MTA-1及PCNA在腺性膀胱炎中的表達(dá)及臨床意義

劉旭

MTA-1及PCNA在腺性膀胱炎中的表達(dá)及臨床意義

劉旭

目的 探討轉(zhuǎn)移相關(guān)基因(MTA-1)及增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)在腺性膀胱炎中的表達(dá)和臨床意義。方法 選取本院膀胱移行細(xì)胞癌標(biāo)本、腺性膀胱炎標(biāo)本、正常膀胱黏膜標(biāo)本各20例, 使用免疫組織化學(xué)方法分別進(jìn)行檢測(cè)標(biāo)本中的MTA-1及PCNA的表達(dá)。記錄三組標(biāo)本中MTA-1和PCNA的表達(dá)陽(yáng)性率。結(jié)果 MTA-1在三組中的表達(dá)陽(yáng)性率相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 和正常膀胱黏膜比較MTA-1在其他兩組中表達(dá)的陽(yáng)性率較高(P＜0.05), 和膀胱移行細(xì)胞癌比較MTA-1在腺性膀胱炎中表達(dá)陽(yáng)性率較低(P＞0.05)。PCNA在三組中的表達(dá)陽(yáng)性率相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 在腺性膀胱炎和膀胱移行細(xì)胞癌中表達(dá)陽(yáng)性率較高(P＜0.05), 和膀胱移行細(xì)胞癌比較在腺性膀胱炎中表達(dá)陽(yáng)性率較低(P＜0.05)。結(jié)論 MTA-1及PCNA的表達(dá)在膀胱腫瘤中具有十分重要的意義, 對(duì)膀胱炎的性質(zhì)和發(fā)展具有預(yù)測(cè)功能。

轉(zhuǎn)移相關(guān)基因；增殖細(xì)胞核抗原；腺性膀胱炎；臨床意義；表達(dá)

MTA-1是一種新發(fā)現(xiàn)的和腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)的新基因, 在前列腺癌、骨肉瘤、膀胱癌、胰腺癌、肺癌、肝癌、食管癌、胃癌等腫瘤中都有所表達(dá), 和腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有著密切的相關(guān)性, 是目前腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移研究中重要的腫瘤標(biāo)記物之一。PCNA的陽(yáng)性表達(dá)程度和腫瘤的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率、增殖活性、預(yù)后均有一定的關(guān)聯(lián), 是目前腫瘤細(xì)胞增殖動(dòng)力檢測(cè)的重要指標(biāo)之一［1］。本文對(duì)MTA-1及PCNA在腺性膀胱炎中的表達(dá)和臨床意義進(jìn)行了探討, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年2月～2014年2月本院采集的膀胱移行細(xì)胞癌標(biāo)本納入膀胱移行細(xì)胞癌組、腺性膀胱炎標(biāo)本納入腺性膀胱炎組、正常膀胱黏膜標(biāo)本納入正常膀胱黏膜組, 各20例。膀胱移行細(xì)胞標(biāo)本為由尿道膀胱腫瘤電切術(shù)后和膀胱全切術(shù)后所采集的樣本, 腺性膀胱炎標(biāo)本為術(shù)前活檢樣本, 正常膀胱黏膜標(biāo)本為活檢樣本。按照WHO病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí), 60例標(biāo)本中有45例標(biāo)本為G1級(jí), 有9例標(biāo)本為G2級(jí), 有6例標(biāo)本為G3級(jí)；按照UICC-TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn)分類(lèi), 有18例標(biāo)本為浸潤(rùn)性, 有42例標(biāo)本為淺表性。

1.2 方法 對(duì)所有的標(biāo)本進(jìn)行大小為0.5 cm×0.5 cm×0.1 cm的組織塊切片, 使用4%多聚甲醛進(jìn)行固定, 用石蠟進(jìn)行包埋處理, 當(dāng)石蠟切片脫蠟融成水后加入1%甲醇雙氧水,在室溫下進(jìn)行10 min孵育, 使用微波進(jìn)行抗原修復(fù), 溫度降至室溫后將正常山羊血清封閉液滴入, 放置20 min后將血清甩去, 將MTA-1或者是PCNA一抗滴入, 放置到4℃的濕盒中保存一夜后① 使用0.01 mol/L的PBS進(jìn)行三次沖洗, 每次沖洗5 min, 將生物素化二抗滴入, 放置到37℃的溫度中進(jìn)行20 min孵育。② 使用0.01 mol/L的PBS進(jìn)行三次沖洗, 每次沖洗5 min, 將辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液加入, 在37℃溫度下進(jìn)行20 min孵育。③ 使用0.01 mol/L的PBS進(jìn)行三次沖洗, 每次沖洗5 min, 在1ml蒸餾水中各滴入一滴DAB顯色試劑盒中的A、B、C顯色劑, 進(jìn)行充分混勻后加入到切片中,在顯微鏡下對(duì)顯色時(shí)間進(jìn)行控制。每次試驗(yàn)都設(shè)置陰性進(jìn)行比較。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 使用多功能真彩色細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)對(duì)每張切片進(jìn)行連續(xù)觀察, 并對(duì)各自的陽(yáng)性細(xì)胞百分率進(jìn)行計(jì)算。判斷標(biāo)準(zhǔn)為0～3分：0分為染色呈陰性, 陽(yáng)性細(xì)胞百分率低于10%；1分為染色呈弱淺黃色, 陽(yáng)性細(xì)胞百分率在10%～25%范圍內(nèi)；2分為染色呈清晰棕黃色, 陽(yáng)性細(xì)胞百分率在25%～50%范圍內(nèi)；3分為染色呈強(qiáng)棕褐色, 陽(yáng)性細(xì)胞百分率高于50%。兩種指標(biāo)之和超過(guò)2分則為陽(yáng)性, 反之為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 三組標(biāo)本的MTA-1、PCNA表達(dá)陽(yáng)性率比較［n (%)］

3 討論

在我國(guó)泌尿系統(tǒng)疾病中, 膀胱癌是發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一, 主要是由于轉(zhuǎn)移或者是術(shù)后復(fù)發(fā)引起的, 因此盡早的發(fā)現(xiàn)對(duì)臨床治療的療效具有重要的作用。通過(guò)本研究表明,和正常膀胱黏膜比較, MTA-1在其他兩組中表達(dá)的陽(yáng)性率較高, 且正常膀胱黏膜和腺性膀胱炎之間有明顯差異, 和膀胱移行細(xì)胞癌有密切的關(guān)系, 在腺性膀胱炎中表達(dá)陽(yáng)性率低于膀胱移行細(xì)胞癌, 對(duì)腺性膀胱炎是否是介于正常膀胱黏膜和膀胱移行細(xì)胞癌之間的中間界點(diǎn)具有推測(cè)意義, 因此MTA-1能夠用于膀胱腫瘤和腺性膀胱炎的關(guān)系研究［2］。PCNA和腫瘤等細(xì)胞增殖性疾病的發(fā)生、發(fā)展具有一定的關(guān)聯(lián), 在膀胱癌中的表達(dá)率較高, 且和臨床分期、腫瘤病理分級(jí)等指標(biāo)有一定的聯(lián)系, 所以PCNA的表達(dá)是對(duì)膀胱癌預(yù)后判斷的重要指標(biāo), 能夠應(yīng)用于腺性膀胱炎和膀胱腫瘤之間關(guān)系的研究［3］。

綜上所述, 腺性膀胱炎存在向膀胱移行細(xì)胞癌轉(zhuǎn)變的可能性, MTA-1、PCNA對(duì)腺性膀胱炎和膀胱腫瘤關(guān)系的研究具有十分重要的作用。

［1］ 王磊,王煒,王照,等.PCNA在腺性膀胱炎中的表達(dá)及臨床意義.河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2014, 35(4):418-420.

［2］ 楊占鋒,許長(zhǎng)寶,趙興華,等.MTA-1與KISS-1在膀胱癌中的表達(dá)及臨床病理意義.江蘇醫(yī)藥, 2013, 39(11):1295-1298.

［3］ 王磊,王煒,王照,等.COX-2及 PCNA 在腺性膀胱炎中的表達(dá)及臨床意義.河北醫(yī)藥, 2014(10):1458-1460.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.03.043

2014-09-22］

450000 鄭州市第二人民醫(yī)院