2014年遼寧省市縣獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

摘 要：2014年，對(duì)全省14個(gè)市和58個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開展了檢測(cè)能力比對(duì)，比對(duì)項(xiàng)目包括H7N9亞型流感抗體檢測(cè)、豬瘟抗體檢測(cè)、高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸檢測(cè)、雞白痢抗體檢測(cè)。比對(duì)結(jié)果表明，有11個(gè)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室和47個(gè)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果全部正確。其中H7N9 亞型流感抗體檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室正確率為95.77 %，豬瘟抗體檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室正確率為100 %，高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室正確率為75.68 %，雞白痢抗體檢測(cè)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室正確率為100 %。比對(duì)結(jié)果說(shuō)明市縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室HI、ELISA和平板凝集方法檢測(cè)抗體的技術(shù)掌握較好，而用熒光RT-PCR檢測(cè)病毒核酸的技術(shù)能力有待提高。

關(guān)鍵詞：獸醫(yī)；實(shí)驗(yàn)室；檢測(cè)；能力比對(duì)

中圖分類號(hào)：S854.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-0769（2015）03-0058-04

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)著動(dòng)物疫病診斷、監(jiān)測(cè)、檢測(cè)、流行病學(xué)調(diào)查以及其它與動(dòng)物防疫相關(guān)的技術(shù)工作，為動(dòng)物防疫工作提供技術(shù)支持。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，是評(píng)價(jià)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)水平的重要手段，也是加強(qiáng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的有效方法。2011年開始，按照農(nóng)業(yè)部有關(guān)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)的文件要求，遼寧省組織市縣級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室實(shí)施檢測(cè)能力比對(duì)工作，對(duì)提升市縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力起到了極大的促進(jìn)作用。2014年，全省再次開展了市縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作。

1 比對(duì)范圍

14個(gè)市級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，58個(gè)縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。

2 比對(duì)方法

2.1 比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置

14個(gè)市和24個(gè)生豬調(diào)出大縣實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行H7N9亞型流感抗體檢測(cè)，豬瘟抗體檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸檢測(cè)3個(gè)項(xiàng)目的比對(duì)；其他34個(gè)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行H7N9亞型流感抗體檢測(cè)，豬瘟抗體檢測(cè)，雞白痢抗體檢測(cè)3個(gè)項(xiàng)目的比對(duì)。每個(gè)項(xiàng)目設(shè)置6個(gè)檢測(cè)樣品。

2.2 比對(duì)檢測(cè)方法

針對(duì)設(shè)置的比對(duì)項(xiàng)目，統(tǒng)一采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或國(guó)家參考實(shí)驗(yàn)室推薦的方法，見表1。

2.3 比對(duì)樣品的制備與發(fā)放

制備方式：由遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心禽病科、畜病科完成相應(yīng)比對(duì)樣品的制備、標(biāo)定、分裝，并將樣品和標(biāo)定值送交體系科統(tǒng)一保存。體系科對(duì)比對(duì)樣品統(tǒng)一編號(hào)后，作為盲樣下發(fā)使用。

樣品發(fā)放：各市縣實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定日期統(tǒng)一到遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心領(lǐng)取，并在8 h內(nèi)帶回所在實(shí)a驗(yàn)室。

比對(duì)試劑：由遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心公布標(biāo)定比對(duì)樣品所用試劑的生產(chǎn)廠家、品種和批號(hào)，各市縣實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備試劑。

2.4 結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

H7N9亞型流感抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：檢測(cè)值與參考值的偏差不超過1個(gè)滴度，判為結(jié)果準(zhǔn)確。

豬瘟抗體檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸檢測(cè)評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)：強(qiáng)陽(yáng)性和弱陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

雞白痢抗體檢測(cè)：陽(yáng)性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陽(yáng)性”；陰性樣品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為“陰性”。

2.5 比對(duì)結(jié)果的遞交

市縣實(shí)驗(yàn)室在收到樣品之日起2 d內(nèi)完成檢測(cè)，并將檢測(cè)結(jié)果傳真至遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心體系科；同時(shí)，出具正式的檢驗(yàn)報(bào)告，快遞送達(dá)體系科。

3 結(jié)果分析

3.1 總體結(jié)果

根據(jù)比對(duì)結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，在14個(gè)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室中，有11個(gè)市所有比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果全部正確，占78.57 %，出現(xiàn)較大偏差的檢測(cè)項(xiàng)目為用熒光RT-PCR方法檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸（表2）。在24個(gè)生豬調(diào)出大縣實(shí)驗(yàn)室中，23個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加了本次比對(duì)，有14個(gè)所有比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果全部正確，占60.87 %，出現(xiàn)較大偏差的檢測(cè)項(xiàng)目為用血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法檢測(cè)H7N9亞型流感抗體和用熒光RT-PCR方法檢測(cè)高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸（表3）。34個(gè)其他縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室中，有33個(gè)所有比對(duì)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果全部正確，占97.06 %，出現(xiàn)較大偏差的檢測(cè)項(xiàng)目為用血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法檢測(cè)H7N9亞型流感抗體（表4）。

3.2 比對(duì)項(xiàng)目分項(xiàng)分析

H7N9亞型流感抗體血凝-血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目。檢測(cè)樣品總計(jì)426份，結(jié)果正確樣品423份，總正確率99.3 %。參加比對(duì)的71個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，68個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品結(jié)果全部正確，占95.77 %；其中，14個(gè)市級(jí)檢測(cè)樣品84份，正確率100 %；參加比對(duì)的57個(gè)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品342份，正確率99.12 %，54個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品結(jié)果全部正確，占94.74 %。

豬瘟病毒抗體ELISA檢測(cè)項(xiàng)目。檢測(cè)樣品總計(jì)426份，結(jié)果準(zhǔn)確樣品426份，總正確率100 %。參加比對(duì)的71個(gè)實(shí)驗(yàn)室正確率100 %。

高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸熒光RT-PCR檢測(cè)項(xiàng)目。檢測(cè)樣品總計(jì)222份，結(jié)果準(zhǔn)確樣品210份，總正確率94.59 %。參加比對(duì)的37個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，28個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品結(jié)果全部正確，占75.68 %；其中，14個(gè)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品84份，正確率96.43 %，11個(gè)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品結(jié)果全部正確，占78.57 %；23個(gè)生豬大縣實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品138份，正確率93.48 %，17個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品結(jié)果全部正確，占73.91 %。

雞白痢抗體平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目。檢測(cè)樣品總計(jì)204份，結(jié)果正確樣品204份，總正確率100 %。參加比對(duì)的34個(gè)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室正確率100 %。

4 討論

4.1 從比對(duì)結(jié)果總體來(lái)看，本次設(shè)置的4個(gè)項(xiàng)目中，豬瘟抗體檢測(cè)ELISA 檢測(cè)項(xiàng)目和雞白痢抗體平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目準(zhǔn)確度最高，H7N9亞型流感抗體血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法檢測(cè)項(xiàng)目次之，高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸熒光RT-PCR方法檢測(cè)項(xiàng)目準(zhǔn)確度最低。

4.2 H7N9亞型流感抗體血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法檢測(cè)項(xiàng)目，3個(gè)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)較大偏差。比對(duì)結(jié)果正確率比前幾年雖然有較大提高，但通過平時(shí)的檢查發(fā)現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室未完全按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T118936-2003）標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作，或?qū)嶒?yàn)室人為操作手法不規(guī)范等問題，這是影響我省市縣兩級(jí)實(shí)驗(yàn)室血凝-血凝抑制試驗(yàn)結(jié)果與參考值不能完全符合的主要原因。說(shuō)明在涉及影響因素較為多并且復(fù)雜的血凝-血凝抑制試驗(yàn)方法中，還需要加強(qiáng)訓(xùn)練，提高操作的標(biāo)準(zhǔn)化程度，進(jìn)一步提高準(zhǔn)確度。

4.3 豬瘟病毒抗體ELISA檢測(cè)項(xiàng)目，71個(gè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致；雞白痢抗體平板凝集試驗(yàn)檢測(cè)項(xiàng)目，34個(gè)縣區(qū)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果與參考值完全一致。說(shuō)明我省實(shí)驗(yàn)人員對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)和平板凝集試驗(yàn)操作熟練，結(jié)果準(zhǔn)確率高。

4.4 高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸熒光RT-PCR方法檢測(cè)項(xiàng)目，3個(gè)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室和6個(gè)生豬調(diào)出大縣實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)較大偏差，說(shuō)明個(gè)別市級(jí)實(shí)驗(yàn)室分子生物學(xué)檢測(cè)能力尚需提高，實(shí)驗(yàn)原理、結(jié)果判定與分析、實(shí)驗(yàn)操作細(xì)節(jié)的把握等方面能力還需加強(qiáng)，而生豬調(diào)出大縣分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室剛剛建設(shè)完成，經(jīng)過省、市疫控中心的培訓(xùn)，初步具備分子生物學(xué)檢測(cè)能力，但由于檢測(cè)項(xiàng)目開展時(shí)間短，檢測(cè)數(shù)量少，操作不夠熟練，還需要進(jìn)一步強(qiáng)化培訓(xùn)，增加檢測(cè)數(shù)量，提高檢測(cè)熟練度和準(zhǔn)確度。

4.5 從實(shí)驗(yàn)室的原始記錄和檢測(cè)結(jié)果報(bào)告上看，各實(shí)驗(yàn)室不同程度存在記錄與報(bào)告填寫不規(guī)范的現(xiàn)象。部分實(shí)驗(yàn)室原始記錄操作過程沒有詳細(xì)記錄，出現(xiàn)修改的地方?jīng)]有按規(guī)定標(biāo)記和簽字確認(rèn)。個(gè)別實(shí)驗(yàn)室的報(bào)告缺乏樣品狀態(tài)的描述，結(jié)果表述方式存在問題。

4.6 獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力是動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)建設(shè)的基礎(chǔ)，是技術(shù)支撐的核心所在，其所出具的檢測(cè)數(shù)據(jù)直接作為政府部門制定動(dòng)物疫病防控策略的依據(jù)。要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系管理，強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作全程監(jiān)管，嚴(yán)格控制檢測(cè)質(zhì)量，確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)科學(xué)規(guī)范，檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。□□