升血顆粒質量標準研究

【摘 要】本實驗對升血顆粒的質量標準進行研究。含量測定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），甲醇-0.1%磷酸溶液（9：91）為流動相，檢測波長為218nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃；鑒別方法：點羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4：1：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。結論：本法簡便、準確，可用于升血顆粒的質量標準研究。

【關鍵詞】升血顆粒；質量標準；研究

升血顆粒由黃芪、丹參、麥門冬、太子參等組成。升血顆粒具有增強人體免疫力，調節(jié)植物神經(jīng)系統(tǒng)的功能。丹參具有活血調經(jīng)、祛瘀止痛、涼血消癰、清心除煩、養(yǎng)血安神的功效。丹參素具有縮小心肌梗死范圍、抑制血小板的聚集、增加血小板膜的流動性、抗脂質蛋白氧化、降低血膽固醇、保護血管屏障、擴張冠狀動脈、改善神經(jīng)功能缺損等作用。太子參，又名孩兒參，為石竹科多年生草本植物異葉假繁縷的塊根。太子參具有補益脾肺，益氣生津的功效?！蛾兾髦胁菟帯酚涊d“：補氣益血，健脾生津。治病后體虛，肺虛咳嗽，脾虛腹瀉，小兒虛汗，心悸，口干，不思飲食?！碧訁⒊Ｓ糜谥委熎⑻撌成佟⑿募?、水腫、消渴、精神疲乏等[1-5]。本實驗對升血顆粒的質量標準進行研究。

1.儀器與試藥

1.1儀器

高效液相色譜儀：安捷倫1100泵；安捷倫檢測器；安捷倫色譜工作站；奧豪斯Explorer專業(yè)型分析天平（奧豪斯儀器上海有限公司）；半自動點樣儀LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；SHB-（III）循環(huán)水式真空泵（上海楚柏實驗室設備有限公司）；DHG-9240A電熱恒溫鼓風干燥箱（上海和呈儀器制造有限公司）；SCQ-5201超聲波清洗器（上海聲彥超聲儀器有限公司）；XSYF-D 實驗室廢水處理設備（北京湘順源科技有限公司）；ELGA超純水器（上海瀾銳儀器科技有限公司）；RE-5210A旋轉蒸發(fā)器（上海比朗儀器有限公司）。

1.2色譜柱

奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品

丹參素鈉。

1.4試劑

甲醇（上海嘉浩化工有限公司）、磷酸（上海海曲化工有限公司）、甲酸（廣西明利化工有限公司）、茚三酮（鄭州江美化工產(chǎn)品有限公司）、冰醋酸（濟南郭氏偉業(yè)化工有限公司）、正丁醇（廣西明利化工有限公司）、乙醇（鄭州江美化工產(chǎn)品有限公司）。

1.5試藥

升血顆粒。

2.測定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[6-12]。流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（9：91）為流動相，檢測波長：218nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按丹參素鈉峰計算應不得低于2000。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取丹參素鈉對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含20μg的溶液，即得。

2.3供試品溶液的制備

取升血顆粒適量，研細，精密稱定，加20毫升水超聲提取5分鐘，過濾，蒸干濾液，殘渣加流動溶解轉移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，即得。

2.4專屬性試驗

取黃芪、麥門冬、太子參等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述實驗方法檢測，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5精密度試驗

取對照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.66%，表明本方法精密度良好。

2.6對照品的線性考察

精密稱取適量丹參素鈉對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含10、20、30、40、50、60、120μg的溶液。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線。結果表明，丹參素鈉在10～120μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關系。

2.7重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的升血顆粒樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.55%，結果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8準確度試驗

取對照品適量分別精密加入升血顆粒中，按含量測定進行測定，計算回收率為99.6%，RSD為0.65%。

2.9樣品含量測定

依照上述含量測定方法，再按外標法以峰面積計算樣品的含量，結果三批樣品的含量分別為80μg/g、82μg/g、81μg/g。

3.鑒別

取升血顆粒適量（約相當于太子參藥材1g），加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，回收甲醇后的殘渣，再溶于甲醇2ml中，作為供試品溶液。另取太子參對照藥材1g，加甲醇30ml，超聲處理15分鐘，濾過，回收甲醇后的殘渣，再溶于甲醇2ml中，作為對照品溶液。取黃芪、丹參、麥門冬等藥材按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按上述方法制成陰性對照樣品。吸取上述溶液，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（4：1：1）為展開劑，置用展開劑預飽和15分鐘的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，噴以0.2%茚三酮乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。

4.結論

本實驗分離效果好、方法簡便、快捷、準確、專屬性好，可用于升血顆粒中丹參素鈉的含量測定。樣品與太子參對照藥材對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性無干擾。該鑒別方法專屬性強，操作簡單，可用于升血顆粒中太子參的鑒別。

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