榨前分離蘋果清汁中多酚的提取與分析

鄧 紅,趙茜茜,夏秋敏,高 丹,孟永宏,郭玉蓉

(陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院,陜西西安 710062)

榨前分離蘋果清汁中多酚的提取與分析

鄧 紅,趙茜茜,夏秋敏,高 丹,孟永宏,郭玉蓉

(陜西師范大學(xué)食品工程與營(yíng)養(yǎng)科學(xué)學(xué)院,陜西西安 710062)

以榨前分離蘋果清汁為樣品,優(yōu)化其多酚的提取和分析方法,與傳統(tǒng)工藝下清汁中的多酚進(jìn)行比較,以明確榨前分離工藝的優(yōu)勢(shì)。實(shí)驗(yàn)采用超聲波輔助提取法優(yōu)化了多酚提取條件,并優(yōu)化了蘋果清汁多酚的HPLC分析方法。結(jié)果表明,提取多酚的最優(yōu)參數(shù)為溫度50℃,時(shí)間40min,果汁與提取劑之比1∶3；優(yōu)化多酚的HPLC檢測(cè)條件為檢測(cè)波長(zhǎng)280nm,流動(dòng)相甲醇-0.3%冰乙酸水溶液,實(shí)驗(yàn)確定的梯度洗脫程序下多酚的分離效果較好。結(jié)論是兩種工藝下其蘋果清汁多酚物質(zhì)種類無(wú)顯著差異,但榨前分離蘋果汁中多酚的含量比傳統(tǒng)工藝果汁減少了23.62%,可以有效降低蘋果汁褐變的發(fā)生。

榨前分離,蘋果清汁,多酚,提取,分析

植物多酚是存在于植物組織中的次生代謝產(chǎn)物,具有良好的抗氧化活性和自由基清除能力。研究表明:酚類化合物在預(yù)防癌癥、心臟病、呼吸系統(tǒng)疾病,和促進(jìn)體內(nèi)排毒等方面具有明顯效果[1-2]。

蘋果多酚是蘋果中所含酚類物質(zhì)的統(tǒng)稱,主要分布在蘋果的果皮和果芯中,是果汁中重要的風(fēng)味和呈色物質(zhì)[3-4]。蘋果多酚的種類繁多,可分為黃烷醇類,如兒茶素、表兒茶素；黃酮醇類,如槲皮素、蘆?。涣u基肉桂酸類,如咖啡酸、綠原酸；二氫查耳酮類,如根皮素、根皮苷等[5-6]。蘋果多酚是引起果汁褐變的主要原因之一,所以對(duì)蘋果多酚的檢測(cè)和控制對(duì)蘋果汁加工企業(yè)尤為重要。蘋果多酚的檢測(cè)目前常用的有Folin-Ciocalteu(FC)法、正丁醇-鹽酸水解法、香蘭素法、Folin-Denis(FD)法、HPLC法、UV法等[7-8]。采用HPLC法測(cè)定單酚在整個(gè)樣品中的含量在國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道,但樣品前處理中需要進(jìn)行多酚的提取和純化,步驟比較繁瑣,本實(shí)驗(yàn)的榨前分離新工藝可簡(jiǎn)化前處理又能使多酚比較容易從樣品中提取出來(lái)。

榨前分離是一種運(yùn)用冷破碎設(shè)備能夠在榨汁前同時(shí)將蘋果皮、果柄、果籽、果核、木質(zhì)素及果肉進(jìn)行分離,把影響蘋果汁風(fēng)味的大多數(shù)物質(zhì)與榨汁用果肉隔離開(kāi)來(lái),極大地提高蘋果汁的品質(zhì)的新工藝[9-11],而蘋果加工工藝的革新更是幫助中國(guó)濃縮蘋果汁企業(yè)走出困境的重要舉措。

傳統(tǒng)工藝清汁是整果破碎,果皮、果柄、果籽、果核、果肉全部在一起壓榨制汁,成分比較復(fù)雜；榨前分離蘋果清汁僅用蘋果果肉榨汁,成分較簡(jiǎn)單。本文以榨前分離蘋果清汁為樣品,以傳統(tǒng)工藝清汁為對(duì)照,采用液液萃取來(lái)提取樣品有機(jī)相中的多酚物質(zhì),進(jìn)行工藝條件優(yōu)化；采用HPLC法分析多酚,并優(yōu)化HPLC檢測(cè)條件,同時(shí)與傳統(tǒng)工藝蘋果清汁中多酚物質(zhì)的差異進(jìn)行對(duì)比,以期為蘋果多酚的開(kāi)發(fā)利用和果汁加工行業(yè)工藝技術(shù)的改進(jìn)提供基礎(chǔ)資料和參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

實(shí)驗(yàn)用紅富士蘋果 采于陜西省咸陽(yáng)市長(zhǎng)武縣果園,裝于塑料袋置冷庫(kù)中(0±1℃)貯藏,待用。標(biāo)準(zhǔn)品(沒(méi)食子酸、綠原酸、咖啡酸、4-羥基苯甲酸、兒茶素、表兒茶素、槲皮素、根皮素、原花青素B1、原花青素B2、金絲桃苷、根皮苷、槲皮苷、異槲皮苷、蘆丁) 均購(gòu)于Sigma公司；分析試劑(色譜純甲醇、分析純乙酸乙酯和冰乙酸) 購(gòu)于西安森博化玻儀器供應(yīng)站。

DIONEX P680型戴安高效液相色譜儀 美國(guó)戴安公司；迪馬C18液相色譜柱(4.6×250mm,5μm) 迪馬科技有限公司；RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；KQ-200KDE型高功率數(shù)顯超聲波清洗器 昆山市超生儀器有限公司；JA2003型電子天平 上海精科天平有限公司；722型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 上海市光譜儀器有限公司；冷破碎設(shè)備 陜西師范大學(xué)食品學(xué)院與西安鼎合機(jī)械公司共同研制。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 工藝流程 蘋果→揀選→清洗→破碎(傳統(tǒng)工藝與榨前分離工藝)→酶解 →榨汁 →過(guò)濾→蘋果汁相關(guān)質(zhì)量指標(biāo)(多酚等)分析。

按此流程制得兩組樣品,分別是榨前分離工藝蘋果清汁和傳統(tǒng)工藝蘋果清汁；所有果汁樣品均稀釋至11.5°Brix進(jìn)行指標(biāo)分析。

1.2.2 蘋果多酚的提取

1.2.2.1 有機(jī)溶劑的選擇 在料液比和溫度相同的條件下,取10mL果汁樣品,用甲醇、乙醇、乙酸乙酯三種溶劑各200mL對(duì)果汁中的多酚類物質(zhì)進(jìn)行液液萃取以提取多酚,考察這三種溶劑提取多酚的效果,選出提取效果較好的溶劑進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2.2 提取方法的選擇 a.熱回流提取法:量取20mL果汁于三口燒瓶中,量取100mL乙酸乙酯倒入提取瓶,用電熱套加熱,溫度設(shè)為60℃,回流提取2h,測(cè)定乙酸乙酯溶液中總酚的含量。b.溶劑萃取法:用量筒量取20mL果汁于燒杯中,加入100mL乙酸乙酯,在50℃水浴中不停攪拌20min,取出,倒入分液漏斗中,靜置分層,取上清液并測(cè)定多酚含量。c.超聲波輔助提取法:量取20mL果汁于燒杯中,加入100mL乙酸乙酯,在溫度為50℃,功率為70W的條件下超聲20min,然后靜置分層,取上清液并測(cè)定多酚含量。

1.2.2.3 超聲波輔助提取多酚的工藝 a.超聲提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響:固定提取溫度為50℃,料液比為1∶5,超聲功率為70W,設(shè)計(jì)超聲時(shí)間分別為10、20、30、40、50、60min,考察超聲時(shí)間對(duì)多酚提取效果的影響。b.溫度對(duì)提取效果的影響:固定果汁與提取劑之比為1∶5,超聲功率為70W,提取時(shí)間依上述實(shí)驗(yàn)確定,分別在30、40、50、60、70℃條件下進(jìn)行超聲提取,考察超聲溫度對(duì)超聲效果的影響。c. 果汁與提取劑之比對(duì)提取效果的影響:超聲時(shí)間、溫度均由上述實(shí)驗(yàn)確定,果汁與提取劑之比分別在1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5的條件下進(jìn)行提取,考察果汁與提取劑之比對(duì)多酚提取效果的影響。

1.2.3 酚類物質(zhì)的定性和定量分析 在已確定的色譜條件下,對(duì)15種單酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定,確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的保留時(shí)間,再對(duì)混合標(biāo)樣進(jìn)行測(cè)定,以保留時(shí)間對(duì)樣品中的多酚物質(zhì)定性。

根據(jù)樣品濃度和峰面積之間的正比關(guān)系,在已確定的色譜條件下,對(duì)15種單酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定,記錄標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積,再對(duì)混合標(biāo)樣進(jìn)行測(cè)定,以峰面積對(duì)樣品中的多酚物質(zhì)進(jìn)行定量分析。

1.2.3.1 樣品溶液的制備 取20mL果汁樣品,加入一定量的有機(jī)溶劑,通過(guò)上述優(yōu)化的多酚提取方式,將多酚物質(zhì)從果汁中萃取到有機(jī)溶劑,得到其有機(jī)溶液,再通過(guò)真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將有機(jī)溶劑蒸發(fā)掉,使多酚物質(zhì)析出,再用氮?dú)獯蹈?以甲醇定容至5mL,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,待液相色譜分析。

1.2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 稱取一定量的沒(méi)食子酸、綠原酸、咖啡酸、4-羥基苯甲酸、兒茶素、表兒茶素、槲皮素、根皮素、原花青素B1、原花青素B2、金絲桃苷、根皮苷、槲皮苷、異槲皮苷、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,溶于70%甲醇溶液中,定容至10mL棕色容量瓶中,搖勻,放入冰箱4℃避光貯存?zhèn)溆?。再取一定體積的各個(gè)單標(biāo)配成系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.3.3 色譜條件的確定 根據(jù)多酚物質(zhì)的特性,選擇色譜柱為Discovery C18,150mm×4.6mm,5μm；查閱相關(guān)文獻(xiàn)[12-14]可知,柱溫為30℃；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣量為10μL；其他色譜條件有待實(shí)驗(yàn)確定,主要如下:

a.確定檢測(cè)器波長(zhǎng):對(duì)樣品進(jìn)行紫外區(qū)全波長(zhǎng)掃描,選擇測(cè)定酚類物質(zhì)的最佳波長(zhǎng)；b.流動(dòng)相選擇:流動(dòng)相有甲醇-0.1%醋酸水溶液,甲醇-0.1%磷酸水溶液,根據(jù)出峰效果選擇最佳流動(dòng)相。c.梯度洗脫程序的調(diào)試:以甲醇-0.1%醋酸水溶液為流動(dòng)相分離果汁中的多酚,通過(guò)改變流動(dòng)相的比例以及濃度梯度來(lái)達(dá)到分離各峰的目的。

1.2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

1.2.4.1 回收率的考察 將一定量的各單酚標(biāo)準(zhǔn)品加到樣品果汁中,按照文獻(xiàn)方法[15-17]進(jìn)行前處理,在已確定的色譜條件下進(jìn)行 HPLC 測(cè)定,計(jì)算各組分的加標(biāo)回收率。

加標(biāo)回收率(%)=(實(shí)測(cè)值(mg)-樣品中含量(mg))/添加值(mg)×100

式(1)

1.2.4.2 精密度實(shí)驗(yàn) 取供試品樣品溶液,等量重復(fù)進(jìn)樣5次,按上述最佳色譜條件進(jìn)行分析,計(jì)算這5次中各組分含量的RSD(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)。若RSD均小于3%,則表明儀器精密度良好。計(jì)算公式為:

式(2)

1.2.4.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取供試品樣品溶液,分別于配置后0、4、8、16、24h進(jìn)樣,按優(yōu)化的色譜條件進(jìn)行分析,計(jì)算這5次各組分含量的RSD。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用DPPS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘋果多酚的提取工藝

2.1.1 有機(jī)溶劑的選擇 實(shí)驗(yàn)測(cè)定的榨前分離蘋果汁多酚含量如圖1所示。

圖1 不同溶劑對(duì)果汁樣品中多酚提取的影響Fig.1 Influence of different solvent for extracting polyphenols in the juice sample

圖1對(duì)比了三種溶劑萃取多酚的效果,可以看出甲醇對(duì)果汁中多酚的提取量高于乙醇和乙酸乙酯,提取能力的順序?yàn)榧状?乙酸乙酯>乙醇,但是實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)用甲醇和乙醇提取果汁中的多酚時(shí),雖多酚進(jìn)入醇相,但果汁中會(huì)產(chǎn)生白色沉淀,原因是果汁中的糖類物質(zhì)不溶于甲醇和乙醇,而采用乙酸乙酯進(jìn)行提取時(shí),由于乙酸乙酯不溶于水,不會(huì)造成果汁渾濁,而此時(shí)多酚物質(zhì)會(huì)從果汁中被萃取到乙酸乙酯中,只要對(duì)上清液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),乙酸乙酯蒸發(fā)后多酚物質(zhì)自然析出,這樣就簡(jiǎn)化了提取工藝,因此,采用乙酸乙酯作為提取溶劑進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2.1.2 提取方法的選擇 采用三種提取方式提取多酚的結(jié)果如圖2所示,可以看出超聲波輔助提取的效果是最好的,溶劑萃取法次之,熱回流提取的效果最差。熱回流提取耗時(shí)長(zhǎng),對(duì)多酚的影響較大,而超聲波輔助提取的時(shí)間短、效率高,因此,采用超聲波輔助提取方法。

圖2 提取方法對(duì)多酚提取效果的影響Fig.2 Influence of different method for extracting polyphenols in the juice sample

2.1.3 超聲波輔助提取多酚工藝

2.1.3.1 提取時(shí)間對(duì)多酚提取效果的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖3,圖3表明液液萃取時(shí)隨著超聲提取時(shí)間的延長(zhǎng),果汁中的多酚不斷溶出進(jìn)入醇相中,提取量不斷上升；在40min后,超聲波輔助下的提取基本達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,增長(zhǎng)趨于緩慢,因此,確定40min為最佳提取時(shí)間。

圖3 提取時(shí)間對(duì)多酚提取效果的影響Fig.3 Influence of different time for extracting polyphenols in the juice sample

2.1.3.2 提取溫度對(duì)多酚提取效果的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖4,從圖4可以看出,隨著溫度的升高,分子運(yùn)動(dòng)速度加快,多酚的提取量不斷增大,溫度高于50℃后,多酚的提取量增長(zhǎng)緩慢。因?yàn)樵跍囟容^高的情況下,乙酸乙酯揮發(fā)更快,溶劑的減少則提取量降低；從能源方面考慮,溫度的升高會(huì)造成熱能浪費(fèi),因此確定50℃為提取最佳溫度。

圖4 提取溫度對(duì)多酚提取效果的影響Fig.4 Influence of different temperature for extracting polyphenols in the juice sample

2.1.3.3 果汁與提取劑之比對(duì)多酚提取效果的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖5,可以看出,果汁與提取劑之比對(duì)提取效果的影響不顯著,因?yàn)槊糠N提取劑對(duì)于多酚的溶解度有限。從曲線的趨勢(shì)看,在果汁與提取劑之比為1∶3時(shí),提取的效果較好,果汁與提取劑之比大于1∶3后的提取量增大不明顯,考慮經(jīng)濟(jì)高效方面,選擇果汁與提取劑之比1∶3為最佳。

2.2 蘋果多酚的檢測(cè)分析

2.2.1 色譜條件的優(yōu)化

2.2.1.1 檢測(cè)器波長(zhǎng)的確定 果汁經(jīng)過(guò)乙酸乙酯超聲波輔助提取,將多酚物質(zhì)萃取到乙酸乙酯中,通過(guò)對(duì)乙酸乙酯提取液進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描,結(jié)果如圖6所示。

圖6 樣品全波長(zhǎng)掃描圖Fig.6 Wavelength scan of apple juice Sample

可以看出,樣品在217nm和290nm處有吸收峰,查閱文獻(xiàn)得知,217nm處多為糖酸類物質(zhì),而多酚集中吸收波長(zhǎng)在280nm左右,通過(guò)對(duì)比260、270、280、290nm下色譜分離多酚的效果,選擇280nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.2.1.2 流動(dòng)相的選擇 多酚類物質(zhì)的酚羥基、羧基在水溶液中容易發(fā)生電離,使得極性增強(qiáng),容易在色譜柱固定相表面形成雙重保留,色譜峰拖尾嚴(yán)重,因此定量分析誤差較大。如果在流動(dòng)相中加入少量酸性調(diào)節(jié)溶液,如冰乙酸溶液,可使多酚的電離受到抑制,極性減弱,使分離效果和峰形得到改善。實(shí)驗(yàn)比較了流動(dòng)相甲酸-水、甲醇-0.1%冰乙酸水溶液、甲醇-0.1%磷酸水溶液,通過(guò)色譜圖看出加入酸溶液的流動(dòng)相體系明顯改善了分離效果和峰形,加入冰乙酸的效果比磷酸好。因此以流動(dòng)相為甲醇-0.1%冰乙酸水溶液,甲醇-0.3%冰乙酸水溶液,甲醇-0.5%冰乙酸水溶液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)甲醇-0.3%冰乙酸水溶液的的流動(dòng)相體系最好,最終選擇流動(dòng)相為甲醇-0.3%冰乙酸水溶液。

2.2.1.3 梯度洗脫程序的優(yōu)化 以上述條件對(duì)樣品進(jìn)行色譜分析,不斷調(diào)節(jié)梯度程序,最終確定以下梯度程序如圖7所示。

圖7 HPLC梯度洗脫程序圖Fig.7 Diagram of HPLC gradient elution program

2.2.2 蘋果汁有機(jī)相中多酚的液相色譜分析 在果汁的加工工藝工程中,殺菌和酶解這兩步對(duì)果汁中酚類影響較大,均會(huì)減少酚類物質(zhì)的含量,并且促進(jìn)酚類物質(zhì)聚合反應(yīng)的發(fā)生。研究酚類物質(zhì)對(duì)于考察加工工藝有一定意義。

2.2.2.1 多酚標(biāo)準(zhǔn)品的分離結(jié)果 實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖8,根據(jù)單酚的出峰時(shí)間,圖8中按出峰的先后順序?qū)畏舆M(jìn)行排列,與序號(hào)的對(duì)應(yīng)關(guān)系為:1-沒(méi)食子酸、2-原花青素B1、3-兒茶素、4-4-羥基苯甲酸、5-原花青素B2、6-綠原酸、7-咖啡酸、8-表兒茶素、9-槲皮素、10-金絲桃苷、11-蘆丁、12-異槲皮苷、13-根皮苷、14-槲皮苷、15-根皮素。

圖8 15種多酚混標(biāo)的分離效果Fig.8 Separation effects of 15 polyphenols mixed standard

2.2.2.2 榨前分離工藝和傳統(tǒng)工藝下蘋果汁樣品多酚分離結(jié)果 采用液相色譜分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖9和圖10。對(duì)比圖9和圖10兩圖可以看出,榨前分離果汁譜圖中出峰少,且峰高低于傳統(tǒng)工藝譜圖中的各峰,這說(shuō)明了榨前分離工藝中的多酚在種類和數(shù)量上均較少。另外,兩種果汁中均含有許多未知的物質(zhì),由于標(biāo)品的局限性,未能對(duì)其進(jìn)行定性和定量分析,還有待進(jìn)一步研究和分析。

圖9 榨前分離果汁有機(jī)相中多酚的分離效果Fig.9 Separation effects of polyphenols in apple juice produced by pressing pre-peeled apple

表1 榨前分離與傳統(tǒng)工藝果汁中多酚物質(zhì)的測(cè)定結(jié)果Table 1 Results of the phenolic compound in apple juice produced by different technology

圖10 傳統(tǒng)工藝果汁有機(jī)相中多酚的分離效果Fig.10 Separation effects of polyphenols in apple juice produced by traditional technology

注:-表示未檢測(cè)出。根據(jù)多酚物質(zhì)的保留時(shí)間排序,記錄峰面積大小,對(duì)果汁中的酚類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,結(jié)果列入表1。

如表1所示,兩種果汁均鑒定了14種多酚物質(zhì),這些多酚在果汁中含量較多的有綠原酸、表兒茶素、根皮苷、原花青素B2、兒茶素,其他單酚含量較少,且均不含咖啡酸；從含量上看,14種多酚在傳統(tǒng)工藝果汁中含量為164.96μg/mL,在榨前分離果汁中的含量為126.0μg/mL,后者比前者少了23.62%；從減少量分析,單酚含量減少量較大的有原花青素B2、金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮苷、根皮素,而這幾種單酚多分布在蘋果的果皮、果梗中,因此榨前分離工藝對(duì)這幾種單酚的損失較多。

2.2.3 方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果 如表2所示,各酚的加標(biāo)回收率均在85%以上,說(shuō)明該分離方準(zhǔn)確可靠；精密度實(shí)驗(yàn)的RSD 為0.6%～2.1%,小于3%,說(shuō)明該方法的精密度合格；但是,穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)的RSD均較大,這說(shuō)明了多酚類物質(zhì)在果汁中的含量不穩(wěn)定,隨著時(shí)間在不斷變化,主要是因?yàn)榉宇愇镔|(zhì)易受加工工藝和儲(chǔ)存時(shí)間影響[18]。因此,本方法用于同時(shí)測(cè)定蘋果清汁中多種酚類物質(zhì)的含量,具有較高的靈敏度和精密度,可行性強(qiáng)。

3 結(jié)論

3.1 以乙酸乙酯作為有機(jī)提取溶劑,采用超聲波輔助方法提取多酚,單因素實(shí)驗(yàn)確定的提取條件為:提取溫度50℃,時(shí)間40min,料液比1∶3。

3.2 確定HPLC檢測(cè)多酚的優(yōu)化方法為:檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,流動(dòng)相為甲醇-0.3%冰乙酸水溶液,梯度洗脫條件下多酚的分離效果較好。

表2 方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的測(cè)定結(jié)果Table 2 Results of methodological validating test

3.3 應(yīng)用優(yōu)化的提取方法和HPLC檢測(cè)條件,在兩種工藝下的果汁中均檢測(cè)出了14種多酚,則榨前分離蘋果清汁與傳統(tǒng)工藝蘋果清汁中多酚物質(zhì)在種類上無(wú)顯著差異；從15種單酚的分布情況看,綠原酸的含量最多,較高的是表兒茶素、根皮苷、原花青素B2、兒茶素,其他的單酚含量均較少；從含量上,榨前分離果汁中的含量比傳統(tǒng)工藝果汁減少了23.62%,這對(duì)于減小果汁的褐變有良好作用。

3.4 經(jīng)過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),說(shuō)明本方法適用于測(cè)定蘋果清汁中酚類物質(zhì)的含量,比傳統(tǒng)分析方法操作簡(jiǎn)單,且具有較高的靈敏度和精密度,可行性強(qiáng)。

[1]馮麗,宋曙輝,趙霖,等. 植物多酚種類及其生理功能的研究進(jìn)展[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2007,19(10):105-107.

[2]林櫻姬,趙萍,王雅. 植物多酚的提取方法和生物活性研究進(jìn)展[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué),2009(6):105-107.

[3]張澤生,史珅,張穎,等. 蘋果多酚的研究進(jìn)展[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā),2011,32(5):174-178.

[4]Schobinger U,Barbic I,Duerr P,etal. Phenolic compounds in apple juice-positive and negative effect[J].Fruit Processing,1995,5(6):171-172.

[5]Podesedek A,Wilska-Jeszka J,Anders B,etal. Compositional characterization of some apple varieties[J]. European food Research Technology,2000,210(4):268-272.

[6]Ortiz D,Shea T B. Apple juice prevents oxidative stress induced by amyloid-beta in culture[J]. J Alzheimers Dis,2004,6(1):27-30.

[7]許陳. 法桐落葉中植物多酚的測(cè)定與提取研究[D]. 南京：南京理工大學(xué),2006.

[8]胡秋芬,楊光宇,黃章杰,等. 微柱高效液相色譜法測(cè)定金銀花中的多酚類物質(zhì)[J]. 分析化學(xué)研究簡(jiǎn)報(bào),2005,33(1):69-72.

[9]華精意.“果品榨前分離設(shè)備”研制成功[J].食品開(kāi)發(fā),2010(3):72-72.

[10]侯琤斐,任虹,彭乙雪,等.膜分離技術(shù)在食品精深加工中的應(yīng)用[J].食品科學(xué),2012,33(13):287-291.

[11]易建華,仇農(nóng)學(xué),朱振寶.樹(shù)脂法生產(chǎn)無(wú)色濃縮蘋果汁的初步研究[J].飲料工業(yè),2001,4(4):6-8.

[12]王嵐,方瑞斌,李忠,等. 固相萃取一高效液相色譜法測(cè)定煙草樣品中的主要植物多酚[J].色譜,2001,19(6):564

[13]孫敏.獼猴桃果汁中酚類物質(zhì)分離及基于近紅外光譜的糖和有機(jī)酸快速檢測(cè)技術(shù)研究[D]. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué),2007.

[14]郝慧英,趙光鰲,陳蘊(yùn). 用HPLC測(cè)定蘋果酒中的酚類物質(zhì)[J]. 釀酒,2004,31(4):108-110.

[15]Shui G,Leong LP. Separation and determination of organic acids and phenolic compounds in fruit juices and drinks by high-performance liquid chromatography. Journal of Chromatography.A. 2002,977(1):89-96.

[16]張?zhí)?董學(xué)暢,吳方評(píng),等. 固相萃取一高效液相色譜法測(cè)定法測(cè)定煙草樣品中10種多酚[J].分析化學(xué)研究簡(jiǎn)報(bào),2005,33(3):359-362.

[17]戴軍,王洪新,陳尚衛(wèi),等.茶葉及茶多酚中兒茶素的高效液相色譜分析方法研究[J].色譜,2001,19(5):398-402.

[18]黃利華,張業(yè)輝,趙力超,等. 貯藏條件對(duì)蘋果多酚成分及抗氧化活性的影響[J].現(xiàn)代食品科技,2009,25(3);252-255.

Analysis and extraction for polyphenols in apple juiceof pre-pressing fruit

DENG Hong,ZHAO Xi-xi,XIA Qiu-min,GAO Dan,MENG Yong-hong,GUO Yu-rong

(College of Food Engineering and Nutritional Science,Shaanxi Normal University,Xi’an 710062,China)

Using the apple juice of pre-pressing fruit as testing sample,the extracted and analyzed method of polyphenols in juice was optimized. The difference of polyphenols content between juice pressed pre-peeled and traditional process that pressed whole fruit was compared to show the advantages of pre-pressing fruit. The extracting condition of polyphenol was optimized using ultrasonic assisted extraction method and the method of polyphenols detection by HPLC also was optimized. The results showed that optimal extracting condition of polyphenol was temperature 50℃,time 40min,ratio of juice to extracting 1∶3 and detection wavelength of HPLC was 280nm,linear gradient elution compose of methanol and 0.3% acetate acid solution. The polyphenols separated result was best under the gradient elution condition which was determined in this test. So the polyphenol content in juice pre-pressing was decreased 23.62% as the category was same between traditional process and juice pressed pre-peeled method. The browning of the apple juice can effectively reduce in the new processing.

pre-pressing fruit;apple juice;polyphenol；extraction;analysis

2014-04-18

鄧紅(1967-)，女，博士，副教授，研究方向：食品工程。

中央高?？蒲袠I(yè)務(wù)專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(GK261001330)；農(nóng)業(yè)部蘋果體系(CARS-28)項(xiàng)目資助。

TS255.44

B

1002-0306(2015)03-0214-06

10.13386/j.issn1002-0306.2015.03.036