TNRC9基因多態(tài)性與乳癌發(fā)病的相關(guān)性

李睿

（青島市市立醫(yī)院超聲科，山東 青島 266011）

乳癌是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重危害婦女健康的惡性腫瘤，其發(fā)生和發(fā)展受多種風(fēng)險(xiǎn)因素的影響，與許多基因和蛋白質(zhì)的表達(dá)密切相關(guān)。近幾年來(lái)，全基因組關(guān)聯(lián)分析迅猛開(kāi)展。EASTON等［1］的研究結(jié)果顯示，TNRC9基因與乳癌有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。本文主要研究了乳癌TNRC9基因及有關(guān)因素對(duì)乳癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的影響，以期為乳癌的病因研究及高危人群的基因篩查提供理論依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

2005年6月—2014年1月，收集于我院就診乳癌病人375例及健康對(duì)照382例，采集兩組基本信息，包括年齡、月經(jīng)初潮年齡、絕經(jīng)年齡、生育史、哺乳情況和既往史。調(diào)查員為我科住院醫(yī)師，對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行問(wèn)詢(xún)調(diào)查，所得資料雙份核對(duì)并錄入Excel表格。研究對(duì)象均知情同意，并提供血液樣本。

1.2 TNRC9rs12443621基因型檢測(cè)

根據(jù)GenBank dbSNP數(shù)據(jù)庫(kù)中的TNRC9基因rs12443621設(shè)計(jì)引物和TaqMan－MGB探針，進(jìn)行單核苷酸多態(tài)性（SNP）檢測(cè)。PCR反應(yīng)體積為25μL，其中 DNA模板約5μL、2×TaqMan Universal PCR Master Mix 10μL（美國(guó)ABI公司）、引物各0.5μL、探針各0.5μL。反應(yīng)在 Real－PCR擴(kuò)增儀（美國(guó)BioRad公司）上進(jìn)行。擴(kuò)增參數(shù)：94℃預(yù)變性5min；94℃變性15s，60℃退火1min，共45個(gè)循環(huán)。反應(yīng)結(jié)束后確認(rèn)擴(kuò)增曲線(xiàn)并由儀器自動(dòng)進(jìn)行SNP基因分型讀取。判斷標(biāo)準(zhǔn)：純合基因型1，F(xiàn)AM染料擴(kuò)增可見(jiàn)明顯擴(kuò)增信號(hào)，VIC染料無(wú)擴(kuò)增信號(hào)；純合基因型2，VIC染料擴(kuò)增可見(jiàn)明顯信號(hào)，F(xiàn)AM染料無(wú)擴(kuò)增信號(hào)；雜和基因型，兩種染料均可見(jiàn)明顯信號(hào)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 兩組基本資料比較

兩組年齡差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。病例組的初潮年齡小于對(duì)照組（t＝1.71，P＜0.05），而兩組絕經(jīng)年齡差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。與對(duì)照組比較，病例組哺乳時(shí)間短，分娩次數(shù)多，無(wú)母乳喂養(yǎng)史及無(wú)生育史者所占比例高（t＝9.43，χ2＝9.58～18.73，P＜0.05）。兩組流產(chǎn)史、流產(chǎn)次數(shù)比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 TNRC9rs12443621基因型與乳癌易感性分析

兩組TNRC9rs12443621的基因型分布及等位基因頻率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。TNRC9 rs12443621基因型與乳癌患病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān)。見(jiàn)表2、3。將病例組按絕經(jīng)情況、有無(wú)哺乳史和生育史進(jìn)一步分層分析，以等位基因純合子AA基因型為參照，AG＋GG基因型分布在各病例組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表4。

表1 兩組基本資料比較（）

表1 兩組基本資料比較（）

組別 n 年齡（歲）初潮年齡（歲）絕經(jīng)年齡（歲）哺乳時(shí)間（月）母乳喂養(yǎng)史（例（χ／%）） 生育史（例（χ／%））無(wú)有無(wú)有對(duì)照組 382 49.91±4.02 15.02±1.99 49.07±3.56 14.56±11.71 50（13.09） 332（86.91） 13（3.40） 369（96.60）病例組 375 50.35±3.89 14.68±2.56 51.56±3.24 8.75± 7.64 81（21.60） 294（78.40） 34（9.97） 341（90.93）組別 n 分娩次數(shù)0 1～2 ≥3流產(chǎn)史（例（χ／%））無(wú)有流產(chǎn)次數(shù)0 1～2 ≥3對(duì)照組 382 16（4.19） 361（94.50） 5（1.31） 112（29.32） 270（70.68） 112（29.32） 214（56.02） 56（14.66）病例組 375 34（9.07） 320（85.33） 21（5.60） 123（32.80） 252（67.20） 123（32.80） 218（58.13） 34（8.53）

表2 兩組TNRC9rs12443621基因型分布及等位基因頻率比較

表3 TNRC9rs12443621基因型與乳癌患病風(fēng)險(xiǎn)的多因素Logistic回歸分析

表4 TNRC9rs12443621基因型與乳癌患病風(fēng)險(xiǎn)的分層分析

3 討 論

國(guó)內(nèi)外許多研究探討了年齡、生育因素等與乳癌的關(guān)系，但所得結(jié)論并不完全相同［2－9］。本研究結(jié)果顯示，無(wú)生育史、月經(jīng)初潮年齡早為乳癌的危險(xiǎn)因素，而哺乳時(shí)間長(zhǎng)、初潮年齡晚、分娩次數(shù)多則為保護(hù)因素，這與多個(gè)研究結(jié)果一致［2－5］。月經(jīng)初潮年齡早增加乳癌的患病風(fēng)險(xiǎn)可能與機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間處于較高水平性激素的環(huán)境中有關(guān)。分娩次數(shù)多、哺乳時(shí)間長(zhǎng)的有利作用可能與經(jīng)產(chǎn)婦乳腺組織的增殖減弱、孕期激素水平的改變有關(guān)［10－11］。因此，生育和母乳喂養(yǎng)對(duì)預(yù)防乳癌的發(fā)生具有一定的作用。本研究未顯示絕經(jīng)年齡、流產(chǎn)史與乳癌的發(fā)病有關(guān)，這與國(guó)內(nèi)一些研究結(jié)果不一致［3－5］。乳癌的發(fā)病受遺傳、環(huán)境、生活方式、衛(wèi)生條件、飲食等的影響，而這些因素的地域差異可能導(dǎo)致國(guó)內(nèi)外甚至國(guó)內(nèi)不同地區(qū)的研究結(jié)果不完全相同。

TNRC9基因含有3個(gè)核苷酸重復(fù)基序和1個(gè)假定基因LOC643714，rs12443621位于TNRC9基因的5′－端連鎖不平衡區(qū)。EASTON等［1］用全基因組掃描技術(shù)進(jìn)行病例對(duì)照研究，結(jié)果顯示，TNRC9 rs12443621的SNP與乳癌發(fā)病有很強(qiáng)的相關(guān)性。WOOLCOTT等［12］研究顯示，該基因通過(guò)改變?nèi)橄傧袤w的纖維密度而影響乳癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。最近的研究還顯示，該基因與乳癌的臨床預(yù)后和5年生存率關(guān)系密切［13］。國(guó)內(nèi)LIANG等［14］的研究結(jié)果表明，rs12443621與雌激素受體陽(yáng)性的乳癌發(fā)病相關(guān)。但ZHENG等［15］的研究結(jié)果顯示，rs12443621位點(diǎn)與中國(guó)漢族女性乳癌發(fā)生不相關(guān)，這與本研究結(jié)果是一致的。本研究進(jìn)一步分層分析，也未顯示TNRC9rs12443621與乳癌的相關(guān)危險(xiǎn)因素有相關(guān)性。國(guó)內(nèi)外研究結(jié)論不一致的原因可能是由種族差異或者所選樣本的腫瘤特異性造成的，今后需要增大樣本量、設(shè)計(jì)更為嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證該基因位點(diǎn)對(duì)乳癌的作用。

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