百菌清在獼猴桃和土壤中殘留動態(tài)

黃成名 程軍勇　鄭莉　張海玲　蘇彩晴　付高峰

摘 要： 建立氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清殘留的方法，方法的檢出限為0005 mg·kg-1，通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態(tài)研究，表明百菌清在獼猴桃和土壤中的降解半衰期為574 d和776 d，施藥后第35 d，獼猴桃中百菌清未檢出，土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1，推薦百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期為35 d。

關鍵詞： 百菌清；獼猴桃；土壤；安全間隔期

中圖分類號：S482.2+6；S663.4 文獻標識碼：A 文章編號：1004-3020（2015）05-0027-03

在農(nóng)藥、肥料使用上對時間、數(shù)量上把握不準，導致獼猴桃品質差，商品價值低[1，2]。百菌清是深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司推出的一種高效低毒廣譜的殺菌劑，可用于防治果樹、蔬菜等多種病害。利用百菌清防治獼猴桃的病害，對于提高獼猴桃產(chǎn)量和品質具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為18 a生‘武植三號和‘魁蜜。試驗樹樹勢基本一致，坐果情況相近。供試藥劑為75%百菌清可濕性粉劑（深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司提供）。儀器設備主要有Agilent6890N氣相色譜儀（美國Agilent 公司，微電子捕獲檢測器（μ-ECD）），配化學工作站和7683B自動進樣器和DB-1701毛細管色譜柱；旋轉蒸發(fā)儀（瑞士 BUCHI公司）；渦流混合器、電子天平、精密移液槍、氮吹儀、固相萃取柱（氟羅里硅土柱，Agilent，6 mL/500 mg）；試劑主要有百菌清標準品（純度98%，）色譜純乙腈、色譜純正己烷、色譜純丙酮，淋洗液：正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）。

1.2 試驗方法

1.2.1 取樣方法

75%百菌清可濕性粉劑在獼猴桃中的消解動態(tài)試驗，試驗小區(qū)設施藥區(qū)和不施藥區(qū)（空白對照）處理，每處理3個小區(qū)，每個小區(qū)面積不少于60 m2，施藥劑量為推薦劑量的1.5倍（332 g·hm-2），兌水20 L，施藥時間：病害發(fā)生初期（現(xiàn)蕾期）噴霧施藥。75%百菌清可濕性粉劑在土壤中的消解動態(tài)試驗取未種植的空地（20～30 m2），去除土表附著物，按消解試驗相同濃度以332 g·hm-2劑量均勻噴霧（使土表濕透），噴藥后0（2 h），1，3，7，14，21，28，35，45 d分別采樣。分別按時間采集獼猴桃和土壤樣品。每小區(qū)按對角線法隨機采集獼猴桃樣品不少于1 kg（8～10個）；土壤鉆取0～10 cm土層，每小區(qū)不少于10個點，采樣量不少于05 kg。寫好標簽和采樣日期，貯存在-20 ℃冰箱中保存。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：DB-1701毛細管柱30 m×032 mm×025 μm；色譜柱溫度：160 ℃（保持4 min）15 ℃/min250 ℃（保持15 min）；ECD檢測器溫度：290 ℃；進樣口溫度：240 ℃；載氣高純氮（純度9999%）：20 mL·min-1；尾吹氣（高純氮）：30 mL·min-1；進樣量：10 μL。

1.2.3 樣品處理方法

稱取獼猴桃樣品250 g，土壤樣品100 g準確加入50 mL乙腈溶液，獼猴桃樣品高速均質2 min，土壤樣品超聲30 min，靜置15 min， 準確吸取乙腈層10 mL于圓底燒瓶中，50 ℃水浴旋轉蒸發(fā)干，然后加入1 mL淋洗液溶解，待凈化。

用5 mL正己烷預洗，當溶劑液面流至吸附填料表面時，立即加入樣品提取液，用10 mL離心管收集洗脫液，用8 mL正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）分兩次淋洗固相萃取柱，合并收集洗脫液，用氮吹儀40 ℃下吹干，用正己烷定容至20 mL，供氣相色譜儀檢測[3]。

1.2.4 標準曲線的制作

將1000 mg·L-1的百菌清標準溶液分別用正己烷分別稀釋配得0005，001，002，010，050，100 mg·L-1系列標準溶液，在1.2.2氣相色譜條件下進行測定，百菌清標準品濃度在0005～10 mg·L-1范圍成線性，線性方程為y=310 8019 x-2 1416，R2= 0992 1，其中y為百菌清相應的峰面積，x為百菌清標準品溶液濃度（mg·L-1）。

1.2.5 最小檢出量

在上述條件下，百菌清的最小檢出量為50×10-12 g。

1.2.6 最低檢測濃度

在上述色譜條件和分析方法百菌清獼猴桃、土壤的最低檢出濃度為0005 mg·kg-1。

1.2.7 相對保留時間

上述色譜條件下，百菌清保留時間約為514 min。

2 結果與分析

2.1 獼猴桃和土壤色譜測定結果

在1.2.2色譜條件下，百菌清標準品（005 mg·L-1）、獼猴桃空白樣品（CK）、獼猴桃樣品（施藥后第5 d）、土壤空白樣品（CK）、土壤樣品（施藥后第5 d）的色譜圖，分別見圖1～圖5。

2.2 百菌清在獼猴桃和土壤中的降解動態(tài)

從試驗結果可知，百菌清在獼猴桃和土壤中的殘留量隨著時間的延長而降低，噴施百菌清的當天（施藥后2 h），獼猴桃中百菌清殘留量為3974 mg·kg-1，土壤中百菌清殘留量為0442 mg·kg-1。百菌清在獼猴桃和土壤中的半衰期，即百菌清藥物殘留量變成初始一半所用的時間，獼猴桃中為574 d，土壤中為776 d，噴施百菌清后第35 d，獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限（0002 mg·kg-1），表示已全部消解無殘留。土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1，消解率為97.3%，僅有微量的殘留。獼猴桃中百菌清殘留量與消解率相關系數(shù)為0984 4，土壤中百菌清殘留量與消解率相關系數(shù)為0963 5，均呈較強的正相關關系。

3 結論與討論

（1）對不同的試樣前處理操作進行對比試驗，對各種提取凈化方法，建立了采用氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清的檢測方法，結果表明，該方法提取效率、凈化效果均滿足方法回收率和儀器檢測的要求[4]。

（2）通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態(tài)研究結果表明，百菌清在獼猴桃中的半衰期為574 d，百菌清在土壤中的半衰期為7.76 d，噴施百菌清后第35 d，獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限0.005（mg·kg-1），表示消解無殘留，為丘陵崗地安全有效噴施殺菌劑提供理論參考。

（3）結合百菌清在獼猴桃中的降解動態(tài)檢測結果，為保障獼猴桃食用安全和合理用藥，在正常劑量用藥下，推薦35 d為百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期。

（4）從三峽植物園的試驗來看，獼猴桃果實和土壤百菌清殘留量是較低的，在安全范圍內。下一階段，將擴大百菌清的使用區(qū)域，提高檢測水平，降低藥物殘留，確保消費安全仍是亟待解決的重要問題，以提高獼猴桃產(chǎn)品的市場份額。

參 考 文 獻

[1]謝志兵，魯旭東.CPPU對獼猴桃果實生長的影響[J].農(nóng)業(yè)與技術，2003，（3）：6365.

[2] 鐘彩虹，李大衛(wèi)，龔俊杰，等.湖北省獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展調查與研究[J].湖北農(nóng)業(yè)科學，2012，（12）：24962501.

[3] 金雁，姚家彪，付海濱，等.氣相色譜法快速測定蔬菜、水果中多種有機磷農(nóng)藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007，（7）：11531154.

[4] 梅文泉，佴注，黎其萬，等.蔬菜中多種有機磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測定[J].云南農(nóng)業(yè)大學學報，2005，（1）：107110.

（責任編輯：鄭京津）