黃連堿對(duì)肥胖金黃地鼠的減肥作用研究

夏 爽，鄒宗堯，胡慭然，王燕枝，李學(xué)剛(西南大學(xué) 藥學(xué)院，重慶 400715)

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黃連堿對(duì)肥胖金黃地鼠的減肥作用研究

夏 爽，鄒宗堯，胡慭然，王燕枝，李學(xué)剛*
(西南大學(xué) 藥學(xué)院，重慶 400715)

目的：探討黃連堿對(duì)高脂飼料誘導(dǎo)的肥胖金黃地鼠的減肥作用及機(jī)制。方法：給予肥胖金黃地鼠黃連堿后,檢測(cè)體重、肝重、脂體比和血脂等指標(biāo)，觀察其減肥效果。結(jié)果：給予黃連堿后,肥胖金黃地鼠的體重增長(zhǎng)速度顯著減緩,體脂含量降低；血清TC、TG、LDL-C水平明顯降低,高劑量組HDL-C水平顯著提高，與模型組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：黃連堿具有降脂減肥作用。

黃連堿；減肥；金黃地鼠

肥胖不僅是一種危害健康的慢性病,也是與高血壓、冠心病、糖尿病等多種疾病相關(guān)的危險(xiǎn)因素[1]。肥胖問題不僅是對(duì)人類健康的嚴(yán)峻挑戰(zhàn),也是全球關(guān)注的重大公共衛(wèi)生問題。目前大部分肥胖的發(fā)生是由于機(jī)體營(yíng)養(yǎng)過剩而導(dǎo)致能量攝入大于能量消耗而形成單純性肥胖[2]。黃連為毛茛科植物黃連CoptischinensisFraneh.、三角葉黃連CoptisdeltoideaC.Y.Cheng et Hsiao及云連CoptisteetaWall.的干燥根莖[3]，具有清熱燥濕、瀉火解毒的功能。黃連的活性成分為黃連生物堿，主要為小檗堿、黃連堿、巴馬汀、表小檗堿和藥根堿等[4]。近年來的實(shí)驗(yàn)及臨床研究證實(shí)小檗堿具有降低血糖、調(diào)節(jié)異常脂質(zhì)代謝、改善胰島素抵抗等作用[5-7],但黃連堿在降脂減肥方面的研究卻鮮有報(bào)道。本文通過研究黃連堿的減肥功能及可能機(jī)制,為其進(jìn)一步開發(fā)和利用提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

TG16-W微量高速離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)，標(biāo)準(zhǔn)大鼠實(shí)驗(yàn)籠具(杭州馮氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物器材廠)，ACS-6H-B電子秤(中山市金利電子衡器有限公司)。

1.2 藥品與試劑

黃連堿,西南大學(xué)藥學(xué)院提供；奧里司他、甘油三酯試劑盒、總膽固醇試劑盒，購(gòu)自長(zhǎng)春匯力生物技術(shù)有限公司，HDL-C試劑盒、LDL-C試劑盒,購(gòu)自上海榮盛生物藥業(yè)。

1.3 動(dòng)物

雄性金黃地鼠60只，重慶市騰鑫生物技術(shù)有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物造模和分組

60只雄性金黃地鼠給予基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，隨機(jī)選取10只作為正常對(duì)照組，剩余的讓其自由采食高脂飼料(組成：10%豬油、10%蛋黃粉、1%膽固醇、79%基礎(chǔ)飼料)。喂養(yǎng)4周后，空腹禁食12h(不禁水)，于眼眶后靜脈取血，測(cè)定其體重、TC、TG、LDL-C和HDL-C。將造模成功的金黃地鼠隨機(jī)均分為5組(n=10)：模型組，奧利斯他組，黃連堿低、中、高劑量組。藥物干預(yù)4周，正常對(duì)照組和模型組每天灌胃等體積生理鹽水，奧利斯他組每天給藥42mg/kg，黃連堿低、中、高劑量分別按每天23.35、46.7、70.05mg/kg給藥。金黃地鼠自由飲食，飲水；光照節(jié)律12L:12D(7:00～19:00)，室溫：(24±2)℃，濕度：(55±10)%。

2.2 指標(biāo)測(cè)定

2.2.1 體重、體長(zhǎng)和剩食量測(cè)定 在實(shí)驗(yàn)期間，各組動(dòng)物均采取單籠飼養(yǎng)并自由攝食、飲水。每3天測(cè)定1次體重(灌胃給藥前稱量)和剩食量，并記錄結(jié)果。處死前在麻醉狀態(tài)下準(zhǔn)確測(cè)量體長(zhǎng)(從鼻至肛門的長(zhǎng)度)、腰圍，按公式[Lee's=(體重)^(1/3)×103/體長(zhǎng)(cm)]計(jì)算Lee's指數(shù)[8-9]。

2.2.2 血清TC、TG、LDL-C、HDL-C測(cè)定 取血前，空腹禁食12h(不禁水)，用玻璃毛細(xì)管于眼眶后靜脈采血，靜置2h后，5 000r/min 離心10min，取上清，于-20℃保存，采用生化試劑盒測(cè)定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C。

2.2.3 肝重、睪丸及腎周脂肪測(cè)定 剖取肝臟并稱重，分別剖取腎周圍和睪丸周圍的全部脂肪稱重，計(jì)算脂肪/體重的比值[10]。

2.3 數(shù)據(jù)處理

3 結(jié)果

3.1 黃連堿對(duì)金黃地鼠體重的影響

如圖1所示，在高脂飼料喂養(yǎng)4周后，模型組金黃地鼠體重顯著增加，肥胖金黃地鼠比正常組老鼠重約15g。在藥物干預(yù)4周后，相比模型組，黃連堿可顯著降低肥胖模型金黃地鼠的體重增長(zhǎng)速度,中劑量和高劑量黃連堿組金黃地鼠體重增長(zhǎng)速度的降低程度更為顯著(P<0.01) 。

3.2 黃連堿對(duì)金黃地鼠體長(zhǎng)、Lee's指數(shù)和攝食量的影響

由表1可見，各組金黃地鼠體長(zhǎng)差異較小，與空白對(duì)照組比較，模型組的Lee's指數(shù)顯著升高(P<0.05)，與模型組

比較，黃連堿中劑量和高劑量組的Lee's指數(shù)明顯降低(P<0.01)。而各組的攝食量無顯著性差異，說明黃連堿不影響金黃地鼠的食欲。

圖1 黃連堿對(duì)體重的影響

表1 各組金黃地鼠體長(zhǎng)及Lee’s 指數(shù)比較

注：與正常組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與高脂模型組比較，*P<0.05,**P<0.01。

3.3 黃連堿對(duì)金黃地鼠血脂水平的影響

由表2可見，與正常組相比，模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C水平均顯著升高(P<0.05或<0.01),HDL-C稍降低，但無顯著性差異(P>0.05)。經(jīng)過黃連堿不同濃度處理后，給藥大鼠的血清TC，TG和LDL-C水平都有不同程度的下降，而HDL-C呈上升趨勢(shì)，呈劑量依賴關(guān)系。跟高脂模型組相比，黃連堿高劑量組(70.05mg/kg)的降脂作用最佳，TC，TG和LDL-C水平顯著降低(P<0.05或<0.01)，HDL-C含量提高(P<0.05)。表明黃連堿對(duì)TC，TG，LDL-C或HDL-C有著不同程度的調(diào)節(jié)能力。

表2 黃連堿對(duì)血脂水平的影響

注：與正常組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與高脂模型組比較，*P<0.05,**P<0.01。

3.4 對(duì)金黃地鼠肝重及脂肪重量的影響

由表3可見，與空白對(duì)照組比較，模型組的肝重、脂肪重量及脂肪/體重顯著增加(P<0.05)，表明喂飼營(yíng)養(yǎng)性飼料能夠加重金黃地鼠體內(nèi)脂肪的堆積，而與模型組比較，黃連堿中劑量和高劑量組肝重顯著降低(P<0.05)，與此同時(shí)高劑量組脂肪重和脂肪/體重顯著降低(P<0.05)。

表3 黃連堿對(duì)金黃地鼠肝重、脂肪重以及脂肪濕重與體重比值的影響

注：與正常組比較，△P<0.05；與模型組比較，*P<0.05。

4 討論

隨著人們生活水平的提高,肥胖已成為一種常見病,是多種疾病的相關(guān)危險(xiǎn)因素。研究表明肥胖病人(BMI>30)體重減輕5%～10%,可使肥胖相關(guān)疾病的危險(xiǎn)性顯著降低[11-12]。肥胖癥的治療除控制飲食、增加運(yùn)動(dòng)外,促進(jìn)體內(nèi)脂肪動(dòng)員日益為人們所關(guān)注,但以往的降血脂藥物多存在不良反應(yīng)[1]。近年來許多學(xué)者日益重視植物原料的減肥研究,減肥食品已成為現(xiàn)代減肥的方向。

黃連作為傳統(tǒng)中藥材，具有顯著的降脂作用[13]，其主要活性成分包括小檗堿和黃連堿等生物堿。而小檗堿的降脂作用及相關(guān)機(jī)制已經(jīng)得到廣泛的報(bào)道，但黃連堿的降脂減肥作用鮮少見報(bào)道。本課題將黃連堿用于高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖金黃地鼠，觀察其減肥作用，為其可能的減肥機(jī)制研究提供前期實(shí)驗(yàn)資料和理論依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過4周高脂飼料喂飼，肥胖模型組體重增長(zhǎng)均明顯高于基礎(chǔ)飼料對(duì)照組，表明單純性肥胖動(dòng)物模型建立成功。經(jīng)不同劑量黃連堿處理4周后，與模型組比較，黃連堿可顯著降低肥胖模型動(dòng)物的體重增長(zhǎng)速度，肝重、Lee's指數(shù)顯著降低，體內(nèi)脂肪堆積減少，而與低劑量組相比，高劑量組動(dòng)物體重增長(zhǎng)速度和脂體比的降低程度更為顯著，表明了在各組的食物攝入量幾乎相同的情況下，黃連堿能夠顯著抑制脂肪吸收，減肥效果顯著。在試驗(yàn)過程中各組動(dòng)物均未發(fā)現(xiàn)腹瀉或其他異常狀況，說明肥胖模型動(dòng)物體重增長(zhǎng)緩慢并不是由于脫水或金黃地鼠本身疾病所導(dǎo)致。實(shí)驗(yàn)血脂檢測(cè)結(jié)果表明，黃連堿可顯著降低肥胖模型動(dòng)物 TC、TG、LDL-C水平,提高HDL-C，說明黃連堿也可有效地使肥胖金黃地鼠的血脂水平恢復(fù)正常。

綜上所述，黃連堿具有一定的降脂減肥活性，可以通過減少體內(nèi)脂肪堆積，進(jìn)而改善體重和肝重。

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(責(zé)任編輯：魏 曉)

Antiobesity Effect of Coptisine on Syrian Golden Hamsters

Xia Shuang，Zou Zongyao，Hu Yinran，Wang Yanzhi，Li Xuegang*
(School of Pharmaceutical Sciences,Southwest University,Chongqing 400715)

Objective:To investigate the antiobesity effect and mechanism of coptisine on obesity Syrian golden hamsters induced by high-fat diet.Methods:After treat obesity Golden Gophers with coptisine，recoded weight ,liver weight ,body fat ratio,and lipids ,observed the antiobesity effect.Results:Coptisine can significantly slowed the obesity hamster weight growth rate,lower body fat content; Can significantly reduced serum TC,TG,LDL-C levels,and the high dose group was significantly increased HDL-C levels (P<0.05);Conclusion:coptisine have antiobesity effect .

Coptisine; Antiobesity；Syrian Golden Hamsters

2015-03-17

國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2011BAI13B02-1)

夏爽(1990-)，女，西南大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。

李學(xué)剛(1964-)，男，博士，西南大學(xué)教授，研究員，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物化學(xué)。E-mail：Xuegangli@swu.edu.cn

R285.5

A

1673-2197(2015)15-0012-03

10.11954/ytctyy.201515004