由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性及消除

邱美珍， 杜麗飛， 王紅兵, 楊 俊,王　慧，周望平，何　平

(湖南省畜牧獸醫(yī)研究所， 湖南 長(zhǎng)沙 410131)

由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性及消除

邱美珍， 杜麗飛， 王紅兵, 楊 俊,王慧，周望平，何平

(湖南省畜牧獸醫(yī)研究所， 湖南 長(zhǎng)沙 410131)

摘要：細(xì)菌的耐藥性普遍存在，R質(zhì)粒是介導(dǎo)大腸桿菌耐藥性的主要遺傳因子。本文就R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性，R質(zhì)粒的消除做一綜述。旨在為細(xì)菌恢復(fù)對(duì)抗生素的敏感性提供參考。

關(guān)鍵詞：R質(zhì)粒；大腸桿菌；耐藥性；消除

由耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒)介導(dǎo)的耐藥性可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式在不同菌株之間傳遞，使敏感菌成為耐藥菌，造成R質(zhì)粒的流行。R質(zhì)粒的傳遞使得耐藥性在細(xì)菌間廣泛播散，還使體內(nèi)部分正常菌群成為耐藥基因庫(kù)[1-3]。細(xì)菌耐藥形勢(shì)越來(lái)越嚴(yán)峻，許多學(xué)者致力于研究細(xì)菌耐藥性的消除，發(fā)現(xiàn)許多理化因素如高溫培養(yǎng)、紫外線照射，藥物如SDS、中藥等具有質(zhì)粒消除作用[4-6]。本文從R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性，R質(zhì)粒的消除加以闡述，旨在為恢復(fù)細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性提供參考。

1R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性

大腸桿菌耐藥性表現(xiàn)突出，多重耐藥也經(jīng)常發(fā)生，R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌耐藥性主要是其攜帶了許多的大腸桿菌耐藥基因，例如氟喹諾酮類耐藥基因、氨基糖苷類修飾酶基因、外排泵基因、16SrRNA甲基化酶基因、ESBLS基因、IntⅠ基因等，由這些基因編碼的蛋白介導(dǎo)了大腸桿菌的耐藥。

1.1由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氟喹諾酮類耐藥

已知曉的大腸埃希菌質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因(plasmid-mediated quinolone resistance，PMQR)主要有:qnr基因及其不同的等位基因，包括qnrA、qnrS、qnrB、qnrC和qnrD；氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶變異基因aac(6') -Ib-cr；外排泵基因qepA和oqxAB[7]。

qnr(現(xiàn)命名為qnrA1)基因首先發(fā)現(xiàn)于一株膜蛋白缺失的肺炎克雷伯菌攜帶的多重耐藥質(zhì)粒pMG252，隨后在膜孔蛋白完好的大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒pMG252同樣能使氟喹諾酮類藥物的MIC升高8～64倍，從而證實(shí)質(zhì)粒pMG252上編碼了可介導(dǎo)氟喹諾酮類藥物耐藥的相關(guān)基因，對(duì)該質(zhì)粒的深入研究，還先后又發(fā)現(xiàn)了其不同的等位基因qnrS、qnrB、qnrC和qnrD[8]。qnr基因僅介導(dǎo)低水平的氟喹諾酮耐藥，但攜帶其耐藥基因的菌株比其他菌株更易誘導(dǎo)產(chǎn)生染色體靶位基因的突變，從而導(dǎo)致高水平耐藥菌株的快速出現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)表明攜帶 pMG252質(zhì)粒的大腸埃希菌相比不帶 pMG252的菌株發(fā)生自發(fā)突變的概率高100倍。同時(shí)質(zhì)粒介導(dǎo)的qnr基因具有水平傳播性，還可以跨種傳播，從而導(dǎo)致耐藥性的擴(kuò)散。

aac(6＇)-Ib-cr耐藥基因是aa(6＇)-Ib的一個(gè)突變體，aac(6＇)-Ib-cr有兩個(gè)突變點(diǎn)即:102Trp→Arg和179Asp→Tyr。雙位點(diǎn)的突變使aac(6＇)-Ib-cr在保持對(duì)氨基糖苷類藥物親和的同時(shí)還可以與氟喹諾酮類藥物親和，但它對(duì)氨基糖苷類藥物的親和力要遠(yuǎn)大于氟喹諾酮類，Maurice 等[9]認(rèn)為l79Asp → Tyr的突變和氟喹諾酮藥物結(jié)合有關(guān)。aac(6＇)-Ib-cr通過(guò)與哌嗪環(huán)上的“NH”發(fā)生乙?；磻?yīng)降低細(xì)菌藥物的敏感性，因此aac(6＇)-Ib-cr介導(dǎo)的耐藥僅對(duì)含哌嗪基氨基氮的環(huán)丙沙星和諾氟沙星才具有作用。Robicsek等[10]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶的變異基因aac(6＇)-Ib-cr編碼的滅活酶可引起較高水平的氟喹諾酮耐藥。

喹諾酮類藥物特異性外排泵基因qepA位于大腸桿菌質(zhì)粒pHPA，Yamane等[11]在分離大腸桿菌質(zhì)粒pHPA時(shí)發(fā)現(xiàn)了一種新的外排泵基因qepA。屬于主要易化超家族，它介導(dǎo)了對(duì)氟喹諾酮類、氨基糖苷類和廣譜 β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥。研究證實(shí)，攜帶qepA的菌株對(duì)環(huán)丙沙星和諾氟沙星的MIC分別提高了32倍和64倍。喹諾酮類藥物特異性外排泵基因qepAB，由大腸埃希菌的一種質(zhì)粒pOLA52編碼。oqxAB為多重藥物外排泵，它在介導(dǎo)氟喹諾類藥物耐藥的同時(shí)還介導(dǎo)對(duì)其他藥物(如氯霉素)的耐藥。對(duì)大腸埃希菌研究時(shí)發(fā)現(xiàn) oqxAB基因存在于43～115kb的可轉(zhuǎn)移質(zhì)粒中，攜帶該質(zhì)粒的大腸埃希菌對(duì)環(huán)丙沙星的MIC提高了16倍[12]。

1.2由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氨基糖苷類耐藥

“什么問(wèn)題？對(duì)不起，我已經(jīng)忘了?！痹胬溲源鸬?，轉(zhuǎn)身要走，張仲平急忙攔?。骸皠e啊，你可千萬(wàn)不能把你的問(wèn)題忘了，你一定得想起來(lái)，不然我會(huì)內(nèi)疚的，我會(huì)遺憾終身的?！?/p>

由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氨基糖苷類耐藥基因主要有氨基糖苷修飾酶基因(按功能可分成乙酰轉(zhuǎn)移酶(AAC)、磷酸轉(zhuǎn)移酶(APH)、核苷轉(zhuǎn)移酶(ANT)[舊稱腺苷轉(zhuǎn)移酶(AAD)]三類，目前已發(fā)現(xiàn)的有30余種。)、16S rRNA甲基化酶基因(編碼基因?yàn)閞mtA、rmtB、rmtC、rmtD和armA 基因)。盡管大腸桿菌氨基糖苷類耐藥普遍存在，但耐藥機(jī)制是不一樣的，林寧[13]等對(duì)多重耐藥的大腸桿菌研究表明，20株E.coli菌株中檢出rmtB 16S rRNA甲基化酶基因，aac(3)-II、aac(6′)-Ib和ant(3″)-I三種氨基糖苷類修飾酶基因，并以aac(3)-II和aac(6′)-Ib為主，可見(jiàn)其耐藥性主要由16S rRNA甲基化酶基因和乙酰轉(zhuǎn)移酶基因?yàn)橹鹘閷?dǎo)。而張晶[14]選取氨基糖苷類修飾酶的五種基因acc(6′)-Ib，acc(3)-Ⅳ，aadA，aphA，aph(2″)對(duì)7株耐藥菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增，但僅有aphA基因擴(kuò)增成功，所以初步斷定引起這幾株菌對(duì)氨基糖苷類抗生素耐藥的主要機(jī)制是aphA編碼的磷酸轉(zhuǎn)移酶的作用。由質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氨基糖苷類多重耐藥及轉(zhuǎn)移也普遍存在，陳燕杰等[15]用PCR和DNA測(cè)序方法檢測(cè)鴨源大腸桿菌多種氨基糖苷修飾酶基因和16S rRNA甲基化酶基因，通過(guò)質(zhì)粒接合試驗(yàn)分析其有關(guān)耐藥基因和耐藥性的質(zhì)粒接合傳遞特點(diǎn)，結(jié)果表明27株分離菌中的13株檢測(cè)到rmtB基因，6株同時(shí)檢測(cè)到rmtB和aac(3)-IV基因。質(zhì)粒接合試驗(yàn)獲得5株接合子，接合子對(duì)安普霉素、慶大霉素、阿米卡星和新霉素均高水平耐藥(MIC≥128μg/mL)，rmtB基因檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)。進(jìn)一步說(shuō)明大腸桿菌氨基糖苷類藥物耐藥和交叉耐藥十分嚴(yán)重，質(zhì)粒介導(dǎo)的rmtB基因和質(zhì)粒接合傳遞可能是其耐藥及其傳播擴(kuò)散的重要機(jī)制。

1.3由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌β-內(nèi)酰胺類耐藥

由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌β-內(nèi)酰胺類耐藥基因主要有ESBLs基因(包括TEM型、SHV型、非TEM型和非SHV型(包括CTX-M型和OXA型))和ampC基因(包括DHA-1型和ACT-1型)，ESBLs和ampC酶目前已成為介導(dǎo)革蘭氏陰性桿菌對(duì)廣譜β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的兩大類主要的β-內(nèi)酰胺酶。 張珍珍[16]等研究重慶地區(qū)動(dòng)物源大腸桿菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)及頭孢菌素酶(AmpC)基因型的分布，從臨床分離的192株仔豬白痢大腸桿菌、65株奶牛乳腺炎大腸桿菌、69株雞大腸桿菌中篩選出19株產(chǎn)ESBLs、6株產(chǎn)AmpC酶大腸桿菌，并應(yīng)用PCR擴(kuò)增及測(cè)序方法進(jìn)行ESBLs及AmpC基因型分析。結(jié)果顯示,重慶地區(qū)動(dòng)物源大腸桿菌攜帶TEM型、CTX-M型、DHA-1 型和CMY-2 型基因的陽(yáng)性率分別為2.15%、5.21%、0.61%和0.61%。其中,有5株同時(shí)攜帶2種基因。基因分型以TEM型和CTX-M型β-內(nèi)酰胺酶為主, 且產(chǎn)ESBLs與AmpC酶大腸桿菌為多重耐藥菌株。實(shí)驗(yàn)還證實(shí)，因TEM基因和CTX-M基因位于質(zhì)粒上，可以通過(guò)接合方式發(fā)生產(chǎn)酶基因的水平傳播，非β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性可以與β-內(nèi)酰胺耐藥表型發(fā)生共轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致多重耐藥。因此，盡管目前在獸醫(yī)臨床產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的檢出率不高，但提醒我們要加強(qiáng)對(duì)動(dòng)物源ESBLs產(chǎn)生菌的監(jiān)測(cè)，以減少對(duì)人類醫(yī)學(xué)造成的影響。

1.4由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氯霉素類耐藥

由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌氯霉素類耐藥基因主要有IntⅠ基因(Ⅰ型整合子整合酶基因),floR基因和cmlA基因等。鄭朝朝[17]對(duì)45株不同來(lái)源的大腸桿菌氯霉素類耐藥基因進(jìn)行了分析，結(jié)果從菌落及質(zhì)粒DNA中均擴(kuò)增出了IntⅠ基因，且兩者呈現(xiàn)良好的一致性；以菌落及質(zhì)粒DNA為模板擴(kuò)增出了floR基因和cmlA基因。從菌落和質(zhì)粒DNA中擴(kuò)增的同種基因堿基序列完全相同，floR基因與cmlA基因存在28.2%-28.4%同源性。通過(guò)連接、轉(zhuǎn)化構(gòu)建了基因工程菌,將含耐藥基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入了感受態(tài)細(xì)菌中，發(fā)現(xiàn)含耐藥基因的陽(yáng)性菌對(duì)氟苯尼考耐受程度明顯增強(qiáng)。George[18]等首次采用Maxicell方法證實(shí)了cmlA蛋白位于細(xì)菌內(nèi)膜，并通過(guò)主動(dòng)泵出使氯霉素在菌體內(nèi)的含量明顯減少?gòu)亩鴮?shí)現(xiàn)細(xì)菌耐藥。薛原[19]等通過(guò)對(duì)floR基因與cmlA基因進(jìn)行同源性分析以及對(duì)floR基因進(jìn)行進(jìn)化分析。2株豬源大腸桿菌(HZ19 與MZ6)floR基因的同源性為99.2%，與GenBank報(bào)道的牛源、雞源及水源(膠州灣)等大腸桿菌floR基因的同源性為98.8%-99.8%。在系統(tǒng)進(jìn)化分析中，HZ19與MZ6 不在同一群中。在黑龍江省受試養(yǎng)殖場(chǎng)的60株豬源大腸桿菌中，cmlA基因檢出的陽(yáng)性率為50%，floR基因檢出的陽(yáng)性率為80%。

1.5由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌四環(huán)素類耐藥

細(xì)菌對(duì)四環(huán)素類耐藥主要機(jī)制有四類：排出泵系統(tǒng)，核糖體保護(hù)因子的表達(dá),一種修飾或鈍化四環(huán)素的酶及一種未明機(jī)制，以前兩者為主。大腸桿菌四環(huán)素類耐藥主要通過(guò)耐藥質(zhì)?；蜣D(zhuǎn)座子介導(dǎo)并可傳遞，帶有耐藥質(zhì)粒的細(xì)菌對(duì)四環(huán)素類攝入減少或者泵出增加。而由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌四環(huán)素類耐藥基因主要有核糖體保護(hù)基因和外排泵基因(Tet基因)(Tet基因包括：TetM,TetO,TetS,TetB(P)，TetQ，TetT，TetU；OtrA等)。許瑞[20]對(duì)臨床分離的48株鴨大腸桿菌針對(duì)四環(huán)素、土霉素、多西環(huán)素、氟苯尼考、恩諾沙星、頭孢噻肟和阿米卡星共7種藥物進(jìn)行耐藥表型和tet基因的多重PCR檢測(cè)，以代表性tet基因組合的分離菌做供體菌，以利福平耐藥的大腸桿菌C600為受體菌，通過(guò)質(zhì)粒接合試驗(yàn)觀察tet基因和四環(huán)素類耐藥性的質(zhì)粒傳遞。結(jié)果表明48株分離菌全部對(duì)土霉素和四環(huán)素耐藥，耐藥率100%，36株對(duì)多西環(huán)素耐藥，耐藥率75%；并且以多重耐藥為主，鴨源大腸桿菌對(duì)四環(huán)素類的耐藥也存在四環(huán)素外排作用、核糖體保護(hù)兩種特異性機(jī)制。tet基因以三種組合(tetA+B+C)和四種組合(tetA+B+C+M)為主。4個(gè)tet基因可以同時(shí)或不同時(shí)通過(guò)質(zhì)粒接合在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移，使部分受體菌獲得對(duì)四環(huán)素類的耐藥性。四環(huán)素耐藥基因tetM和tetA可以分別由轉(zhuǎn)座子Tn916 和Tn1721及Tn21和整合子IntI一起在鴨大腸桿菌之間進(jìn)行質(zhì)粒-質(zhì)粒傳遞。

1.6由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌磺胺類耐藥

研究表明，由R質(zhì)粒介導(dǎo)的大腸桿菌磺胺類耐藥基因有3種，即su11、su12、su13基因，其編碼的二氫葉酸合成酶對(duì)磺胺類藥物產(chǎn)生抗性。張忠[21]等分析寧夏地區(qū)大腸桿菌臨床分離株對(duì)磺胺類藥物的耐藥性并PCR法檢測(cè)了其耐藥基因，結(jié)果表明，在162株大腸桿菌臨床分離株中，127株檢測(cè)出了耐藥基因，陽(yáng)性率為78.4%。其中，sul1基因的陽(yáng)性率最高，為65.4%，sul2，sul3基因的陽(yáng)性率分別為48.1%，1.9%；106株對(duì)磺胺類藥物的耐藥率為65.4%，耐藥菌株中有5株未檢測(cè)到sul1，sul2，sul3耐藥基因。藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果與基因檢測(cè)結(jié)果的符合率為95.3%。所以在臨床用藥中要根據(jù)藥敏結(jié)果實(shí)時(shí)調(diào)整用藥方案。

2大腸桿菌R質(zhì)粒的消除

大腸桿菌耐藥性的產(chǎn)生涉及多種機(jī)制，其中大腸桿菌耐藥性的增加與自身耐藥質(zhì)粒的產(chǎn)生有著密切的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)，R質(zhì)粒既可產(chǎn)生、傳遞，也可能因?yàn)樽陨磉z傳突變、某些理化因素，藥物處理而消除，這為控制細(xì)菌耐藥性提供了一些思路。

2.1理化因子如SDS對(duì)R質(zhì)粒的消除作用

宋坤研究表明[22]紫外線、反復(fù)凍融和SDS處理對(duì)5株I型整合子基因盒陽(yáng)性菌的質(zhì)粒消除率分別達(dá)到8%-12%，4%-8%和12%-20%，消除子耐藥譜結(jié)果顯示經(jīng)處理后5株細(xì)菌的質(zhì)粒全部被消除。對(duì)消除子的藥敏試驗(yàn)結(jié)果同處理前進(jìn)行比較,可發(fā)現(xiàn)細(xì)菌的耐藥譜發(fā)生不同程度的改變，能普遍消除PG,NOR,SXT,CIP,BOX，SM的耐藥性。而含卵黃抗體的高免全蛋粉和PH值的改變對(duì)細(xì)菌R質(zhì)粒的消除沒(méi)有影響。

2.2中藥對(duì)R質(zhì)粒消除作用

依靠自身突變消除質(zhì)粒的頻率大約是10-6～10-8，幾率很小。理化因素對(duì)質(zhì)粒的消除因其副作用太大，在臨床上難以應(yīng)用。中藥殘留少、抗菌及對(duì)耐藥質(zhì)粒的消除作用給人們提供了新的思路，多位學(xué)者用單味中藥提取物對(duì)耐藥質(zhì)粒進(jìn)行了消除實(shí)驗(yàn)，質(zhì)粒得到了不同程度的消除，鞠洪濤等[ 23]用中草藥艾葉的乙醇提取物和蒸餾提取物對(duì)大腸桿菌慶大霉素(GM)耐藥性及耐藥質(zhì)粒進(jìn)行了消除試驗(yàn), 結(jié)果艾葉乙醇提取物的消除率最高可達(dá)69.4%, 艾葉揮發(fā)油的消除率達(dá)16.67%。陳群等[24]以中藥黃連的提取物為質(zhì)粒消除劑, 用攜帶R質(zhì)粒的多重耐藥性大腸桿菌E.O102株為靶細(xì)菌, 進(jìn)行了體外R質(zhì)粒消除作用的實(shí)驗(yàn)研究, 經(jīng)黃連作用24h，R質(zhì)粒消除率為2.42%, 延長(zhǎng)作用時(shí)間至48h, 其消除率提高為22.57%。高迎春等用[28]地錦草提取物作用大腸桿菌前后，對(duì)氨基糖苷類藥物(慶大霉素、新霉素和大觀霉素)的敏感性發(fā)生了顯著的變化, 對(duì)環(huán)丙沙星敏感性也發(fā)生了變化，使部分耐藥大腸桿菌變?yōu)槊舾芯?。研究結(jié)果表明, 中藥配伍使用, 能夠明顯增強(qiáng)其消除R質(zhì)粒的作用?？得返萚25]用三黃片(主要成分為大黃、黃芩總苷、鹽酸黃連素)作為質(zhì)粒消除劑, 對(duì)大腸桿菌多重耐藥株質(zhì)粒消除率為31%, 起到抑制細(xì)菌耐藥性的作用。寧官保[26]等實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)黃芩、大黃、金銀花、黃連、連翹等五種中藥單劑和三黃湯、雙黃連兩種方劑對(duì)雞源大腸桿菌耐藥性均表現(xiàn)出不同程度的消除效果，且中藥方劑對(duì)大腸桿菌耐藥性的消除率高于單味中藥。質(zhì)粒圖譜分析結(jié)果表明，只有黃連和雙黃連能引起大腸桿菌質(zhì)粒譜型的改變，其他中藥作用后質(zhì)粒帶均無(wú)變化。這提示各味中藥對(duì)大腸桿菌的抑制機(jī)制并不相同。黃連和雙黃連造成大腸桿菌6 670bp和210bp兩條質(zhì)粒帶消失，推測(cè)雞大腸桿菌攜帶6 670bp和210bp的質(zhì)粒介導(dǎo)了對(duì)環(huán)丙沙星、恩諾沙星、氧氟沙星等耐藥性的產(chǎn)生。黃連和雙黃連可以通過(guò)消除耐藥質(zhì)?；虻霓k法提高對(duì)大腸桿菌耐藥性的清除率。黃芪、大黃、金銀花等中藥則可能通過(guò)其他途徑實(shí)現(xiàn)對(duì)大腸桿菌耐藥性的清除，這些途徑可能涉及整合子、轉(zhuǎn)座子、染色體等遺傳物質(zhì)的改變。

2.3噬菌體對(duì)大腸桿菌耐藥性的影響

噬菌體(bacteriophage)于1917年首次被發(fā)現(xiàn)，是指一類能特異性感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒總稱。許多雙鏈DNA噬菌體采用裂解酶和穿孔素-雙組分裂解系統(tǒng)，這兩種功能蛋白從宿主菌內(nèi)部裂解細(xì)菌并釋放子代噬菌體[27]。噬菌體在解決大腸桿菌耐藥性方面也是值得期待的，大腸桿菌λ噬菌體裂解酶不能穿過(guò)完整的細(xì)胞膜，需要依賴同源的穿孔素S105發(fā)揮裂解功能；但有些具有N--末端信號(hào)肽功能的多種裂解酶則不依賴于穿孔素的作用，可以通過(guò)自主運(yùn)輸緩慢裂解細(xì)菌細(xì)胞壁。呂萌[28]等分離得到1 株具有較強(qiáng)裂解能力的大腸桿菌噬菌體vB_EcoM-ep3。測(cè)序后發(fā)現(xiàn)其裂解酶基因與綠膿桿菌噬菌體裂解酶具有很高同源性。其編碼的裂解酶與檸檬酸配合使用，對(duì)大腸桿菌和綠膿桿菌均表現(xiàn)出較好的裂解能力，作用從2～24h持續(xù)有效，細(xì)菌數(shù)量分別下降7.2倍和17.3倍。該研究為解析裂解酶結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系提供了一個(gè)良好的例證，同時(shí)有助于開(kāi)發(fā)大腸桿菌噬菌體裂解酶的廣譜性改造。但胡彥明[29]等發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒的存在使細(xì)菌對(duì)某些噬菌體的感染產(chǎn)生抗性。其中有些抗性的產(chǎn)生是因?yàn)槭删w不再吸附到大腸桿菌細(xì)胞的表面,有些則是其他原因所致。因此，噬菌體在解決細(xì)菌耐藥性的同時(shí)，可能也會(huì)產(chǎn)生新的耐噬菌體菌株，而且噬菌體的抗菌譜，安全性等還有待進(jìn)一步深入研究。

3展望

大腸桿菌耐藥性呈多重耐藥現(xiàn)象，它的產(chǎn)生涉及到多種機(jī)制，其中大腸桿菌耐藥質(zhì)粒的產(chǎn)生與大腸桿菌耐藥性的增加關(guān)系密切。大腸桿菌攜帶的R質(zhì)?？蛇z傳，可在不同菌株、菌種間傳遞，使得耐藥性細(xì)菌持續(xù)增加、流行。對(duì)各菌株R質(zhì)粒耐藥譜型進(jìn)行分析，揭示大腸桿菌耐藥性與耐藥質(zhì)粒的關(guān)系，提供消除R質(zhì)粒的思路和方法，還原細(xì)菌對(duì)抗生素敏感性是目前研究的熱點(diǎn)。因此在深入研究其耐藥機(jī)制，研制新型抗菌藥物的同時(shí)更應(yīng)該嚴(yán)格掌握細(xì)菌的耐藥性特點(diǎn)，根據(jù)患病動(dòng)物(人)情況、藥敏結(jié)果等選擇抗菌藥物以及其劑量和療程，從而減少耐藥菌株的產(chǎn)生。相信隨著抗生素的少用、合理使用，加大抗耐藥性細(xì)菌感染藥物的研制力度，尤其對(duì)一些具有良好應(yīng)用基礎(chǔ)的中藥進(jìn)一步開(kāi)發(fā)，耐藥性細(xì)菌感染的世界難題可迎刃而解。

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The Drug Resistance and Elimination Mediated by R Plasmids fromEscherichiacoli

QIUMeizhen,DULifei,WANGHongbing,YANGJun,WANGHui,ZHOUWangping,HEPing

(Hunan Institute of Animal and Veterinary Science, Changsha 410131, Hunan, China)

Abstract：It is widespread on the drug resistance of bacteria, R plasmid is a major genetic factor mediating drug-resistant of E. coli. It is reviewed by the Drug Resistance and Elimination of R Plasmids from Escherichia coli.The aim of the paper is to provide reference for bacteria to restore their sensitivity to antibiotics.

Key words：R plasmid; E.coli; drug resistance; eliminate

文章編號(hào)：1007-7146(2015)06-0500-06

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

中圖分類號(hào)：S853.7

作者簡(jiǎn)介：邱美珍(1974-)，女，湖南婁底人，碩士，副研究員，主要從事微生物研究。(電話)0731-84620761；(電子郵箱)156278198@qq.com

基金項(xiàng)目：湖南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(湘農(nóng)業(yè)聯(lián)[2010]125號(hào))；湖南省自然科學(xué)基金 (12JJ3032)

收稿日期：2015-08-11;修回日期:2015-09-11

doi:10.3969/j.issn.1007-7146.2015.06.002