接種部位

摘 要：胚內(nèi)免疫接種有助于家禽快速建立對疾病的免疫力，并能節(jié)省接種的人力成本。接種后胚胎孵化率和家禽出雛后對疾病的抵抗力是衡量胚內(nèi)免疫成功與否的重要標(biāo)準(zhǔn)，也是與經(jīng)濟(jì)效益密切相關(guān)的重要因素。

關(guān)鍵字：胚內(nèi)接種；接種部位；免疫；孵化率

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號(hào)：1001-0769（2015）08-0060-03

胚內(nèi)免疫現(xiàn)已普遍應(yīng)用于美國大多數(shù)孵化場，并且已經(jīng)快速推廣到拉丁美洲與亞洲。毫無意外的是，越來越多的胚內(nèi)免疫設(shè)備已經(jīng)進(jìn)入市場。

乍一看，胚內(nèi)免疫設(shè)備好像很復(fù)雜——它們確實(shí)整合了大量非常先進(jìn)的生物工程設(shè)計(jì)特點(diǎn)，使它們難以比較。

然而，當(dāng)需要選出最適宜的設(shè)備時(shí)，其中一個(gè)簡單卻最為重要的功能是：持續(xù)不斷地將疫苗接種到蛋內(nèi)的正確部位。其重要性超出其它所有功能，這項(xiàng)功能決定了胚內(nèi)免疫的成敗。

1 打破神秘面紗

去年年末，我參加了在薩爾瓦多舉辦的第23屆拉丁美洲養(yǎng)禽協(xié)會(huì)代表大會(huì)，與會(huì)者對胚內(nèi)免疫的關(guān)注程度使我印象深刻。然而，讓我擔(dān)憂的是，部分人好像認(rèn)為胚內(nèi)接種疫苗的部位并不重要，只要疫苗進(jìn)入蛋內(nèi)就可以了。過去幾年的研究表明，在胚內(nèi)免疫操作中，將疫苗注射到雞胚的適當(dāng)部位，是有效免疫所必須的。

在美國進(jìn)行的一項(xiàng)研究中，研究人員在現(xiàn)場比較了兩種不同的胚內(nèi)免疫設(shè)備，結(jié)果兩種設(shè)備的孵化率差異顯著（P≤0.05）。

研究同時(shí)包括全孵化與配對測試。在全孵化的比較中，在一個(gè)商品化的孵化場里，交替使用兩種設(shè)備進(jìn)行胚內(nèi)免疫。每種設(shè)備每天大約注射230 000枚孵育19 d 1 h的雞胚；在9周的試驗(yàn)期內(nèi)，總共有約700萬枚雞胚進(jìn)行胚內(nèi)接種。

對于研究的配對測試部分，在雞胚從孵化機(jī)轉(zhuǎn)移至出雛機(jī)的過程中，隨機(jī)接受兩種設(shè)備中的一種進(jìn)行胚內(nèi)接種；共有超過29 000枚孵化18 d和19 d的雞胚進(jìn)行了胚內(nèi)接種。

全孵育比較結(jié)果顯示，與帶有單針頭的B設(shè)備相比，帶有雙針頭的A設(shè)備孵化率更高（表1）。

配對檢驗(yàn)結(jié)果表明，在18日齡接種時(shí)，設(shè)備A有著顯著的優(yōu)勢（P≤0.05），但在19胚齡接種時(shí)，兩種設(shè)備差異不顯著（表2）。

2 經(jīng)濟(jì)效益

從經(jīng)濟(jì)效益的角度考慮這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 1 %的孵化率差異相當(dāng)于該研究運(yùn)用時(shí)每周約 5 000美元的價(jià)值差距。兩種設(shè)備間的差異每年將導(dǎo)致260 000美元的效益差距。

上述研究表明，兩種胚內(nèi)免疫設(shè)備的孵化率差異顯著。那么為什么會(huì)造成這種差異呢？

自第一臺(tái)商品化胚內(nèi)免疫設(shè)備問世以來，迄今已過去20多年。眾所周知，接種時(shí)間與接種部位是馬立克疫苗成功免疫的關(guān)鍵因素。

研究顯示，胚內(nèi)接種需要在孵育17 d 12 h與19 d 4 h之間進(jìn)行。這時(shí)，孵化中的雞胚的頭部位于右翅之下，并且卵黃囊的莖部進(jìn)入雞胚腹部。疫苗必須接種到羊膜腔或雞胚本身，進(jìn)行肌內(nèi)注射（IM）或皮下注射（SC）以達(dá)到最佳效果。

為滿足這種要求，第一臺(tái)設(shè)備專門設(shè)計(jì)成能周而復(fù)始地將疫苗注射到正確的部位。因此，上述研究中的兩種設(shè)備的孵化率差異可能與疫苗注射的一致性相關(guān)；可能偶爾出現(xiàn)的不準(zhǔn)確注射損傷了雞胚進(jìn)而影響到孵化率。

3 接種準(zhǔn)確性研究

研究人員在美國兩個(gè)商品化肉雞孵化場進(jìn)行另一項(xiàng)研究，以找出前面研究所使用的胚內(nèi)免疫設(shè)備在疫苗接種的準(zhǔn)確性方面是否確實(shí)存在偏差。

將一種標(biāo)準(zhǔn)的馬立克疫苗與蛋白染料混合，以便檢測在蛋內(nèi)的接種部位。將疫苗接種到羊膜腔，或通過肌內(nèi)或靜脈注射接種到雞胚被視為正確的免疫操作；將疫苗接種到氣囊、尿膜囊、雞胚腹部、顱骨以及胸腔等等，均被視為不正確的接種操作。每種設(shè)備處理超過1 000羽正常的雞胚，分別在Chick Master孵化場與Jamesway Super孵化場進(jìn)行孵化。

研究結(jié)果表明，兩種設(shè)備接種準(zhǔn)確度有著較大差異：A設(shè)備在一個(gè)孵化場里接種準(zhǔn)確度接近95 %，在另一個(gè)孵化場里接種準(zhǔn)確度超過 91 %。而設(shè)備B，接種準(zhǔn)確度分別只有61.16 %與71.98 %（表3）。

這清楚的表明，兩種設(shè)備在疫苗注射的準(zhǔn)確性方面差異明顯。這也可能解釋了兩種設(shè)備孵化率的差異，因?yàn)槠渲械囊环N可能損傷了更多的雞胚因而降低了更多雞胚的生存能力。

設(shè)備A利用壓縮空氣使一種管狀基質(zhì)擴(kuò)張后牢牢抓住浮動(dòng)的針頭。這可以幫助注射器定位于每個(gè)雞蛋的頂部，不管雞蛋的大小、形狀以及方位如何。對于孵化場而言，孵化率自然是一個(gè)重要參數(shù)，任何胚內(nèi)免疫設(shè)備均應(yīng)維持盡可能高的孵化率。

然而，使用胚內(nèi)免疫接種疫苗的主要目的是通過幫助雞抵抗疾病的威脅從而提高出雛后雞的生產(chǎn)性能。

4 疾病保護(hù)研究

在美國進(jìn)行的第三個(gè)相關(guān)研究是使用與上面研究中相同的兩種接種設(shè)備比較孵化率以及對馬立克氏病的保護(hù)效果。

對18日齡肉雞雞胚進(jìn)行免疫接種，一種普遍用于肉雞養(yǎng)殖業(yè)以幫助雞抵抗馬立克氏病病毒（Marek’s Disease Virus，MDV）的火雞皰疹病毒疫苗（Herpesvirus of Tukey，HVT）以及一種利用相同HVT作為載體的插入了傳染性法氏囊病病毒蛋白的重組活載體疫苗（rHVT-IBD）。

無論是使用帶有雙針頭的設(shè)備A還是單針頭的設(shè)備B，雞在5日齡時(shí)用MDV高毒力株RBIB株攻毒并在14日齡、21日齡以及49日齡時(shí)稱重。

在50日齡時(shí)或在雞死亡前進(jìn)行剖檢，檢查馬立克病病變。

結(jié)果顯示兩種設(shè)備造成的孵化率與體重都有差異，帶有雙針頭的設(shè)備結(jié)果更好。

馬立克氏病發(fā)病率也有明顯的差異，帶有雙針頭的設(shè)備再次獲得更好的結(jié)果（圖1）。

5 接種位置不當(dāng)?shù)暮蠊?/p>

這些研究清楚地表明，胚內(nèi)免疫設(shè)備的差異對孵化率以及出雛后雞的生產(chǎn)性能都將造成不同的后果。將疫苗接種到雞胚的不正確位置有兩個(gè)潛在的不利后果。

首先，針頭造成的損傷可能導(dǎo)致一些胚胎死亡從而使孵化率下降，例如損傷了雞胚的頭蓋骨。

其次，對于疾病的威脅沒有獲得最佳的保護(hù)力。由于疫苗接種到不正確的部位，雞未被激發(fā)出良好的免疫反應(yīng)，從而仍然對野毒易感，并成為雞群中的排毒者。如果這樣的雞在數(shù)量上達(dá)到一定的程度，即便免疫接種良好的雞也會(huì)被大量的病毒突破而患病。

在商品化雞場進(jìn)行的試驗(yàn)，都已經(jīng)出現(xiàn)了這兩種后果，并且這兩種后果均顯著影響了生產(chǎn)效率與經(jīng)濟(jì)效益。

因此，選用盡可能可一致地將疫苗接種到正確部位的胚內(nèi)免疫設(shè)備，將不合格免疫的雞控制到一個(gè)最低的數(shù)量以下是必須的（圖2）。

不同設(shè)備將疫苗接種到最合適部位的能力各不相同，取決于整合到其中的生物工程設(shè)計(jì)的不同而不同。

孵化場的管理人員需要注意，并非所有的胚內(nèi)免疫設(shè)備性能都是相同的，在做出購買任何設(shè)備的決定之前，需要事先進(jìn)行充分的咨詢。

原題名：Location，location，location—the key to successful in ova vaccination （英文）

原作者：Tarsicio Villalobos（碩騰國際家禽公司技術(shù)服務(wù)主管）