吳立國(guó),韓淑英,石雪靜,張 英,石亞靜,錢(qián) 莊(.開(kāi)灤醫(yī)療集團(tuán)錢(qián)家營(yíng)醫(yī)院,河北 唐山 06330; .河北聯(lián)合大學(xué),河北 唐山 063000)
?
蕎麥花葉黃酮對(duì)腸道平滑肌活動(dòng)的影響
吳立國(guó)1,韓淑英2*,石雪靜2,張 英2,石亞靜2,錢(qián) 莊2
(1.開(kāi)灤醫(yī)療集團(tuán)錢(qián)家營(yíng)醫(yī)院,河北 唐山 063301; 2.河北聯(lián)合大學(xué),河北 唐山 063000)
目的:研究蕎麥花葉黃酮(FBFL)對(duì)腸道平滑肌活動(dòng)的影響及其作用機(jī)制。方法:采用炭末推進(jìn)法觀察不同劑量FBFL對(duì)正常大鼠腸道活動(dòng)的影響。結(jié)果:FBFL能促進(jìn)正常大鼠炭末推進(jìn)率,但作用弱于硫酸鎂(P<0.01),并能拮抗阿托品對(duì)腸蠕動(dòng)的抑制作用,呈劑量依賴性(P<0.01)。結(jié)論:FBFL對(duì)腸平滑肌有興奮作用,其作用機(jī)制可能與激動(dòng)M受體有關(guān)。
蕎麥花葉黃酮;腸道平滑?。皇湛s;阿托品
1.1 一般資料
蓼科(Polygonacea)蕎麥屬(FagopyrumMill.)植物在全世界有15種,廣泛分布于亞洲和歐洲,我國(guó)有10個(gè)種1個(gè)變種,有2個(gè)種為栽培種[1]。常見(jiàn)的有蕎麥(FagopyrumesculentumMoench)、苦蕎麥(F.tataricum(L.) Gaertn.)和金蕎麥(F.dibotrys(D. Don) Hara),目前對(duì)苦蕎麥、金蕎麥的研究較多,而蕎麥主要用作食品,對(duì)其研究較少。蕎麥中主要作為糧食應(yīng)用的成分是蕎麥種子,結(jié)果造成大量的花葉被廢棄。蕎麥花葉黃酮(flavones of buckwheat flower and leaf,F(xiàn)BFL) 為其花葉中提取的黃酮類成分。近年來(lái)有研究表明FBFL具有降血糖[2]、降血脂[3]、抗氧化[4]等多種生物學(xué)作用,但其對(duì)腸道平滑肌活動(dòng)的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在研究FBFL對(duì)腸道平滑肌活動(dòng)的影響,并探求其作用機(jī)制。
1.1 蕎麥花葉黃酮的制備
自然干燥的蕎麥花葉,粉碎,用去離子90℃加熱提取2次,合并濾液,濃縮, 加離劑( 酸性殼聚糖) 攪拌,趁熱過(guò)濾,濾液靜置沉淀,過(guò)濾得黃色沉淀物為總黃酮,用紫外分光光度法,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn),測(cè)得黃色沉淀物中總黃酮含量為95%[5]。1.2 藥品與試劑
蕎麥花葉:采自內(nèi)蒙古庫(kù)倫旗, 經(jīng)河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院鑒定確認(rèn)。硫酸阿托品(Atropin)注射液(貴州光正制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn),批號(hào)100806);硫酸鎂。墨汁的配制:準(zhǔn)確稱取阿拉伯樹(shù)膠100g,加水800mL,煮沸至溶液透明,稱取活性炭粉50g加入上述溶液中煮沸3次,待溶液涼后加水定容至1 000mL[6]。
1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
正常健康大鼠,體重180~220g。雌雄兼有,合格證號(hào) SCXK<津>2011-0002。
2.1 FBFL對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)的影響
2.1.1 FBFL對(duì)正常大鼠腸道蠕動(dòng)的影響 取大鼠50只,隨機(jī)分為五組。各組大鼠禁食12h給藥:空白對(duì)照組,灌胃生理鹽水20mL/kg;陽(yáng)性對(duì)照組,灌胃10%硫酸鎂20mL/kg(2g/kg);FBFL低、中、高劑量組,分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg,容積為20mL/kg。給藥后30min,各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹(shù)膠),0.4mL/只,30min 后脫頸椎處死大鼠,立即剖腹,分離腸系膜,剪取上端自幽門(mén)、下端至回盲部的腸管,置于托盤(pán)上,輕輕將小腸拉成直線,測(cè)量從幽門(mén)至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”,再測(cè)量從胃幽門(mén)到回盲部的距離為小腸總長(zhǎng)度,計(jì)算墨汁推進(jìn)率。墨汁推進(jìn)率(%)=墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度(cm)/小腸總長(zhǎng)度(cm)×100%。2.1.2 FBFL對(duì)阿托品致大鼠腸道蠕動(dòng)抑制的影響 取大鼠50只,適應(yīng)飼養(yǎng)1周后,禁食12h,隨機(jī)分為:正常對(duì)照組,灌胃生理鹽水20mL/kg;阿托品對(duì)照組,灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg),10min后灌胃生理鹽水20mL/kg;FBFL低、中、高劑量組,灌胃0.1%阿托品20mL/kg(20mg/kg),10min分別灌胃FBFL 50、100、200mg/kg,容積為20mL/kg。給FBFL后30min,各組大鼠均灌胃給予墨汁(含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹(shù)膠),0.4mL/只,30min后脫頸椎處死大鼠,按“2.1.1”項(xiàng)下方法計(jì)算墨汁推進(jìn)率。2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3.1 FBFL對(duì)正常大鼠腸道蠕動(dòng)的影響
由表1可見(jiàn),與對(duì)照組比較,中、高劑量蕎麥花葉黃酮組均能顯著促進(jìn)正常大鼠炭末推進(jìn)率(P<0.01),且對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)的促進(jìn)作用呈劑量依賴性,但低、中、高劑量組對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)的促進(jìn)作用均明顯弱于硫酸鎂組(P<0.01)。
表1 FBFL對(duì)正常大鼠腸道蠕動(dòng)的影響
注:與對(duì)照組比較,**P<0.01;與硫酸鎂組比較,△△P<0.01。
3.2 FBFL對(duì)阿托品抑制大鼠腸道蠕動(dòng)的影響
由表2可見(jiàn),阿托品組對(duì)碳末推進(jìn)率明顯低于對(duì)照組,并抑制腸蠕動(dòng)(P<0.01),不同劑量FBFL能拮抗阿托品對(duì)腸管蠕動(dòng)的抑制作用,且呈劑量依賴性,F(xiàn)BFL中、高劑量組作用更明顯(P<0.01)。
表2 FBFL對(duì)阿托品抑制大鼠腸道蠕動(dòng)的影響
注:與對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與阿托品組比較,△△P<0.01。
蕎麥富含高生物價(jià)的蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)元素等,最為重要的是含有極為豐富的生物活性成分黃酮類化合物,這是其他谷類糧食所不具有的,是黃酮類化合物的重要膳食來(lái)源[7-8]。蕎麥中的黃酮成分,不僅可以作為抗氧化劑和功能性食品的原料,而且具有降低毛細(xì)血管脆性、改善微循環(huán)的作用,在臨床上可用于糖尿病、高血壓等的輔助治療[9]。作為食品,蕎麥已經(jīng)占有一席之地,但是作為藥品使用它還沒(méi)有引起足夠重視。在臨床應(yīng)用中,最理想的藥物是高效低毒的藥品,食品作為日常生活中的必需品,較為安全,而具有藥用價(jià)值的食品是相對(duì)較為安全的藥品,藥物或多或少都具有一定的毒副作用,中藥相對(duì)于西藥,毒副作用相對(duì)較小。在治療疾病時(shí),選用藥食同源且具有高效低毒作用的植物作為藥品是最佳選擇。蕎麥作為藥食同源的植物,具有低毒作用,但是目前還未實(shí)現(xiàn)高效利用,尚需用科學(xué)、先進(jìn)、現(xiàn)代的研究手段來(lái)實(shí)現(xiàn)。蕎麥種子主要作為糧食應(yīng)用,而大量的花葉被廢棄。研究發(fā)現(xiàn),蕎麥花葉中含有豐富黃酮類成分,并具有抗氧化、降糖、降脂、免疫調(diào)節(jié)等作用[10-11],但其對(duì)腸道平滑肌活動(dòng)的影響尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了FBFL對(duì)腸平滑肌收縮功能的影響研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn),F(xiàn)BFL的作用是興奮腸管平滑肌,顯示FBFL對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)具有顯著的促進(jìn)作用(P<0.01),但弱于硫酸鎂(P<0.01); FBFL能拮抗阿托品對(duì)大鼠腸管蠕動(dòng)的抑制作用,并呈劑量依賴性(P<0.01)。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,F(xiàn)BFL能促進(jìn)正常大鼠炭末推進(jìn)率,呈劑量依賴性(P<0.01)。但FBFL對(duì)正常大鼠腸道蠕動(dòng)的促進(jìn)作用明顯弱于硫酸鎂(P<0.01),表明FBFL促進(jìn)腸蠕動(dòng)作用較緩和,引起腹瀉的可能性不大;進(jìn)一步研究顯示,F(xiàn)BFL能拮抗阿托品對(duì)腸蠕動(dòng)的抑制作用,阿托品為M膽堿受體拮抗劑,而FBFL能有效拮抗阿托品對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)的抑制作用,表明FBFL對(duì)腸道平滑肌收縮的促進(jìn)作用與激動(dòng)M膽堿受體有關(guān)。但FBFL的作用機(jī)制是否與影響腸平滑肌的其他因素有關(guān),需進(jìn)一步研究;黃酮類成分很多,具體是哪一成分發(fā)揮作用,有待探索。
綜上所述,F(xiàn)BFL對(duì)大鼠腸道蠕動(dòng)有促進(jìn)作用,其興奮腸管的作用可能與激動(dòng)M受體有關(guān)。
[1] 中國(guó)植物志編輯委員會(huì). 中國(guó)植物志[M]. 第25卷. 北京: 科學(xué)出版社, 1998.
[2] 白靜,姜妍,韓婷,等.蕎麥花葉黃酮對(duì)2型糖尿病C57小鼠糖脂代謝及胰島素抵抗的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),2012,33(13):1876.
[3] 韓淑英,王志路,儲(chǔ)金秀,等.蕎麥花葉黃酮對(duì)2型糖尿病大鼠胰島素抵抗及肝組織PTP1B的影響[J].中國(guó)中藥雜志,2009,34(23):3114.
[4] LI-SHA ZHU, XIN-CHAO MA, SHU-YING HAN, et al. Effect of total flavones of buckwheat leaf on blood lipid and lipid peroxides[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2004,8(25):5178.
[5] 韓淑英,張博男,張靜怡,等.蕎麥花葉黃酮對(duì)2 型糖尿病大鼠血糖穩(wěn)態(tài)的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,35(23):2597-2599.
[6] 陳奇.中藥藥理研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993,333-334.
[7] 王紅育, 李穎. 蕎麥的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景[J]. 食品科學(xué),2004,25(10):388-391.
[8] 王安虎, 熊梅, 耿選珍,等. 中國(guó)蕎麥的開(kāi)發(fā)利用現(xiàn)狀與展望[J]. 作物雜志,2003(3):7-8.
[9] 文平, 陳進(jìn). 紅蕎麥蘆丁的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2006,21(3):108-111.
[10] 王樹(shù)華,韓淑英,耿菲, 等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選甜蕎麥花葉中蘆丁的提取工藝[J].遼寧中醫(yī)雜志,2011,38(6):1178-1179.
[11] 馬俊利,李春鋼,張博男,等.甜蕎麥花葉化學(xué)成分研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(13):94-96.
(責(zé)任編輯:宋勇剛)
Effects of Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf on Intestinal Smooth Muscle Activities
Wu LiGuo1,Han ShuYing2*,Shi Xuejing2,Zhang Ying2,Shi YaJing2,Qian Zhuang2
(1.Qianjiaying Hospital of Kailuan Hospital Group, Hebei 063301,China;2.College Student of Hebei United University,Hebei 063000,China)
Objective:To study the effects of total flavones of buckwheat flower and leaf on intestinal smooth muscle activities and its menchanism.Methods:Effects of different doses of FBFL on normal intestinal in mouse were detected by Propulsive method.Different concentrations.Results:FBFL could promote propulsive rate of the normal mice. But the effect of TFBFL was weaker than Magnesium sulfate(P<0.01). Antagonism of TFBFL show dose dependently on atropine inhibition in intestinal peristalsis. (P<0.01), showed dose dependent (P<0.01).Conclusion:FBFL has excitatory effects on the intestinal smooth muscle. The mechanism may be related with the activation of the M receptor.
Total Flavones of Buckwheat Flower and Leaf(TFBFL);Intestinal Smooth Muscle; Shrinkage;Atropine
2015-01-08
河北省唐山市“十二五”重點(diǎn)科技支撐項(xiàng)目(10130203-3)
吳立國(guó)(1981-),河北省開(kāi)灤醫(yī)療集團(tuán)錢(qián)家營(yíng)醫(yī)院主治醫(yī)師,研究方向?yàn)樾哪X血管疾病。
韓淑英(1959-),女,河北聯(lián)合大學(xué)教授,碩士生導(dǎo)師,研究方向?yàn)橹兴幩幚韺W(xué)。E-mail:shuyinghan59@126.com
R285.5
A
1673-2197(2015)11-0014-02
10.11954/ytctyy.201511005