[6－8]

將KM小鼠50只(雌雄各半)隨機分為5組，即空白對照組(A組)，陽性對照組(醋酸地塞米松片5 mg/kg，C組)，痛風消顆粒高、中、低劑量組(相當于每 1 kg 體重 40，20，10 g 生藥，D1，D2，D3組)，每組10只。按組別給予相應藥物，給藥劑量為每10 g體重0.2 mL，每日1次，連續(xù)給藥5 d。末次給藥后1 h，于小鼠右耳涂抹二甲苯0.02 mL/只，20 min后脫頸處死動物，打孔器打下動物左右耳，精密稱取耳片質量，計算耳腫脹度(右耳質量－左耳質量)，耳腫脹抑制率=(對照組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度×100%。結果見表2。

2.4 對醋酸致小鼠扭體反應的影響[9－10]

將KM小鼠50只(雌雄各半)隨機分為5組，即空白對照組(A組)，陽性對照組(阿司匹林片 0.2 g/kg，C組)，痛風消顆粒高、中、低劑量組(相當于每 1 kg 體重 40，20，10 g 生藥，D1，D2，D3組)，每組10只。按組別給予相應藥物，給藥劑量為每10 g體重0.2 mL，每日1次，連續(xù)給藥5 d。末次給藥后1 h，各組每只小鼠均腹腔注射0.8%醋酸0.2 mL，記錄注射醋酸后20 min內小鼠出現扭體反應(腹部內凹、伸展后肢、臀部抬高)的次數及潛伏期，扭體抑制率(%)=(對照組平均扭體次數－給藥組平均扭體次數)/對照組平均扭體次數×100%。結果見表2。

2.5 對腎上腺素加冰水所致大鼠急性血瘀模型的影響[11－12]

將SD大鼠60只(雌雄各半)隨機分為6組，即空白對照組(A 組)，模型組(B 組)，陽性對照組(復方丹參片 0.4 g/kg，C 組)，痛風消顆粒高、中、低劑量組(相當于每1 kg體重20，10，5 g生藥，D1，D2，D3組)，每組 10只。按組別給予相應藥物，給藥劑量為每10 g體重0.2 mL，每日1次，連續(xù)8 d。末次給藥后1 h，除A組外，其余各組均按每100 g體重0.08 mL皮下注射0.1%腎上腺素，2 h后將動物于4℃冰水中浸泡5 min，于首次注射后4 h再次注射同等劑量的腎上腺素，禁食不禁水18 h。次日，戊巴比妥鈉45 mg/kg麻醉后腹主動脈取血0.5 mL，注入EDTA采血管中抗凝后測定紅細胞比容(HCT);3 mL注入肝素抗凝試管中，測定全血黏度，再將血離心，測定血漿黏度，并計算出聚集指數、剛性指數、變形指數等;2 mL注入枸櫞酸鈉抗凝試管中，離心測定凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血酶原時間(APTT)。結果見表3。

表3 痛風消顆粒對大鼠急性血瘀模型的影響(X ± s，n=10)

3 討論

痛風是由于嘌呤代謝紊亂和(或)尿酸排泄障礙導致的一種異質性疾病，臨床特點是高尿酸血癥、痛風性急性關節(jié)炎反復發(fā)作、痛風石沉積、特征性慢性關節(jié)炎和關節(jié)畸形，常累及腎而引起慢性間質性腎炎和形成腎尿酸結石。隨著人們生活方式的改變，痛風患病率有明顯上升趨勢，南方和沿海經濟發(fā)達地區(qū)發(fā)病率尤高[6]。本研究結果顯示，用痛風消顆粒治療，可能具有以下作用。

降尿酸作用:高、中劑量痛風消顆粒對小鼠腹腔注射黃嘌呤致高尿酸模型有明顯降低尿酸的作用，提示其可明顯抑制小鼠高尿酸血癥的尿酸升高。

抗炎作用:高、中劑量痛風消顆粒對大鼠痛風性關節(jié)炎造模后2，24，48 h足腫脹度和腫脹率有明顯抑制作用，高劑量對關節(jié)滑膜組織充血、腫脹有明顯改善作用，中、低劑量對關節(jié)滑膜組織充血、炎癥細胞浸潤、腫脹均有明顯改善和修復作用;對二甲苯致小鼠耳腫脹有明顯抑制作用。提示痛風消顆粒對大鼠痛風性關節(jié)炎和二甲苯致小鼠急性炎癥有明顯抗炎作用。

鎮(zhèn)痛作用:高劑量痛風消顆粒對大鼠痛風性關節(jié)炎造模后2，48 h步態(tài)有明顯改善作用;高、中、低劑量對醋酸所致小鼠扭體反應有明顯抑制作用，能明顯減少醋酸刺激引起的小鼠扭體次數，但各劑量對其疼痛潛伏期未見明顯影響。提示痛風消顆粒對大鼠痛風性關節(jié)炎和醋酸致小鼠外周疼痛有一定鎮(zhèn)痛作用。

活血化瘀作用:高劑量痛風消顆粒能明顯降低腎上腺素加冰水所致大鼠急性血瘀模型的PT、APTT、全血黏度(高切、低切)及高切還原黏度。提示痛風消顆粒對急性血瘀模型大鼠有一定的活血化瘀作用。

綜上所述，痛風消顆粒對急性炎癥有較強的抗炎作用，且能降低尿酸，同時還具有一定外周鎮(zhèn)痛和活血化瘀作用，為臨床治療急性痛風性關節(jié)炎提供了一定的藥理學依據。

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