纖維支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗液噬菌體裂解法對(duì)痰菌陰性肺結(jié)核的診斷價(jià)值研究

林健球 謝仁岐

纖維支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗液噬菌體裂解法對(duì)痰菌陰性肺結(jié)核的診斷價(jià)值研究

林健球 謝仁岐

目的 探討纖維支氣管鏡(簡(jiǎn)稱纖支鏡)聯(lián)合刷檢、活檢及支氣管肺泡灌洗液(BALF)噬菌體裂解法對(duì)痰菌陰性肺結(jié)核(SNPTB)的診斷價(jià)值。方法 納入SNPTB患者100例, 隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組, 每組50例。實(shí)驗(yàn)組予纖支鏡刷檢聯(lián)合刷檢、活檢及BALF噬菌體裂解法檢查, 以任意一項(xiàng)陽(yáng)性為檢測(cè)陽(yáng)性；對(duì)照組予傳統(tǒng)痰抗酸染色、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、結(jié)核菌素試驗(yàn)(PPD)、血結(jié)核抗體檢測(cè), 以任意一項(xiàng)陽(yáng)性為檢測(cè)陽(yáng)性。對(duì)比兩組診斷效果, 并對(duì)比實(shí)驗(yàn)組三種檢測(cè)方案獨(dú)立陽(yáng)性率。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性檢出率94.0%, 明顯高于對(duì)照組68.0%, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；實(shí)驗(yàn)組中刷檢陽(yáng)性率66.0%、活檢陽(yáng)性率61.9%, 均明顯低于BALF噬菌體裂解法陽(yáng)性檢出率92.0%, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0125)。結(jié)論 多種纖支鏡檢測(cè)方案聯(lián)合, 對(duì)SNPTB的診斷效果極佳；這些檢測(cè)方案中, 又以BALF噬菌體裂解法診斷價(jià)值最高。

肺結(jié)核；診斷；纖維支氣管鏡；肺泡灌洗；噬菌體裂解法

我國(guó)是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一, 肺結(jié)核患病率高而病理發(fā)現(xiàn)率低［1］。臨床認(rèn)為早期診斷、及時(shí)治療可有效提升療效、預(yù)防復(fù)發(fā), 且可節(jié)省經(jīng)濟(jì)開支, 然而現(xiàn)階段SNPTB已逐漸成為活動(dòng)性肺結(jié)核的主要類型, 其痰檢抗酸桿菌陽(yáng)性率多＜40%, 且即便結(jié)果提示陽(yáng)性, 依舊難以區(qū)分結(jié)核或非結(jié)核分枝桿菌［2］, 此類患者其他臨床表現(xiàn)亦缺乏特異性, 漏診率高。近期研究指出纖支鏡刷檢、活檢、BALF對(duì)SNPTB可能具有較高的診斷價(jià)值, 然而刷檢多為盲檢、活檢結(jié)果又受取材效果的影響, 均有一定局限性, 相較而言, BALF適用性更強(qiáng)［3］。以此為基礎(chǔ), 本研究重點(diǎn)探討了BALF結(jié)合噬菌體裂解法對(duì)SNPTB的診斷價(jià)值, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年5月～2014年5月入院的100例患者, 均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：參考臨床癥狀、體征、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)檢查等, 擬診斷為肺結(jié)核, 且至少3次痰涂片、至少1次PCR診斷為陰性；入院前未行任何抗結(jié)核治療；能夠配合檢查；知情同意；未合并凝血功能障礙。其中男57例,女43例, 年齡22～80歲, 平均年齡(45±9)歲, 隨機(jī)將納入對(duì)象分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組, 各50例, 兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 對(duì)照組均行傳統(tǒng)痰抗酸染色、PCR、PPD試驗(yàn)、血結(jié)核抗體檢測(cè), 以任意一項(xiàng)陽(yáng)性為陽(yáng)性診斷, 統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性診斷率。實(shí)驗(yàn)組行纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測(cè),以任意一項(xiàng)陽(yáng)性為陽(yáng)性診斷, 統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性診斷率及各子項(xiàng)陽(yáng)性診斷率。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)組采用纖支鏡檢測(cè), 方法如下：型號(hào)BF-P150纖支鏡(奧林巴斯公司), 已按標(biāo)準(zhǔn)方案消毒, 通過(guò)鏡檢后是否對(duì)下次檢測(cè)結(jié)果造成影響, 證實(shí)為消毒可靠。參考X線胸片探查并確定病變部位；發(fā)現(xiàn)病灶后, 如其表面存在壞死組織, 優(yōu)先清除；隨后行刷檢及活檢取材；然后行支氣管肺泡灌洗, 灌洗液為無(wú)菌生理鹽水, 預(yù)先控溫至37℃, 共20 ml,分2～3次灌入相應(yīng)位置, 負(fù)壓回收, 送行噬菌體裂解法檢測(cè)。如未能發(fā)現(xiàn)明顯病灶, 則參考X線胸片所示病灶, 在相應(yīng)區(qū)域行刷檢, 隨后參考前述方案, 灌洗后取灌洗液送檢, 此時(shí)不予活檢。如影像學(xué)檢測(cè)亦未見明顯病灶, 則鏡下取疑似病灶區(qū)域, 取標(biāo)本。行活檢的組織均要求60 min內(nèi)送行細(xì)菌學(xué)及組織學(xué)檢查；刷檢物制涂片, 行抗酸染色找結(jié)核分枝桿菌；灌洗液回收量一般為5～15 ml, 嚴(yán)格參考結(jié)核分枝桿菌噬菌體裂解試劑盒(Phage Tek MBTM, 荷蘭)說(shuō)明書檢測(cè), 每次檢測(cè)均設(shè)空白對(duì)照、噬菌體對(duì)照、殺毒劑對(duì)照、指示細(xì)胞對(duì)照、陽(yáng)性及陰性對(duì)照, 在對(duì)照樣本結(jié)果正確的前提下, 觀察實(shí)驗(yàn)樣本的檢測(cè)結(jié)果。噬菌體裂解法陽(yáng)性指標(biāo)為出現(xiàn)大小不等的噬菌斑, 相互融合后可呈現(xiàn)透明狀；陰性指標(biāo)為細(xì)胞均勻生長(zhǎng),未見噬菌斑。同時(shí)統(tǒng)計(jì)纖支鏡所致不良反應(yīng)及并發(fā)癥發(fā)生率,以評(píng)價(jià)其安全性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。 P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 纖支鏡檢測(cè)與常規(guī)檢測(cè)方案對(duì)比 對(duì)照組性常規(guī)檢測(cè)方案, 得出陽(yáng)性診斷34例, 占68.0%, 其中痰抗酸染色陽(yáng)性11例、PCR陽(yáng)性21例、PPD實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性14例、血抗結(jié)核抗體檢測(cè)陽(yáng)性18例, 部分患者多項(xiàng)檢測(cè)均陽(yáng)性。實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性診斷47例, 占94.0%, 組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比 三組間三種檢測(cè)方案的陽(yáng)性檢測(cè)率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05), 續(xù)行χ2分割檢驗(yàn), 指出纖支鏡刷檢、活檢陽(yáng)性檢出率均明顯低于BALF噬菌體裂解法, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0125)。見表2。

表1 纖支鏡檢測(cè)與常規(guī)檢測(cè)方案對(duì)比［n(%)］

表2 纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測(cè)結(jié)果對(duì)比［n(%)］

2.3 纖支鏡所致不良反應(yīng)與并發(fā)癥分析 實(shí)驗(yàn)組50例患者術(shù)后均出現(xiàn)咳嗽反應(yīng), 未予醫(yī)療干預(yù), 自然消失；21例術(shù)后2 d內(nèi)出現(xiàn)痰中帶血, 予止血及對(duì)癥干預(yù)后, 迅速緩解并消失；1例術(shù)后150 min時(shí)出現(xiàn)發(fā)熱, 物理降溫、應(yīng)用抗生素120 min后體溫恢復(fù)正常。未見其他不良反應(yīng), 未見肝腎功能損傷及其他嚴(yán)重并發(fā)癥。

3 討論

本研究證實(shí), 對(duì)灌洗液行噬菌體裂解法檢測(cè), 能夠取得較佳的診斷效果。該檢測(cè)方案的原理為噬菌體對(duì)結(jié)合分子桿菌有選擇性裂解作用, 當(dāng)樣本中含有活性結(jié)核分支桿菌時(shí),噬菌體將侵入其中、大量繁殖, 從裂解細(xì)菌中釋放出后, 又會(huì)感染指示細(xì)胞, 最終形成噬菌斑。反之, 當(dāng)樣本中不存在結(jié)核分枝桿菌時(shí), 將不會(huì)形成噬菌斑［4］。其優(yōu)勢(shì)在于相較培養(yǎng)法, 檢測(cè)周期明顯更短, 可于當(dāng)日得出診斷結(jié)果, 能夠充分滿足肺結(jié)核早期診斷、治療的要求。

本研究同時(shí)分析了纖支鏡檢測(cè)的安全性, 結(jié)果指出患者術(shù)后僅表現(xiàn)出可控的輕度不良反應(yīng), 說(shuō)明纖支鏡檢測(cè)不會(huì)對(duì)患者身體產(chǎn)生額外損傷, 安全性較高。

綜上所述, 本研究證實(shí)纖維支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗液噬菌體裂解法檢測(cè), 對(duì)痰菌陰性肺結(jié)核均有較好的診斷價(jià)值, 合理結(jié)合兩者, 能夠進(jìn)一步提升檢出效果。

［1］ 李振生, 李德新, 陳素麗, 等.結(jié)核菌噬菌體生物擴(kuò)增法與結(jié)核菌DNA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)痰菌陰性肺結(jié)核診斷的價(jià)值.河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2012, 33(8):881-883.

［2］ 李站領(lǐng), 李艷靜, 彭勛, 等.多種手段聯(lián)合應(yīng)用對(duì)菌陰不典型肺結(jié)核的診斷價(jià)值.河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 34(6):639-642.

［3］ 郭新枝, 陳裕, 于永敏, 等.支氣管肺泡灌洗液BACTEC-MGIT 960結(jié)核菌快速培養(yǎng)的臨床研究.北京醫(yī)學(xué), 2013, 35(3):221-222.

［4］ 林惠玲, 崔健偉, 王怡心, 等.噬菌體裂解法在肺結(jié)核分枝桿菌耐藥性檢測(cè)中的應(yīng)用.中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué), 2012, 12(2):215-216.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.22.046

2015-03-31］

佛山市科技攻關(guān)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào)：201308339)

528100 佛山市三水區(qū)人民醫(yī)院急診科