乳腺癌預(yù)后及術(shù)后化療中免疫組化檢測的應(yīng)用體會

摘要：目的 研究乳腺癌預(yù)后及術(shù)后化療中免疫組化檢測的應(yīng)用。方法 選取我院2013年1月～2014年10月間診治的乳腺癌患者60例，采用免疫組化聯(lián)合檢測ER、PR、C-erbB-2，綜合分析其在乳腺癌組織中的表達(dá)及相互關(guān)系。結(jié)果 ER陽性表達(dá)率為66.7%，PR陽性表達(dá)率為73.3%，二者同時陽性表達(dá)率為63.3%，同時陰性表達(dá)率為23.3%；C-erbB-2陽性表達(dá)率為36.7%，陰性表達(dá)率為63.3%。結(jié)論 對于乳腺癌患者而言，采用免疫組化染色檢測其ER、PR、C-erbB-2的表達(dá)不僅利于全面了解乳腺癌組織對激素的依賴特性及耐藥基因，而且可以了解患者的耐藥情況，以及各種抗癌藥物的交叉藥性及預(yù)后，值得臨床推廣使用。

關(guān)鍵詞：乳腺癌；預(yù)后；化療；免疫組化；陽性表達(dá)率

作為當(dāng)今世界威脅女性生命健康的第一大殺手，乳腺癌可謂最為常見的惡性腫瘤，由于人體乳腺內(nèi)的淋巴管較為豐富，所以腋下淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移率為50%左右[1]。就目前臨床改善乳腺癌患者生存率來講，其主要途徑便是對乳腺癌的預(yù)后推斷及術(shù)后是否使用內(nèi)分泌治療或其它化學(xué)藥物輔助治療，本文就我院60例乳腺癌患者為研究對象，回顧性分析免疫組化檢測在預(yù)后及術(shù)后化療中的應(yīng)用，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取我院2013年1月～2014年10月診治的乳腺癌患者60例，所有患者術(shù)前均無化療史與放療史，并確診乳腺癌腫瘤標(biāo)本。其中包括其中42例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌，8例乳腺髓樣癌，4例乳腺單純癌，6例乳腺粘液癌。

1.2方法

1.2.1處理標(biāo)本 使用10.0%中性福爾馬林固定所有標(biāo)本，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋。將每個蠟塊切為6片，組織切片厚4μm左右，貼裱在涂有防脫片劑清潔載玻片上。63℃烤片1h，二甲苯脫蠟，梯度乙醇浸泡至水，使用PH6.0檸檬酸鞋服液高壓修復(fù)切片后備用。

1.2.2試劑 ER、PR、C-erbB-2抗體、免疫組化超敏S-P試劑盒、DAB顯色試劑盒。

1.2.3免疫組化染色 將已知的陽性病例當(dāng)做陽性對照，采用PBS取代一抗當(dāng)做陰性對照。具體程序如下：①3.0%H2O250μl室溫孵育10min，采用緩沖液沖洗PBS；②5.0～10.0%正常山羊血清50μl封閉10min；③滴加一抗ER、PR、C-erbB-2各50μl；④保持37℃孵育1h，采用緩沖液沖洗PBS；⑤滴加生物素化二抗工作液50μl室溫孵育10min，采用緩沖液沖洗PBS；⑥滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液50μl，室溫孵育10min；⑦DAB顯示液100μl，在顯微鏡下觀察顯色效果；⑧蘇木精襯染30s；⑨無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片[2]。

1.3結(jié)果判斷 陽性表達(dá)定位：ER：胞核，PR：胞核，C-erbB-2：胞膜或者胞漿。

1.4免疫組化結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 細(xì)胞陽性表達(dá)超過5%為（±），位于10%～25%為（+），位于25%～75%為（++），超過75%為（+++）。

2結(jié)果

2.1在ER、PR檢測方面，ER陽性表達(dá)率為66.7%，PR陽性表達(dá)率為73.3%，二者同時陽性表達(dá)率為63.3%，二者同時陰性表達(dá)率為23.3%。

2.2在C-erbB-2檢測方面，C-erbB-2陽性表達(dá)率為36.75，陰性表達(dá)率為63.3%，見表1。

3討論

3.1 ER、PR在乳腺癌組織中表達(dá)及意義 作為乳腺癌的重要預(yù)測激素參數(shù)，如果ER、PR呈陽性則表明其分化程度較高，惡性度低，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移慢，預(yù)后較好，治療效果較為顯著，特別是內(nèi)分泌治療敏感性較高[3]。在本文實驗中，ER檢測的陽性表達(dá)率為66.7%，PR檢測的陽性表達(dá)率為73.35%，二者同時陽性表達(dá)率為63.3%，由于這些都屬于激素依賴性腫瘤，對內(nèi)分泌治療較為敏感，所以可以選擇抗雌激素藥物三苯氧胺、甲地孕酮、純抗雌激素藥物、孕激素制劑甲孕酮等內(nèi)分泌藥物。另外，本文實驗中，ER、PR檢測的同時陰性表達(dá)率為23.35%，這類屬于非激素依賴性腫瘤，選擇內(nèi)分泌治療無效的轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者可以使用化療。研究表明，ER陰性的腫瘤對于化療更加敏感，特別是對于含蒽環(huán)類藥物的化療[4]。如果轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者接受過非蒽環(huán)類藥物治療，那么最為標(biāo)準(zhǔn)的治療方案則是采用蒽環(huán)藥物治療的化療方案，在眾多含蒽環(huán)類聯(lián)合化療方案中，應(yīng)用最為廣泛的是CAF、CNF、CTF方案，紫杉類或者蒽環(huán)類方案的療效更好，但是毒性也更大，對于進(jìn)展較為快的內(nèi)臟轉(zhuǎn)移、淋巴道轉(zhuǎn)移、局部晚期乳腺癌應(yīng)該考慮應(yīng)用。本文實驗中，ER、PR檢測的陽性表達(dá)率與患者的年齡與月經(jīng)變化并無直接關(guān)系，而ER、PR中86.7%表達(dá)一致，13.3%表達(dá)不一致，這表明二者的一致性情況較多，而二者的檢測對于乳腺癌患者意義重大，其陽性直接關(guān)系到患者化療方案的選擇、腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后。

3.2 C-erbB-2在乳腺癌組織中表達(dá)及作用 C-erbB-2與乳腺癌的關(guān)系最為密切，其過度陽性表達(dá)通常見于分化差、浸潤型乳腺癌。這一類乳腺癌的早期復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移傾向較為明顯，淋巴結(jié)的存在與否都對預(yù)后產(chǎn)生不利影響[5]。ER、PR陽性，C-erbB-2陰性表達(dá)患者的預(yù)后較好。在乳腺癌組織中，如果C-erbB-2過度表達(dá)，則表明患者預(yù)后較差，對于內(nèi)分泌藥物的盒子里效果不佳，對于無蒽環(huán)類藥物的化療具有抗藥性。本文實驗中，C-erbB-2的陽性表達(dá)率為36.7%，陰性表達(dá)率為63.3%， C-erbB-2的陽性表達(dá)越高，則ER、PR的陽性表達(dá)越低。自從2000年起，美國食品藥物管理局開始用于C-erbB-2過表達(dá)轉(zhuǎn)移性乳腺癌的治療，相對于單項化療或者單項靶向治療，赫賽丁靶向治療聯(lián)合化療的治療方案效果較為顯著。由此可見，C-erbB-2的檢測對于乳腺癌患者異常重要，ER、PR陽性，C-erbB-2陰性表達(dá)患者預(yù)后較好。

綜上所述，對于乳腺癌患者而言，采用免疫組化染色檢測其ER、PR、C-erbB-2的表達(dá)不僅利于全面了解乳腺癌組織對激素的依賴特性及耐藥基因，而且可以了解患者的耐藥情況，以及各種抗癌藥物的交叉藥性及預(yù)后，值得臨床推廣使用。

參考文獻(xiàn)：

[1]管小青，江小玲，袁牧，等.不同方案新輔助化療對乳腺癌C-erbB-2及ER、PR表達(dá)的影響[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2012，18（03）：147-152.

[2]鄧再興，謝貝，俞文菊.乳腺癌P-gp、GST-π及TopoⅡ的表達(dá)及意義[J].腫瘤研究與臨床，2011，07（01）：467-471.

[3]張祥盛，張金鈴.細(xì)胞調(diào)亡及nM 170、ER 基因產(chǎn)物表達(dá)與乳腺癌生物行為的相關(guān)性[J]. 臨床與實驗病理學(xué)雜志，2013，15（06）：495-495.

[4]管小青，江小玲，袁牧，等.不同方案新輔助化療對乳腺癌C-erbB-2及ER、PR表達(dá)的影響[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2010，19（03）：245-248.

[5]狄根紅，沈鎮(zhèn)宙，邵志敏.赫賽汀在轉(zhuǎn)移性乳腺癌治療中臨床應(yīng)用和進(jìn)展[J].實用癌癥雜志，2003，18（06）：664-666.

編輯/孫杰