三種性狀赭石不同煎出液中鉛溶出度對(duì)比研究

康蓮薇， 熊南燕， 許忠新

(1. 河北工程大學(xué) 理學(xué)院， 河北 邯鄲 056001; 2. 河北工程大學(xué) 醫(yī)學(xué)院， 河北 邯鄲 056001)

三種性狀赭石不同煎出液中鉛溶出度對(duì)比研究

康蓮薇1， 熊南燕2， 許忠新2

(1. 河北工程大學(xué) 理學(xué)院， 河北 邯鄲 056001; 2. 河北工程大學(xué) 醫(yī)學(xué)院， 河北 邯鄲 056001)

目的：觀察腎狀、鮞狀、豆?fàn)?種性狀赭石生品及其制品中鉛元素在醋煎液、水煎液2種不同溶劑中的溶出度差異；方法：采用紫外分光光度法，在一定波長(zhǎng)下測(cè)定樣本在不同煎出液中鉛含量；結(jié)果：3種性狀赭石在醋煎液和水煎液中鉛的溶出度有較大差異(P<0.01)；結(jié)論：3種性狀赭石同等入藥不妥。

赭石； 醋煎液； 水煎液； 鉛元素溶出度

礦物藥赭石(Haematitum)為常用中藥,為氧化物類礦物剛玉族赤鐵礦，主含三氧化二鐵(Fe2O3)。赭石存在有3種性狀，鮞狀、豆?fàn)?、腎狀， 2010年版中國(guó)藥典赭石項(xiàng)下，將3種性狀的赭石均作為赭石入藥[1]。課題組在前期對(duì)3種性狀赭石成分、藥理等方面的研究結(jié)果顯示，3種性狀赭石無(wú)論從所含成分上,還是藥理作用上均存在有較大差異，同為赭石入藥似有不妥[2-3]。本研究采用紫外分光光度法進(jìn)一步對(duì)3種性狀赭石及其制品進(jìn)行了水煎液、醋煎液中鉛溶出度的對(duì)比研究。結(jié)果顯示，不同煎出液中各樣本間鉛溶出度亦存在較大差異，將3種不同性狀赭石同為赭石入藥可能會(huì)因?yàn)殂U的溶出度不同而使療效有所差異。還由于礦物質(zhì)中鉛含量的高低會(huì)影響到用藥者的安全，所以，建議藥典委員會(huì)應(yīng)在新版藥典中有鐵含量的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)前提下同時(shí)建立赭石生品及制品含鉛量的限量標(biāo)準(zhǔn)。

1 儀器與材料

儀器：紫外分光光度計(jì)(Lambda 35，美國(guó))。

材料：無(wú)鉛水、硝酸、氨水、檸檬酸銨、鹽酸羥胺和硝酸鉛(分析純)，氯仿、雙硫腙、酚紅。豆?fàn)?、腎狀、鮞狀赭石采自張家口市龐家堡鐵礦，經(jīng)邯鄲市藥品檢驗(yàn)所鑒定；豆?fàn)睢⒛I狀、鮞狀赭石醋制品由邯鄲市滏華中藥顆粒飲片有限公司制備，邯鄲市藥品檢驗(yàn)所鑒定。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

0.5%雙硫腙氯仿儲(chǔ)備液[4]:溶解0.05 g雙硫腙于50 mL氯仿中(如有不溶物質(zhì)須過(guò)濾)；將溶液移入250 mL的分液漏斗中，用100 mL稀氨水溶液分4次提取，此時(shí)雙硫腙進(jìn)入氨水溶液中，棄去氯仿層；將氨提取液經(jīng)脫脂棉過(guò)濾，于分液漏斗中，用稀鹽酸酸化至有雙硫腙沉淀析出；用氯仿萃取2～3次，每次約20 mL，此時(shí)雙硫腙進(jìn)入氯仿層；用水洗氯仿萃取液2次，棄去洗液，加氯仿至100 mL，使成為約0.05%雙硫腙氯仿溶液，放入棕色瓶中，保存在冰箱中備用[4]。

雙硫腙氯仿應(yīng)用液[5]:取雙硫腙氯仿儲(chǔ)備液1 mL，加入氯仿至10 mL，用0.5 cm比色杯，以氯仿為參比液調(diào)零，于波長(zhǎng)510 nm處用分光光度計(jì)測(cè)吸光度A，用下式計(jì)算配制100 mL雙硫腙氯仿應(yīng)用液(透光度85%)所需雙硫腙氯仿儲(chǔ)備液的體積V:V=10×(2-lg85)/A=2.22/A，計(jì)算得到V為0.15 mL。取0.15 mL氯仿儲(chǔ)備液于100 mL的容量瓶中，加氯仿至刻度，制得雙硫腙氯仿應(yīng)用液[5]。

0.04%酚紅溶液的配制[6]:稱取0.1 g酚紅放入小研缽中，加無(wú)鉛水研磨溶解后，倒入250 mL容量瓶中，加水至刻度[6]。

50%檸檬酸銨溶液[7]:稱取25 g檸檬酸銨，加適量水溶解后，加入酚紅指示劑數(shù)滴，用氨水調(diào)節(jié)溶液為紅色，加水稀釋至50 mL；將其轉(zhuǎn)移至250 mL分液漏斗中，每次用0.01%雙硫腙氯仿溶液5 mL萃取鉛，直至新加入的雙硫腙氯仿溶液振搖2 min后，保持綠色不變?yōu)橹埂埩舻碾p硫腙用氯仿反復(fù)洗滌至氯仿無(wú)色為止，棄去氯仿層[7]。

鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液配制(1.0 g/L)[8]:精密稱取硝酸鉛0.159 8 g(105 ℃烘干2 h)，加入10 mL濃硝酸(優(yōu)級(jí)純)及少量無(wú)鉛水溶解，倒入100 mL容量瓶中，加無(wú)鉛水至刻度，混勻，儲(chǔ)存?zhèn)溆肹8]。

2.2 波長(zhǎng)的選擇

用鉛的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制式0.3 mg/L、0.35 mg/L濃度的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，以紫外分光光度計(jì)進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，測(cè)得鉛的最大吸收波長(zhǎng)為520 nm。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1，表中A1、A2分別為0.3 mg/L和0.35 mg/L標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的吸光度。

表1 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收波長(zhǎng)與吸光度

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

準(zhǔn)確量取1.0 g/L硝酸鉛的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mL分置于50 mL的容量瓶中，各加入50%檸檬酸銨0.5 mL、20%的鹽酸羥胺溶液2滴及酚紅指示劑2滴，搖勻；用1∶1氨水調(diào)至溶液呈紅色，搖勻；加入雙硫腙氯仿溶液5 mL，充分振搖；靜置10 min，棄去水層，氯仿定容。在520 nm波長(zhǎng)下以空白溶液為參比，測(cè)定各樣品吸光度[9]，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 鉛系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度與吸光度

以鉛濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線。計(jì)算得到回歸方程：y=0.8150x+0.01100，相關(guān)系數(shù)r=0.9801。

2.4 樣品的制備

2.4.1 醋煎液樣本的制備

豆?fàn)?、腎狀、鮞狀赭石生品、制品各8批，研細(xì)過(guò)200目篩備用；精密稱取各樣本0.5 g分置于100 mL三角瓶中，分別加入pH為3.6的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液50 mL，加熱，保持微沸30 min，冷卻，過(guò)濾；濾液移入50 mL容量瓶以醋酸-醋酸鈉緩沖溶液定容，制得生品24個(gè)、制品24個(gè)樣本。

2.4.2 水煎液樣本的制備

豆?fàn)?、腎狀、鮞狀赭石生品、制品各8批，研細(xì)過(guò)200目篩備用；精密稱取各樣本0.5 g分置于100 mL的三角瓶中，加入50 mL純化水，加熱，保持微沸30 min，冷卻，過(guò)濾；濾液移入50 mL容量瓶中，加純化水定容，制得生品24個(gè)、制品24個(gè)樣本。

2.5 測(cè)定方法的回收率實(shí)驗(yàn)

以一份腎狀赭石生品樣本為例操作如下。

2.5.1 醋煎液回收率實(shí)驗(yàn)

取50 mL容量瓶2只并標(biāo)注為A和B。精密量取已制得的腎狀赭石生品中任意一個(gè)醋煎液樣本10 mL置于A瓶中，加入50%檸檬酸銨0.5 mL，20%的鹽酸羥胺溶液2滴，酚紅指示劑2滴，搖勻；用1∶1氨水(pH值為9～10)調(diào)至溶液呈紅色，搖勻，加入2 mL、10%的氰化鉀溶液，加入雙硫腙氯仿應(yīng)用液5 mL，用氯仿定容，充分振搖，靜置10 min，棄去水層。精密量取同一樣本10 mL置于B瓶中，加入2.1中鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，其余與A處理相同。A樣做本底，B樣做加標(biāo)樣本，在520 nm波長(zhǎng)下，以空白溶液作為參比，測(cè)定該樣本的吸光度[10]。以第2.3節(jié)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鉛的含量。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 赭石醋煎液回收率測(cè)定

2.5.2 水煎液回收率實(shí)驗(yàn)

取50 mL容量瓶2只并標(biāo)注為A′和B′。精密量取已制得的腎狀赭石生品中任意一個(gè)水煎液樣本10 mL置于A′瓶中，加入50%檸檬酸銨0.5 mL，20%的鹽酸羥胺溶液2滴，酚紅指示劑2滴，搖勻；用1∶1氨水(pH值為9～10)調(diào)至溶液呈紅色，搖勻；加入2 mL、10%的氰化鉀溶液，加入雙硫腙氯仿應(yīng)用液5 mL，以氯仿定容充分振搖，靜置10 min，棄去水層。精密量取同一樣本10 mL置于B′瓶中，加入2.1中鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，其余與A′法處理相同。A′樣做本底，B′樣做加標(biāo)樣本，在520 nm波長(zhǎng)下，以空白溶液作為參比，測(cè)定該樣本的吸光度[11]。以第2.3節(jié)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算鉛的含量。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 赭石水煎液回收率測(cè)定

從回收率可看出，該方法可用于測(cè)定不同性狀赭石樣品中的鉛含量。

2.6 實(shí)驗(yàn)測(cè)定

2.6.1 醋煎樣品的測(cè)定

用第2.5.1節(jié)中的方法測(cè)定48個(gè)樣本的醋煎液，各經(jīng)5次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，測(cè)得各樣本中鉛含量(數(shù)據(jù)略)，對(duì)生品及制品測(cè)定結(jié)果分別經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)見(jiàn)表5。

表5 各樣本赭石醋煎液中鉛含量比較±s，n=8)

注：組間兩兩比較，經(jīng)q檢驗(yàn)：均P<0.01。

2.6.2 水煎樣品的測(cè)定

用第2.5.2節(jié)中的方法測(cè)定48個(gè)樣本的水煎液，各經(jīng)5次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，測(cè)得各樣本中鉛含量(數(shù)據(jù)略)，對(duì)生品及制品測(cè)定結(jié)果分別經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)見(jiàn)表6。

表6 各樣本赭石水煎液中鉛含量比較±s，n=8)

注：組間兩兩比較，經(jīng)q檢驗(yàn)：均P<0.01。

3 討論

3.1 對(duì)結(jié)果的討論

由表5可見(jiàn)，3種赭石生品在醋煎液中鉛的溶出度有較大差異(P<0.01)，制品在醋煎液中鉛的溶出度也有較大差異(P<0.01)。由表6可見(jiàn)，3種赭石生品在水煎液中鉛的溶出度有較大差異(P<0.01)，制品在水煎液中鉛的溶出度也有較大差異(P<0.01)。以上結(jié)果表明，3種赭石從鉛在不同煎液中的溶出度差異較大，如果處方僅為赭石而沒(méi)有寫(xiě)出給付的品種，則療效會(huì)打折扣，3種性狀赭石同等入藥不妥。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：赭石醋煎液中鉛的含量比水煎液中的鉛含量高；赭石制品的水煎液和醋煎液中的鉛含量低于赭石生品的水煎液和醋煎液的鉛含量。赭石制品的水煎液鉛含量很低。鉛作為一種重金屬元素，攝入過(guò)量會(huì)引起鉛中毒，危害人體健康。臨床上對(duì)赭石的生品、制品的水煎液和醋煎液應(yīng)區(qū)別應(yīng)用，且病終即止，不可久服。

3.2 對(duì)測(cè)定中影響因素的討論

(1) pH值的影響。用雙硫腙法測(cè)定鉛的含量，溶液的pH值影響很大，無(wú)論單色法或混色法，pH值都應(yīng)予以控制，最適宜pH值范圍為8.5～11，僅鉍、二價(jià)錫、鉈等有干擾。在pH值為2～3時(shí)用雙硫腙氯仿溶液進(jìn)行萃取，則可除掉鉍、二價(jià)錫的干擾。用堿性溶液對(duì)雙硫腙氯仿進(jìn)行反萃取，可使鉛進(jìn)入水層而與鉈分離[12]。

(2) 溶劑的影響。氯仿作為溶劑，控制pH值在10左右，是提取鉛的適宜條件。因該溶劑對(duì)雙硫腙溶解度小，過(guò)量的雙硫腙大部分留在水相中，僅雙硫腙鉛的螯合物及少量游離雙硫腙進(jìn)入有機(jī)相，因而形成的測(cè)定液幾乎為單色[13]。

(3) 干擾的消除。鹽酸羥胺作為還原劑，可保護(hù)雙硫腙不被高價(jià)金屬、過(guò)氧化物、鹵族元素等氧化。檸檬酸銨在廣泛的pH 范圍內(nèi)具有較強(qiáng)的絡(luò)合能力，它的主要作用是絡(luò)合鈣、鎂、鋁、鐵等陽(yáng)離子，防止在堿性溶液中形成這些金屬的氫氧化物沉淀。氰化鉀絡(luò)合劑的加入，可使許多金屬離子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物而被掩蔽[14]。

用配制好的試劑空白溶液作為參比溶液。由于反射以及溶劑、試劑等對(duì)光的吸收會(huì)造成透射光強(qiáng)度的減弱，為了使光強(qiáng)度的減弱僅與溶液中待測(cè)物質(zhì)的濃度有關(guān)，必須對(duì)反射、溶劑、試劑的影響進(jìn)行矯正。為此采用光學(xué)性質(zhì)相同、厚度相同的比色皿貯參比溶液，調(diào)節(jié)儀器使透過(guò)參比皿的吸光度為零，然后讓光束通過(guò)樣品池，測(cè)得試液顯色液的吸光度。通過(guò)參比皿的光強(qiáng)度作為樣品池的入射光強(qiáng)度，這樣測(cè)得的吸光度比較真實(shí)地反映了待測(cè)物質(zhì)對(duì)光的吸收，也就能比較真實(shí)地反映待測(cè)物質(zhì)的濃度[15]。

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Comparative study of dissolved lead from kidney-shaped ocher,oolitic ocher and lenticular ocher in different decoctions

Kang Lianwei1, Xiong Nanyan2, Xu Zhongxin2

(1. College of Science，Hebei University of Engineering，Handan 056001，China；2. School of Medicine，Hebei University of Engineering，Handan 056001，China)

Aim To investigate the dissolution discrepancy of lead element from the raw products and their products of kidney-shaped ocher,oolitic ocher and lenticular ocher in vinegar decoction and water decoction. Method Using the ultraviolet spectrophotometer under certain wavelength. Results The dissolution of lead from the three kinds of ochers in vinegar decoction and water decoction has a significant difference(P<0.01). Conclusion The three different kinds of ochers can’t be used as the same one in medicine.

ocher; vinegar decoction; water decoction; dissolution of lead element

2014- 09- 30

康蓮薇(1965—)，女，河北邯鄲，碩士，研究方向?yàn)榛瘜W(xué)教學(xué)與研究.

R282.76;R282.5

B

1002-4956(2015)5- 0055- 04