泛發(fā)性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的研究

韓 瑩 程 欣

泛發(fā)性濕疹患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的研究

韓 瑩 程 欣

目的 探討泛發(fā)性濕疹患者的免疫功能變化。方法 應(yīng)用流式細(xì)胞儀分析檢測200例泛發(fā)性濕疹患者(泛發(fā)性濕疹組)外周血中的淋巴細(xì)胞亞群, 并與200例正常人(正常組)進(jìn)行比較。結(jié)果 與正常組相比泛發(fā)性濕疹組的CD3+T細(xì)胞降低, CD3+CD4+T細(xì)胞降低, CD3+CD8+T細(xì)胞升高, CD3-CD16+56+NK細(xì)胞降低, CD4+/CD8+降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 免疫功能的紊亂是泛發(fā)性濕疹患者發(fā)病的一個(gè)重要機(jī)制, 在泛發(fā)性濕疹的發(fā)生、發(fā)展過程中可能起到重要的作用。

泛發(fā)性濕疹；淋巴細(xì)胞亞群；流式細(xì)胞分析法

泛發(fā)性濕疹是一種泛發(fā)或散發(fā)于全身多個(gè)部位的炎癥性、瘙癢性皮膚病, 具有皮膚多形性、瘙癢劇烈、滲出傾向、反復(fù)發(fā)作、難以治愈的臨床特點(diǎn)。泛發(fā)性濕疹病因不明, 一般認(rèn)為是多種內(nèi)外因素作用所致的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。為了進(jìn)一步探討泛發(fā)性濕疹發(fā)病與機(jī)體免疫功能的關(guān)系, 作者對200例泛發(fā)性濕疹患者的淋巴細(xì)胞亞群的狀態(tài)進(jìn)行觀察, 分析結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 200例泛發(fā)性濕疹患者(泛發(fā)性濕疹組)均系2013年8月～ 2014年8月本院皮膚科確診病例, 其中男108例, 女92例, 年齡18～70歲, 平均年齡(47.82±21.00)歲。所有患者均無其他免疫系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病。檢測前1個(gè)月內(nèi)未接受過任何免疫治療。正常組200例均為本院健康體檢者, 其中男105例, 女95例, 年齡22～70歲, 平均年齡(46.48±15.00)歲。兩組性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 主要試劑與儀器 美國Becton-Dickinson(BD)公司生產(chǎn)的Simultest IMK Lymphocytes Kit檢測試劑盒, 其組成Isotype Control(MouseIgG1/IgG2a)；CD3-FITC/CD19-PE；CD3-FITC/ CD4-PE；CD3-FITC/CD8-PE；CD3-FITC/CD16+CD56-PE；FACS Lysing Solution紅細(xì)胞裂解液。流式細(xì)胞儀由美國Becton-Dickinson(BD)公司生產(chǎn), 型號為FACSCalibur型。

1.3 方法 流式細(xì)胞分析法：抽取靜脈血2 ml, 用20 IU/ml EDTA-K2抗凝, 取流式上樣管加熒光抗體20 μl與0.1 ml抗凝血混勻, 室溫避光反應(yīng)20 min, 加10%溶血素混勻, 室溫避光反應(yīng)10 min, 待管內(nèi)液體透亮, 然后1500 r/min離心5 min, 棄上清, 后加入1 ml磷酸鹽緩沖液(PBS)混勻, 1500 r/min離心5 min, 棄上清, 然后加入0.5 ml PBS混勻, 制成單細(xì)胞懸液標(biāo)本, 通過流式細(xì)胞儀對待測細(xì)胞進(jìn)行檢測分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( -x±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

泛發(fā)性濕疹組與正常組外周血淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果中, CD3+T細(xì)胞降低, CD3+CD4+T細(xì)胞降低, CD3+CD8+T細(xì)胞升高, CD3-CD16+56+NK細(xì)胞降低, CD4+/CD8+降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), CD3-CD19+比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較( x-±s)

3 討論

濕疹的病因和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜, 有研究表明免疫功能異常是其發(fā)病的重要環(huán)節(jié)［1,2］。本研究中顯示泛發(fā)性濕疹組與正常組相比較, CD3+CD4+T細(xì)胞降低, CD3-CD16+56+NK細(xì)胞降低, 說明泛發(fā)性濕疹患者T細(xì)胞、NK細(xì)胞功能發(fā)生紊亂, 與文獻(xiàn)相符［3］, 但本研究還顯示了CD3+CD8+T細(xì)胞升高, 可能因?yàn)镃D3+CD8+抑制了細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷功能,使機(jī)體處于免疫抑制狀態(tài), 進(jìn)而使機(jī)體逃避免疫監(jiān)視, 因此CD3+CD8+升高可能是導(dǎo)致濕疹泛發(fā)的一個(gè)重要因素。CD4+/ CD8+比值體現(xiàn)T淋巴細(xì)胞各亞群之間相互制約, 相互協(xié)助,處于動(dòng)態(tài)平衡, CD4+/CD8+比值降低進(jìn)一步反映T淋巴細(xì)胞的功能紊亂狀態(tài)。

綜上所述, 在泛發(fā)性濕疹的發(fā)生、發(fā)展的過程中細(xì)胞免疫起到了重要的作用, 認(rèn)為其細(xì)胞免疫功能、免疫調(diào)節(jié)可能受到一定影響, 致人體免疫失調(diào), 可能是泛發(fā)性濕疹反復(fù)發(fā)作的一個(gè)重要的內(nèi)因。

［1］ 周淑英, 劉玉峰, 夏汝山, 等.皮炎濕疹患者外周血單個(gè)核細(xì)胞分泌Th1/Th2細(xì)胞因子和水平檢測及意義.第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào), 2001, 22(24):2266-2268.

［2］ 顧恒.特應(yīng)性皮炎的免疫療法.國外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊, 1999, 25(3):135-138.

［3］ 后桂榮, 曾抗, 周再高.濕疹患者T淋巴細(xì)胞亞群及自然殺傷細(xì)胞的檢測及意義.臨床皮膚科雜志, 2003, 32(9):522.

Research of lymphocyte subpopulation in peripheral blood of generalized eczema patients

HAN Ying，CHENG Xin.
Department of Dermatology， Shenyang City the Seventh People’s Hospital， Shenyang 110003， China

Objective To investigate changes of immunologic function in generalized eczema patients.Methods Lymphocyte subpopulation in peripheral blood of 200 generalized eczema patients (generalized eczema group) were detected by flow cytometry method, and they were compared with those in 200 normal people (normal group).Results Compared with the normal group, the generalized eczema group had decreased CD3+T cells, CD3+CD4+T cells, CD3-CD16+56+NK cells, CD4+/CD8+T cells, and increased CD3+CD8+T cells.The difference had statistical significance (P＜0.05).Conclusion Immune function disorder is one of the main mechanism of generalized eczema patients, and it acts with important effect in occurrence and progress of generalized eczema.

Generalized eczema; Lymphocyte subpopulation; Flow cytometry method

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.21.022

2015-01-28］

110003 沈陽市第七人民醫(yī)院皮膚科

程欣