幾種豬瘟疫苗免疫效果對比研究

楊 群，韋啟鵬，周泉勇，唐艷強，萬明春，霍俊宏，劉林秀

（江西省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，江西南昌330200）

幾種豬瘟疫苗免疫效果對比研究

楊 群，韋啟鵬，周泉勇，唐艷強，萬明春，霍俊宏，劉林秀

（江西省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，江西南昌330200）

疫苗免疫是我國目前防控豬瘟最有效的手段，但是，我國如今豬瘟疫苗的生產(chǎn)廠家有幾十家，品種也多種多樣；因此，本文挑選目前市場占有率較高的兩種細胞苗和一種脾淋苗對同一批豬分四個組進行免疫試驗，隨后，檢測免疫當天及免疫后7天、14天、21天、28天、35天、42天試驗豬體內(nèi)的豬瘟抗體水平，從而了解免疫后一段時期內(nèi)豬體內(nèi)抗體水平的變化及比較不同疫苗之間的免疫效果。

豬瘟（Hog cholera，HC），又稱古典豬瘟（classical swine fever，CSF）是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性的病毒性傳染病。以發(fā)病急、高熱稽留、小血管壁變性、全身泛發(fā)性小點狀出血及脾梗死等為主要特征。豬是豬瘟病毒的唯一自然宿主，傳染源主要來自病豬，而病后帶毒豬、潛伏期帶毒豬和隱性感染豬也均可成為傳染源。

在豬瘟的防制中，疫苗扮演著重要的角色，疫苗目前仍然是有利的武器，剔除豬只自身的原因，疫苗本身的效價高低是決定豬瘟免疫成敗的關鍵。低效價的疫苗免疫后豬體產(chǎn)生的抗體不足以抵抗野毒的侵襲，接種豬雖不發(fā)病，但成為終生帶毒、排毒的傳染源，給凈化豬群造成極大障礙，也是近年來溫和型、非典型豬瘟頻發(fā)的原因之一。所以目前許多豬場在豬瘟的防疫中，都往往采用加大免疫劑量來解決這一不足。目前市場上的豬瘟商品疫苗種類主要有細胞苗、組織苗和脾淋苗三種，不同疫苗種類及不同生產(chǎn)廠家之間的免疫效果也有差異，因此，在疫苗種類的選擇上也與豬瘟免疫效果密切相關。為了驗證不同廠家豬瘟苗的免疫效果，本人通過用不同廠家生產(chǎn)的三種疫苗免疫同一批豬后用ELISA方法檢測不同時間豬體內(nèi)豬瘟抗體水平來比較彼此間的差異。

1 試驗材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 豬瘟疫苗

豬瘟細胞苗A（江西某生物制品廠，批號：20130511），簡稱A苗；豬瘟細胞苗B（廣東某生物制品廠，批號：20130618），簡稱B苗；豬瘟脾淋苗（福州某生物制品廠，批號：20130408），簡稱C苗；免疫增強劑（福州某生物制品廠，批號：201304015）。

1.1.2 試驗豬

在江西省農(nóng)業(yè)科學院試驗豬場選擇產(chǎn)仔日期相同4頭母豬，每窩各隨機挑選6頭仔豬，分為4個試驗組，共計24頭，每頭豬都按順序打上耳標，便于以后采血和記錄時區(qū)分不同豬只；4頭母豬都實行每年注射兩次豬瘟疫苗的統(tǒng)一免疫方式，劑量是每頭細胞苗8頭份。

1.1.3 檢測試劑

豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒，由美國IDEXX公司生產(chǎn)。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗豬分組與免疫

將24頭仔豬分為4組，每頭豬在耳標上標上號碼，所有試驗豬都在45日齡（2013年8月20日）首免，試驗1組注射C苗1頭份，豬的耳標為1～6號；試驗2組注射A苗4頭份，豬的耳標為7～12號；試驗3組注射C苗1頭份+免疫增強劑0.5頭份，豬的耳標為13～18號；試驗4組注射B苗4頭份，豬的耳標為19～24號。從試驗當天起每隔1周對試驗豬采血1次，即從免疫當天及免疫后7天、14天、21天、28天、35天、42天各檢測1次豬血清中豬瘟抗體，試驗時間從2013年8月20日開始，至2013年10月11日結束，共計42天。

1.2.2 被檢血清采集

每次早晨用5毫升注射器對試驗豬空腹進行前腔靜脈采血，每頭3～5毫升，將血樣注入5毫升無菌真空采血管，采完后立即帶回所獸醫(yī)診斷實驗室進行血清分離；分離方法就是將所采集的血樣置37℃恒溫箱中溫浴30分鐘，再經(jīng)每分鐘轉2000圈離心5分鐘，靜置后分離上層血清于0.5毫升EP管，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 血清抗體檢測

按試劑盒說明書進行操作；檢測結果用阻斷率表示，阻斷率大于或等于40％判斷為陽性，阻斷率小于30％判斷為陰性，阻斷率在30％至40％之間判斷為可疑。

2 結果與分析

對4個試驗處理組進行方差分析，結果F值=1.32，進行F檢驗，查F值表，F(xiàn)0.05（3，20）= 3.10，F(xiàn)0.01（3，20）=4.94；F值≥F0.05，表明四個試驗組在21天抗體水平差異不顯著。

對4個試驗處理組進行方差分析，結果F值=2.29，進行F檢驗，查F值表，F(xiàn)0.05（3，20）= 3.10，F(xiàn)0.01（3，20）=4.94；所以F值≥F0.05，表明四個試驗組在42天抗體水平差異不顯著。

3 小結與分析

3.1 各個試驗組仔豬在注射豬瘟疫苗后，豬瘟抗體水平都呈現(xiàn)出先下降后上升的趨勢，這與豬瘟抗體水平消長規(guī)律的理論一致，縱觀仔豬首免日齡的抗體水平檢測數(shù)據(jù)，可以發(fā)現(xiàn)其離散度很大，（抗體水平最高為80.1％，最低為20.0％）均勻度很差，造成這種現(xiàn)象的原因可能是接種時母源抗體過高，也可能是仔豬本身的免疫抑制。

3.2 4個試驗組內(nèi)，試驗1組、試驗2組、試驗4組的抗體水平至免疫5周后達頂峰，而后下降；而試驗3組免疫至首免后50天一直呈現(xiàn)上升趨勢。其原因可能是疫苗與免疫增強劑共同作用可以緩解母源抗體對疫苗抗原的中和效應，另一方面推斷可能是兔體脾淋成份對記憶性免疫應答的促進作用。

3.3 對4組仔豬21日齡及42日齡抗體平均值進行方差分析，發(fā)現(xiàn)各處理組間差異不顯著，這與沈意興等報道的有所不同，其原因有待以后進一步分析，但是，試驗1組和試驗3組的抗體保護率（抗體檢測值≥40％）明顯高于其他兩組的結果與他們的報道相符合；究其原因，可能是脾淋苗中的兔脾淋組織液含有某些免疫增強因子，能夠明顯增強活疫苗的免疫作用。