2014年國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究概況

吳雨祺 陳伊凡 鄭火青 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310058）

2014年國(guó)內(nèi)外蜂王漿研究概況

吳雨祺 陳伊凡 鄭火青 胡福良

（浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，杭州310058）

本文對(duì)2014年國(guó)內(nèi)外蜂王漿的研究概況進(jìn)行了綜述，對(duì)公開(kāi)發(fā)表的79篇中英文文獻(xiàn)及43項(xiàng)專(zhuān)利的地域分布和研究領(lǐng)域進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析和評(píng)述，并重點(diǎn)介紹了蜂王漿的化學(xué)組分、質(zhì)量控制、生物學(xué)活性等領(lǐng)域的研究新進(jìn)展。與2013年相比，2014年蜂王漿的研究熱度有所上升，取得了較豐碩的成果。

蜂王漿；化學(xué)組分；質(zhì)量控制；生物學(xué)活性；專(zhuān)利

蜂王漿是僅次于蜂蜜的主要蜂產(chǎn)品，研究和應(yīng)用的歷史悠久。近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和新興技術(shù)的應(yīng)用，蜂王漿研究進(jìn)入一個(gè)新的階段。關(guān)注國(guó)際、國(guó)內(nèi)蜂王漿研究動(dòng)態(tài)，了解蜂王漿研究進(jìn)展，將有助于國(guó)內(nèi)蜂王漿科學(xué)研究不斷向縱深發(fā)展，有助于蜂王漿產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。本文介紹2014年度國(guó)內(nèi)外蜂王漿論文、專(zhuān)利情況，從地域和研究領(lǐng)域入手，重點(diǎn)對(duì)蜂王漿的化學(xué)組分、質(zhì)量控制、生物學(xué)活性等領(lǐng)域的研究進(jìn)展進(jìn)行分析比較，并對(duì)未來(lái)蜂王漿的研究作了展望。

1 論文分布情況

1.1 論文地域分布

根據(jù) Google Scholar、Elsevier、Springerlink、NCBI、ISI Web of Knowledge、中國(guó)知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)的搜索結(jié)果，2014年度發(fā)表與蜂王漿相關(guān)的中、英文研究論文共79篇，其中被SCI收錄47篇，普通英文類(lèi)16篇，中文核心類(lèi)6篇，中文普通類(lèi)10篇。與2013年相比，2014年的論文數(shù)量明顯增加（表1）。

表1 2010～2014年蜂王漿研究論文數(shù)

從論文作者的地域分布來(lái)看，分布較為廣泛。在47篇SCI論文中，第一作者單位來(lái)自中國(guó)的論文有10篇，與去年相比有了大幅增長(zhǎng)；日本有6篇，兩國(guó)論文數(shù)量占到總數(shù)的1/3，表明中日兩國(guó)仍然是蜂王漿研究的主要力量。此外，伊朗有4篇SCI論文發(fā)表，與2013年相比有了進(jìn)一步的增長(zhǎng)；土耳其4篇；埃及和羅馬尼亞各3篇；波蘭、巴西、墨西哥和西班牙各2篇；法國(guó)、保加利亞、比利時(shí)、馬來(lái)西亞、塞爾維亞、泰國(guó)、希臘、意大利、約旦各1篇。而16篇普通英文論文以中東國(guó)家為主，伊朗5篇，埃及4篇，兩國(guó)占總數(shù)的56%。

國(guó)內(nèi)蜂王漿研究論文總數(shù)相比上一年度有一定程度減少，但中文核心期刊論文數(shù)量有一定程度的回升。2014年度有6篇核心期刊論文，其中2篇來(lái)自江蘇，2篇來(lái)自浙江，另2篇分別來(lái)自河南和黑龍江。從我國(guó)SCI收錄論文數(shù)量的不斷增長(zhǎng)可以看出，國(guó)內(nèi)蜂王漿研究者更熱衷于在英文期刊上發(fā)表高水平的研究論文。1.2論文研究領(lǐng)域

2014年蜂王漿研究論文的研究領(lǐng)域，與往年相似，多集中于生物學(xué)活性和化學(xué)組分的研究。這樣的分布在SCI論文中得到充分體現(xiàn)。在47篇SCI論文中，有30篇是有關(guān)蜂王漿生物學(xué)活性的研究，其余的17篇均為有關(guān)蜂王漿內(nèi)、外源性物質(zhì)的研究。

2 研究新進(jìn)展

2.1 蜂王漿化學(xué)組分研究新進(jìn)展

蜂王漿的化學(xué)組分極為復(fù)雜。有關(guān)蜂王漿化學(xué)組分尤其是蛋白質(zhì)的研究一直是蜂王漿研究的重點(diǎn)，這些基礎(chǔ)研究為蜂王漿的生物學(xué)活性研究以及質(zhì)量評(píng)價(jià)與控制奠定了理論基礎(chǔ)。蛋白質(zhì)的表達(dá)后修飾對(duì)蛋白質(zhì)的功能和性質(zhì)有著重要的影響，質(zhì)譜等檢測(cè)技術(shù)的快速發(fā)展，使得對(duì)蛋白質(zhì)的進(jìn)一步深入研究成為可能。

中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所李建科研究團(tuán)隊(duì)對(duì)蜂王漿蛋白質(zhì)的組成進(jìn)行了深入的研究，在蜂王漿中共檢測(cè)到42種蛋白，分別屬于YELLOW/MRJP家族、代謝相關(guān)蛋白、健康促進(jìn)蛋白、發(fā)育相關(guān)蛋白和未知蛋白；其中13種是首次發(fā)現(xiàn)的分泌蛋白，包括和王漿主蛋白（MRJP）有著極大關(guān)聯(lián)的yellow-e3蛋白前體，6種有著健康促進(jìn)功能的蛋白質(zhì)，5種在代謝過(guò)程中有著重要作用的蛋白質(zhì)以及可能參與級(jí)型分化的protein CREG蛋白；進(jìn)一步檢測(cè)蛋白的糖基化修飾，總共發(fā)現(xiàn)了位于25種糖蛋白上的53個(gè)糖基化位點(diǎn)，其中42個(gè)位點(diǎn)是首次報(bào)道，這一表達(dá)后修飾可能與蜂王漿蛋白質(zhì)成分的功能有著密切的聯(lián)系[1]。該研究團(tuán)隊(duì)還對(duì)東方蜜蜂（Apis cerana）和西方蜜蜂（A.mellifera）蜂王漿蛋白質(zhì)的磷酸化進(jìn)行了研究和比較，在西方蜜蜂王漿中共找到67個(gè)磷酸化位點(diǎn)，位于16種磷酸化蛋白上，而在東方蜜蜂的王漿中，共發(fā)現(xiàn)9種磷酸化蛋白，含有71個(gè)磷酸化位點(diǎn)；這些磷酸化蛋白中有8種同時(shí)存在于兩個(gè)蜂種的王漿中，包括MRJP1-5、MRJP7、icarapin和defensin，但磷酸化位點(diǎn)的數(shù)量和位置有差異；同時(shí)，東方蜜蜂蜂王漿中這8種蛋白的豐度顯著高于西方蜜蜂蜂王漿；研究結(jié)果進(jìn)一步揭示不同蜂種蜂王漿的差異。為了進(jìn)一步研究磷酸化對(duì)蛋白功能的影響，他們進(jìn)一步對(duì)Jelleine-II（TPFKLSLHL）和它的兩種磷酸化產(chǎn)物的抗菌能力進(jìn)行比較研究，結(jié)果顯示，磷酸化對(duì)蛋白質(zhì)的效力有影響且不同磷酸化位點(diǎn)的影響并不相同[2]。

此外，西班牙阿爾梅利亞大學(xué)López-Gutiérrez等利用TurboFlowTM-LC-Orbitrap-MS方法，對(duì)蜂王漿中多酚成分進(jìn)行了檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)15種多酚成分，其中阿魏酸是含量最高的酚酸類(lèi)物質(zhì)（12946～18936 μg/kg）[3]。

2.2 蜂王漿質(zhì)量控制研究新進(jìn)展

蜂王漿新鮮度是蜂王漿質(zhì)量控制研究的一個(gè)熱點(diǎn)和重點(diǎn)。今年，法國(guó)科學(xué)家和中國(guó)科學(xué)家各建立了一套不同的蜂王漿新鮮度檢測(cè)方法。美拉德反應(yīng)的早期產(chǎn)物糠氨酸是食物新鮮度檢測(cè)的一個(gè)常用指示物，也有學(xué)者將其引入蜂王漿新鮮度的測(cè)試，但糠氨酸的提取復(fù)雜而費(fèi)時(shí)。因此，Wytrychowski等對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行了改進(jìn)，使用HILIC LC-MS替代了HPLC-UV，使得糠氨酸的提取過(guò)程得以簡(jiǎn)化[4]。MRJPs家族是蜂王漿中蛋白質(zhì)的主體，浙江大學(xué)Shen等[5]利用高度特異性的MRJP1抗體，建立了一種能有效檢測(cè)蜂王漿中MRJP1含量的ELISA方法；將這一方法用于在40℃下儲(chǔ)存不同時(shí)間的蜂王漿樣品中MRJP1含量的檢測(cè)，結(jié)果顯示，MRJP1含量隨儲(chǔ)存時(shí)間的增加逐步降低，顯示了這一方法有著良好的適用性。

核苷酸、核苷和核酸堿基是一類(lèi)有著重要生理生化作用的物質(zhì)。中國(guó)農(nóng)科院蜜蜂研究所吳黎明等[6]建立了一種能快速準(zhǔn)確地檢測(cè)蜂王漿中17種磷酸腺苷、核苷和核酸堿基的HPLC方法，并對(duì)20個(gè)蜂王漿樣品進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示，除了尿酸以外的其他16種目標(biāo)成分均有檢出，且不同樣本間含量有顯著差異，這為蜂王漿的質(zhì)量控制提供了新的參考。無(wú)獨(dú)有偶，吉林大學(xué)的Liu[7]等也建立了一種使用聚合物整體柱微萃取對(duì)蜂王漿中磷酸腺苷進(jìn)行提取，然后使用HPLC進(jìn)行定量的磷酸腺苷檢測(cè)方法。

Zhou等[8]研究了蜂產(chǎn)品包裝對(duì)蜂產(chǎn)品造成的污染可能性，建立了一種液液萃取配合GC-MS檢測(cè)蜂產(chǎn)品中22種鄰苯二甲酸酯類(lèi)物質(zhì)的檢測(cè)方法，并在蜂王漿樣品中發(fā)現(xiàn)了5種鄰苯二甲酸酯類(lèi)物質(zhì)的微量存在，在未來(lái)蜂王漿的生產(chǎn)和包裝中值得參考。

此外，希臘學(xué)者對(duì)花粉和蜂王漿產(chǎn)地的關(guān)系進(jìn)行了研究[9]。日本學(xué)者對(duì)輻照蜂王漿的辨別方法作了深入的研究[10]。江蘇檢驗(yàn)檢疫局建立了使用元素分析－碳同位素比值質(zhì)譜法判別人工摻糖蜂王漿的方法[11]。

2.2 蜂王漿生物學(xué)活性研究新進(jìn)展

隨著研究的深入和技術(shù)的發(fā)展，對(duì)蜂王漿的功能研究逐步從對(duì)蜂王漿整體功能性研究拓展到了對(duì)蜂王漿中特定成分的功能性研究。

2.2.1 抗菌作用：巴西學(xué)者Cabrera等[13]結(jié)合分子動(dòng)力學(xué)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果，對(duì)抗菌肽Jelleine的作用機(jī)制進(jìn)行了詳盡而深入的分析。已有研究發(fā)現(xiàn)Jelleine的N端殘基對(duì)其抗菌功能有著極大的影響[12]，因此Cabrera等通過(guò)分子動(dòng)力學(xué)模擬的方法對(duì)jelleine1-4的抗菌能力進(jìn)行分析比較，發(fā)現(xiàn)與 jelleine1 N端的脯氨酸殘基相比，jelleine2和jelleine4 N端的蘇氨酸殘基和jelleine3 N端的谷氨酸殘基會(huì)吸引更多水分子，進(jìn)而降低與細(xì)菌細(xì)胞膜的親和性；進(jìn)一步對(duì)jelleine1的作用機(jī)制進(jìn)行深入研究并結(jié)合細(xì)胞膜模型試驗(yàn)和分子動(dòng)力學(xué)模擬后發(fā)現(xiàn)，jelleine1會(huì)和細(xì)胞膜磷酸酯的頭部基團(tuán)結(jié)合，然后相互聚集，最終導(dǎo)致細(xì)胞膜破碎。這一研究讓我們對(duì)蜂王漿中肽類(lèi)成分功能和作用機(jī)制有更深入的認(rèn)識(shí)。

2.2.2 降膽固醇作用：日本學(xué)者Kashima等[14]首次報(bào)道蜂王漿中MRJP1是一個(gè)具有降低膽固醇功能的蛋白。他們首先使用膽汁酸共軛柱對(duì)蜂王漿蛋白進(jìn)行分離，發(fā)現(xiàn)MRJP1-3具有膽汁酸結(jié)合功能；體外研究發(fā)現(xiàn)，MRJP1還具有?；悄懰猁}結(jié)合功能，并能降低膽固醇膠束的溶解性及Caco-2細(xì)胞對(duì)膽固醇的吸收；將MRJP1用于飼喂小鼠，結(jié)果顯示，肝臟的膽固醇分解代謝增強(qiáng)，膽汁酸和膽固醇的排泄顯著增加，其功效甚至要好于β-谷甾醇。

2.2.3 抗衰老作用：蜂王漿的抗衰老作用一直是其功能研究的一個(gè)熱點(diǎn)。比利時(shí)學(xué)者Detienne等[15]將royalactin用于線(xiàn)蟲(chóng)（Caenorhabditis elegans）的研究，結(jié)果顯示，接受royalactin的線(xiàn)蟲(chóng)壽命明顯提高，這也是首次在非昆蟲(chóng)模式生物上報(bào)道royalactin的抗衰老功能；進(jìn)一步比較了多種處理對(duì)royalactin的影響發(fā)現(xiàn)，酶解的royalactin失去延長(zhǎng)壽命的功能，而去糖基化或稍微加熱對(duì)其功能沒(méi)有影響；基因敲除顯示EGFR信號(hào)通路中的lin-3(EGF)和let-23(EGFR)是royalactin起效的重要一環(huán)。波蘭學(xué)者Pyrzanowska等[16]對(duì)蜂王漿在提高老年小鼠空間記憶能力方面的作用進(jìn)行了研究，使用水迷宮來(lái)檢測(cè)小鼠的空間分辨能力，結(jié)果顯示，長(zhǎng)期服用蜂王漿后小鼠的空間辨別能力有一定的提高；之后的解剖顯示，長(zhǎng)期服用蜂王漿會(huì)影響腦部神經(jīng)遞質(zhì)，例如前額皮質(zhì)的5-羥色胺等一元胺。以上結(jié)果顯示了蜂王漿在老年人的保健方面有著極高的應(yīng)用價(jià)值。

2.2.4 免疫調(diào)節(jié)作用：塞爾維亞國(guó)防大學(xué)Mihajlovic等[17]對(duì)蜂王漿脂肪酸的免疫調(diào)節(jié)功能進(jìn)行了進(jìn)一步的研究，用10-HDA和3,10-DDA處理外周血單核細(xì)胞（PMBCs），兩者均表現(xiàn)出劑量相關(guān)的免疫調(diào)節(jié)能力；在高濃度（500 μm）下這兩種脂肪酸都會(huì)抑制細(xì)胞的增殖，并降低IL-2的生產(chǎn)，在這一濃度下10-HDA還會(huì)抑制PMBCs生產(chǎn)IL-1β和TNF-α，在這一濃度下3, 10-DDA并不會(huì)影響細(xì)胞因子的生成。

2.2.5 其它作用：日本慶應(yīng)義塾大學(xué)Imada等[18]將多種蜂產(chǎn)品飼喂給干眼癥小鼠，發(fā)現(xiàn)蜂王漿能有效恢復(fù)小鼠的眼淚分泌功能，并提高淚腺ATP、線(xiàn)粒體含量和AMPK的磷酸化作用；將蜂王漿作用于淚腺腺泡細(xì)胞能提高細(xì)胞鈣離子的濃度，這可能是蜂王漿恢復(fù)眼淚分泌功能的機(jī)制。日本新瀉大學(xué)Kaku等[19]用蜂王漿飼喂卵巢切除小鼠，發(fā)現(xiàn)蜂王漿并不能改善小鼠骨體積的下降，但能有效緩解膠原交聯(lián)的減少，這一作用可能是通過(guò)提高膠原修飾酶的表達(dá)，進(jìn)而改變膠原蛋白的表達(dá)后修飾完成的，最終起到提高骨質(zhì)量的作用。

2.3 蜂王漿的應(yīng)用

2.3.1 醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用：化療和放療過(guò)程中造成的粘膜炎和潰瘍會(huì)嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，因此多個(gè)國(guó)家的研究者都嘗試使用蜂王漿來(lái)改善這類(lèi)癥狀。日本學(xué)者Yamauchi等[20]和土耳其學(xué)者Erdem等[21]分別進(jìn)行了雙盲試驗(yàn)，結(jié)果顯示，服用蜂王漿后患者的癥狀得到了有效的緩解，實(shí)驗(yàn)組患者的愈合速度明顯高于對(duì)照組患者。這一功能也在小鼠模型上得到了驗(yàn)證[22]。

土耳其學(xué)者Gunaldi等[23]還將蜂王漿用于手術(shù)的輔助；硬膜外纖維化是腰背部手術(shù)失敗綜合征的一個(gè)重要原因，通過(guò)對(duì)手術(shù)處施用蜂王漿，能有效降低術(shù)后纖維化程度；植入手術(shù)后的感染是外科手術(shù)上的一大難題，同時(shí)施用蜂王漿雖然不能根除感染，但能有效降低感染的幾率[24]。

多個(gè)國(guó)家的多位學(xué)者將蜂王漿用于緩解藥物副作用，發(fā)現(xiàn)蜂王漿能有效緩解多種藥物的副作用；蜂王漿能有效減少鎮(zhèn)癲劑戊二酸造成的染色體畸變[25]；恢復(fù)康復(fù)龍?jiān)斐傻难宀G酮降低、精子數(shù)下降和睪丸組織病變[26]；緩解博來(lái)霉素造成的生殖能力下降[27]；通過(guò)降低血液中肝相關(guān)酶的表達(dá)和丙二醛的形成，降低咪唑硫嘌呤造成的損傷[28]。

伊朗學(xué)者報(bào)道了兩個(gè)蜂王漿的臨床應(yīng)用試驗(yàn)，一個(gè)是將蜂王漿用于患2型糖尿病的女性，50位只服用降糖藥物的女性病人在雙盲條件下服用安慰劑或蜂王漿補(bǔ)充劑，8周后發(fā)現(xiàn)，服用蜂王漿的病人的空腹血糖和血清糖基化血紅蛋白含量顯著降低，胰島素含量上升，顯示蜂王漿補(bǔ)充劑在糖尿病的控制上有著很好的輔助補(bǔ)充療效[29]；另一個(gè)研究則將目光轉(zhuǎn)向了女性經(jīng)前期綜合癥，110位經(jīng)前期綜合癥患者分別服用安慰劑或蜂王漿制劑進(jìn)行為期兩個(gè)月經(jīng)周期的治療，結(jié)果顯示，蜂王漿能有效緩解女性經(jīng)前期綜合癥的癥狀[30]。

2.3.2 動(dòng)物養(yǎng)殖上的應(yīng)用：不少研究團(tuán)隊(duì)也將蜂王漿用于經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的養(yǎng)殖中。土耳其學(xué)者將蜂王漿用于鵪鶉的飼養(yǎng)，通過(guò)在飼料中添加蜂王漿，能有效提高高密度飼養(yǎng)條件下鵪鶉的飼料轉(zhuǎn)化率和身體各部分多不飽和脂肪酸的含量[31]；埃及學(xué)者則將蜂王漿用于改善高熱環(huán)境下兔子的繁殖性能。與對(duì)照組相比，不同濃度蜂王漿處理組的兔子血液中脂質(zhì)、膽固醇、三酰甘油和低密度脂質(zhì)的含量均下降，睪酮濃度明顯上升，并且肝腎功能都得到了改善[32]；伊朗學(xué)者M(jìn)oghaddam等繼續(xù)對(duì)蜂王漿改善孵化器內(nèi)雞蛋的孵化和發(fā)育能力進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)同時(shí)注射蜂王漿和生理鹽水時(shí)雞蛋的孵化率要高于只注射蜂王漿，但低于正常雞蛋；雖然會(huì)導(dǎo)致孵化率下降，注射蜂王漿可以顯著提高孵化后小雞的體重、心臟重、肝臟重和睪丸重[33]。這些研究顯示蜂王漿在經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)上有著良好的應(yīng)用前景。

2.3.3 蜂學(xué)上的應(yīng)用：蜂王漿對(duì)蜜蜂生理生化的影響一直是蜜蜂生物學(xué)和蜂王漿研究的一大熱點(diǎn)，本年度也有多位學(xué)者在這一領(lǐng)域進(jìn)行了研究。

日本金澤工業(yè)大學(xué)Matsuyama等[34]研究發(fā)現(xiàn)，給籠養(yǎng)蜜蜂飼喂含酪氨酸的食物后，腦部多種神經(jīng)遞質(zhì)含量出現(xiàn)上升，包括多巴胺、酪胺、章魚(yú)胺及其相關(guān)代謝物，并與酪氨酸濃度有著明顯的相關(guān)性；而飼喂蜂王漿的蜜蜂也表現(xiàn)出了相類(lèi)似的變化；而對(duì)于無(wú)王群的研究顯示，與正常無(wú)王群工蜂相比，飼喂高酪氨酸食物的蜜蜂行為發(fā)生變化，而且卵巢明顯變大；這表明蜂王漿中的酪氨酸與蜜蜂腦部神經(jīng)遞質(zhì)的代謝以及蜜蜂的生殖分工可能有著密切的聯(lián)系。

廣東昆蟲(chóng)研究所Zhang等[35]比較了異種蜂王漿對(duì)幼蟲(chóng)的影響，發(fā)現(xiàn)飼喂異種蜂王漿并不會(huì)對(duì)幼蟲(chóng)存活率造成影響，進(jìn)一步使用CSBV侵染幼蟲(chóng)，發(fā)現(xiàn)在飼喂意蜂的蜂王漿后，中蜂幼蟲(chóng)對(duì)CSBV的抵抗力上升；他們還就CSBV侵染和飼喂異種王漿對(duì)幼蟲(chóng)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響進(jìn)行了研究，在中蜂幼蟲(chóng)中，發(fā)現(xiàn)了6種異種蜂王漿造成的差異表達(dá)蛋白、21種CSBV侵染造成的差異蛋白和7種異種蜂王漿與CSBV侵染共同造成的差異蛋白；在西方蜜蜂中，共有17種異種蛋白造成的差異表達(dá)蛋白，26種CSBV造成的差異蛋白和24種異種蜂王漿和CSBV共同造成的差異蛋白。

江西農(nóng)業(yè)大學(xué)Shi等[36]研究異種蜜蜂蜂王漿對(duì)蜜蜂基因可變剪切的影響。將東方蜜蜂和西方蜜蜂的蜂王漿飼喂給西方蜜蜂，發(fā)現(xiàn)發(fā)生可變剪切的基因數(shù)量沒(méi)有差異，但這些基因在不同類(lèi)型可變剪切（外顯子跳躍、內(nèi)含子保留以及5'/3'剪切位點(diǎn)的變化）的分布發(fā)生明顯變化，并涉及多個(gè)重要的代謝通路。該團(tuán)隊(duì)還對(duì)蜜蜂食物中10-HDA含量對(duì)蜜蜂幼蟲(chóng)發(fā)育影響做研究，發(fā)現(xiàn)隨著10-HDA含量的升高，蜜蜂羽化時(shí)的體重隨之下降；同時(shí)組蛋白脫乙酰酶3基因的表達(dá)量也隨10-HDA濃度上升而增加，DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3的表達(dá)量則隨10-HDA濃度上升表現(xiàn)出先減少后增加的趨勢(shì)[37]。

3 蜂王漿專(zhuān)利公布情況

3.1 專(zhuān)利地域分布

作為最大的蜂王漿生產(chǎn)和出口國(guó)，和往年一樣，2014年我國(guó)仍然是專(zhuān)利最多的國(guó)家，這表明我國(guó)在蜂王漿相關(guān)領(lǐng)域的開(kāi)發(fā)熱情和對(duì)知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)的重視。除中國(guó)外，韓國(guó)有2項(xiàng)專(zhuān)利。而在亞洲之外，美國(guó)和俄羅斯各有3項(xiàng)專(zhuān)利，摩洛哥和韓國(guó)各有1項(xiàng)專(zhuān)利在世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)總局申請(qǐng)并獲得通過(guò)。

在2014年中國(guó)蜂王漿專(zhuān)利中，授權(quán)的發(fā)明專(zhuān)利有8項(xiàng)，公布的發(fā)明專(zhuān)利有19項(xiàng)，還有2項(xiàng)實(shí)用新型專(zhuān)利和4項(xiàng)外觀(guān)設(shè)計(jì)專(zhuān)利（表2）。這樣的結(jié)構(gòu)說(shuō)明國(guó)內(nèi)的專(zhuān)利主要集中于創(chuàng)新含量更高的發(fā)明專(zhuān)利，同時(shí)也兼顧實(shí)用類(lèi)技術(shù)和商業(yè)用途設(shè)計(jì)，是一個(gè)合理的分配比例。

表2 2014年度中國(guó)（大陸）蜂王漿專(zhuān)利數(shù)量

3.2 專(zhuān)利領(lǐng)域分布

國(guó)外專(zhuān)利主要集中于具有保健功能的產(chǎn)品和食品，比如保護(hù)皮膚的“Method for endothelial protection with api-phytocomposition(RU-0002524799)”，女性用保健品“Method for improving physical condition in young females(RU-0002512838)”，改善貧血的“Product based on a natural preparation for treating anaemia(WO/ 2014/116093)”，抗炎癥的“Anti-inflammatory proteins and methods of preparation and use thereof (US-20140154803)”等保健產(chǎn)品；以及“Gummy food composition containing royal jelly and production method of same (KR-101388679)”和“Method for producing chocolate containing royal jelly and royal jelly containing chocolate produced by same(KR-1020140005610)”等含有蜂王漿的食品；也有關(guān)于蜂王漿生產(chǎn)的專(zhuān)利，如通過(guò)在蜂王漿生產(chǎn)過(guò)程中使用組蛋白脫乙酰抑制劑，來(lái)改變蜂王漿中MRJP3表達(dá)后修飾的“Use of histone deacetylase inhibitors in changing mrjp3 protein in royal jelly(US-20140288166)"和蜂王漿生產(chǎn)過(guò)程中的自動(dòng)移蟲(chóng)裝置" Automatic grafting apparatus for producing royal jelly (WO/2014/051218)”等。

國(guó)內(nèi)的專(zhuān)利也多與產(chǎn)品開(kāi)發(fā)有關(guān)，如“一種具有護(hù)肝作用的蜂王漿口服液（CN103918963A）”、“一種純天然蜂王漿蛋清面膜膏及生產(chǎn)方法（CN103893080A）”、“一種具有抗輻射功效的人參蜂王漿顆粒（CN104095175A）”、“ 一 種 蜂 王 漿 奶 飲 料（CN103891892A）”等；蜂王漿的加工和質(zhì)量控制也是發(fā)明專(zhuān)利的一大熱點(diǎn)，如“蜂王漿中得到王漿主蛋白和活性濾后液的超濾膜分離方法（CN103772497A）”、“一種能提高蜂王漿中10-羥基-2-癸烯酸含量的生產(chǎn)方法（CN103947922A）”、“蜂王漿中三種脂肪酸含量的檢測(cè)方法及應(yīng)用（CN104155401A）”；此外，蜜蜂生物學(xué)研究在蜂產(chǎn)品生產(chǎn)上的價(jià)值也逐步凸顯，“用蜜蜂LOC409360基 因 檢 測(cè) 蜂 王 漿 產(chǎn) 量 的 方 法（CN103952489A）”“、用蜜蜂LOC726515基因檢測(cè)蜂王漿產(chǎn)量的方法（CN103937903A）”“、用蜜蜂verm基因檢測(cè)蜂王漿產(chǎn)量的方法（CN103937902A）”等方法為蜜蜂育種提供新的思路。實(shí)用新型專(zhuān)利則更注重實(shí)用技術(shù)的保護(hù)，如“用于蜂王漿機(jī)械化生產(chǎn)的鉗蟲(chóng)機(jī)中的鉗蟲(chóng)機(jī)構(gòu)（CN203407343U）”、“由一排平行圓柱形幾何體組成的快速提取蜂王漿的設(shè)備（CN203407344U）”等。

4 研究展望

相比2013年度，2014年度蜂王漿研究熱度有了一定程度的回升，在多個(gè)領(lǐng)域都有了可圈可點(diǎn)的研究成果。同時(shí)，國(guó)內(nèi)專(zhuān)利數(shù)量保持穩(wěn)定，說(shuō)明業(yè)內(nèi)對(duì)知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)仍很重視，對(duì)蜂產(chǎn)品的創(chuàng)新也有著很高的熱情。

從近幾年研究趨勢(shì)可以看出，蜂王漿中的蛋白質(zhì)是研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)，對(duì)蜂王漿中蛋白質(zhì)單體的功能分析，對(duì)蜂王漿的功能分析和蜂王漿質(zhì)量控制有著極高價(jià)值；而隨著檢測(cè)手段的不斷發(fā)展，使得我們能進(jìn)一步深入挖掘蜂王漿蛋白質(zhì)組分更全面地了解蛋白質(zhì)組成，也能對(duì)蜂王漿的功能分析提供新的思路和方向；蜂王漿對(duì)蜜蜂生物學(xué)功能也是值得深入研究的領(lǐng)域。

質(zhì)量控制是蜂王漿產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要保障，對(duì)蜂王漿質(zhì)量控制的研究不但要在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，還要更多地與生產(chǎn)相結(jié)合，將研究成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。中國(guó)和以日本、歐美為代表的發(fā)達(dá)國(guó)家仍然是蜂王漿研究的先鋒和主力，很大比例的高質(zhì)量論文出自這些國(guó)家的研究團(tuán)隊(duì)。但今年伊朗、埃及和土耳其等一些發(fā)展中國(guó)家的蜂王漿研究已經(jīng)表現(xiàn)出良好的態(tài)勢(shì)，今后應(yīng)能蓬勃發(fā)展。加強(qiáng)全球蜂王漿的基礎(chǔ)與應(yīng)用研究，帶動(dòng)蜂王漿科研與產(chǎn)業(yè)的良性發(fā)展是未來(lái)的必然趨勢(shì)。

[1]Zhang L,Han B,Li RL,et al.Comprehensive identification of novel proteins and N-glycosylation sites in royal jelly,BMC Genomics,2014,15:135

[2]Han B,Fang Y,Feng M,et al.In-depth phosphoproteomic analysis of royal jelly derived from Western and Eastern honeybee species,J Proteome Res,2014,13:5928-5943.

[3]Lopez-Gutierrez N,Aguilera-Luiz MD,Romero-Gonzalez R,et al.Fast analysis of polyphenols in royal jelly products using Automated Turboflow(Tm)-Liquid Chromatography-Orbitrap High Resolution Mass Spectrometry,J Chromatography B,2014,973:17-28.

[4]Wytrychowski M,Paisse JO,Casabianca H,et al.Assessment of royal jelly freshness by Hilic Lc-Ms determination of furosine,Industrial Crops And Products,2014,62:313-317.

[5]Shen LR,Wang YR,Zhai L,et al.Determination of royal jelly freshness by Elisa with a highly specific anti-apalbumin 1,Major Royal Jelly Protein 1 Antibody,J Zhejiang Univ-Sci B 2014.(In press)

[6]Wu L,Chen L,Selvaraj JN,et al.Identification of the distribution of adenosine phosphates,nucleosides and nucleobases in royal jelly,Food Chem,2015,173:1111-1118.

[7]Liu D,Zhang T,Cheng Y,et al.Poly(glycidyl methacrylate-co-N-methylolacrylamide-Co-ethylene dimethacrylate)monolith coupled to high-performance liquid chromatography for the determination of adenosine phosphates in royal jelly,J Sep Sci,2014,37: 1826-1833.

[8]Zhou J,Qi Y,Wu H,et al.Simultaneous determination of trace migration of phthalate esters in honey and royal jelly by Gc-Ms,J Sep Sci,2014,37:650-657.

[9]Dimou M,Tananaki C,Goras G,et al.The effect of pollen supplements on the determination of the geographical origin of royal jelly,J Apicul Res,2014,53:124-128.

[10]Yamaoki R,Kimura S,Ohta M,Electron spin resonance spectral analysis of irradiated royal jelly,Food Chem,2014,143:479-483.

[11]費(fèi)曉慶,沈崇鈺,吳斌,等.元素分析-碳同位素比值質(zhì)譜法在蜂王漿摻假鑒定中的應(yīng)用,質(zhì)譜學(xué)報(bào),2014,144-48.

[12]Zagrovic B,Gattin Z,Lau JK,et al.Structure and dynamics of two beta-peptides in solution from molecular dynamics simulations validated against experiment,Eur Biophys J,2008,37:903-912.

[13]Cabrera MP,Baldissera G,Lda CSG,et al.Combining experimental evidence and molecular dynamic simulations to understand the mechanism of action of the antimicrobial octapeptide jelleine-I, Biochem,2014,53:4857-4868.

[14]Kashima Y,Kanematsu S,Asai S,et al.Identification of a novel hypocholesterolemic protein,Major Royal Jelly Protein 1,derived from royal jelly,PLoS ONE,2014,9,e105073.

[15]Detienne G,De Haes W,Ernst UR,et al.Royalactin extends lifespan of Caenorhabditis elegans through epidermal growth factor signaling,Experiment Gerontol,2014,60:129-135.

[16]Pyrzanowska J,Piechal A,Blecharz-Klin K,et al.Long-term administration of Greek royal jelly improves spatial memory and in

fluences the concentration of brain neurotransmitters in naturally aged Wistar male rats,J Ethnopharmacol,2014,155:343-351.

[17]Mihajlovic D,Vucevic D,Chinou I,et al.Royal jelly fatty acids modulate proliferation and cytokine production by human peripheral blood mononuclear cells,Euro Food Res Tec,2014,238:881-887.

[18]Imada T,Nakamura S,Kitamura N,et al.Oral administration of royal jelly restores tear secretion capacity in rat blink-suppressed dry eye model by modulating lacrimal gland function,PLoS ONE, 2014,9(9):e106338

[19]Kaku M,Rocabado JMR,Kitami M,et al.Royal jelly affects collagen crosslinking in bone of ovariectomized rats,J Func Foods, 2014,7:398-406.

[20]Yamauchi K,Kogashiwa Y,Moro Y,et al.The effect of topical application of royal jelly on chemoradiotherapy-induced mucositis in head and neck cancer:A preliminary study,Int J Otolaryngol, 2014,Article ID 974967

[21]Erdem O,Gungormus Z,The effect of royal jelly on oral mucositis in patients undergoing radiotherapy and chemotherapy,Holist Nurs Pract,2014,28:242-246.

[22]Cihan YB,Deniz K,The effects of royal jelly against radiationinduced acute oral mucositis,Uhod-Uluslararasi Hematoloji-Onkoloji Dergisi,2014,24:36-44.

[24]Gunaldi O,Daglioglu YK,Tugcu B,et al.Antibacterial effect of royal jelly for preservation of implant-related spinal infection in rat, Turkish Neurosurgery,2014,24:249-252.

[25]Galaly SR,Abdella EM,Mohammed HM,Effects of royal jelly on genotoxicity and nephrotoxicity induced by valproic acid in albino mice,Beni-Suef Univ J Basic Appl Sci,2014,3:1-15.

[26]Najafi G,Nejati V,Jalali AS,et al.Protective role of royal jelly in oxymetholone-induced oxidative injury in mouse testis,Iran J Toxicol Vol,2014,8(25):1073-1080.

[27]Amirshahi T,Najafi G,Nejati V,Protective Effect of royal jelly on fertility and biochemical parameters in bleomycin-induced male rats,Iran J Reprod Med,2014,12(3):209-216.

[28]Elkady AA,Ibrahim RM,Royal jelly attenuates ionizing radiation induced cardiac toxicity in male albino rats,Med J Cairo Univ, 2014,82(1):13-18.

[29]Pourmoradian S,Mahdavi R,Mobasseri M,et al.Effects of royal jelly supplementation on glycemic control and oxidative stress factors in type 2 diabetic female:a randomized clinical trial,Chinese J Integrative Med,2014,20:347-352.

[30]Taavoni S,Barkhordari F,Goushegir A,et al.Effect of royal jelly on premenstrual syndrome among iranian medical sciences students:A randomized,triple-blind,placebo-controlled study, Complem Therap In Med,2014,22:601-606.

[31]Seven L,Simsek UG,Gokce Z,et al.The effects of royal jelly on performance and fatty acid profiles of different tissues in quail (Coturnix coturnix japonica)reared under high stocking density, Turkish J Veterin Animal Sci,2014,38:271-277.

[32]El-Hanoun AM,Elkomy AE,Fares WA,et al.Impact of royal jelly to improve reproductive performance of male rabbits under hot summer conditions,World Rabbit Sci,2014,22:241-248.

[33]Moghaddam AA,Borji M,Komazani D,Hatchability rate and embryonic growth of broiler chicks following in ovo injection royal jelly,British Poultry Sci,2014,55:391-397.

[34]Matsuyama S,Nagao T,Sasaki K,Consumption of tyrosine in royal jelly increases brain levels of dopamine and tyramine and promotes transition from normal to reproductive workers in queenless honey bee colonies,Gen Comp Endocrinol,2014,211C:1-8.

[35]Zhang Y,Zhang GZ,Huang X,et al.Proteomic analysis of Apis cerana and Apis mellifera larvae fed with heterospecific royal jelly and by csbv challenge,PLoS ONE,2014,9(8):e102663.

[36]Shi YY,Huang ZY,Wu XB,et al.Changes in alternative splicing in Apis mellifera bees fed Apis cerana royal jelly,J Apicul Sci, 2014,58:25-31.

[37]Wang WX,Tian LQ,Huang Q,et al.Effects of 10-hydroxy-2-decenoic acid on the development of honey bee(Apis mellifera)larvae,J Apicul Res,2014,53:171-176.

國(guó)家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專(zhuān)項(xiàng)（CARS-45）、國(guó)家科技支撐計(jì)劃（2011BAD33B04）、浙江省重大科技專(zhuān)項(xiàng)（2012C12906-19）資助

胡福良，E-mail:flhu@zju.edu.cn