一例豬偽狂犬病的診治

吳文陽 福建省廈門市同安區(qū)汀溪鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心 361100

豬偽狂犬病（Porcine Pseudorabies，PR）是由豬偽狂犬病病毒 （Porcine Pseudorabies Virus，PRV）引起的一種傳染病，主要表現(xiàn)妊娠母豬產(chǎn)死胎、木乃伊胎和流產(chǎn)以及新生仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、嘔吐、腹瀉等癥狀。偽狂犬的凈化工作在國外已經(jīng)取得很好的效果，美洲和部分歐洲國家已經(jīng)消滅該病。我國自20世紀(jì)70年代開始引進Bartha-K61株，疫情一度得到較好的控制，且有些規(guī)?；呢i場已逐步凈化該病。近年來，豬偽狂犬病卷土重來，給養(yǎng)殖戶造成了較大的經(jīng)濟損失，已被視為最嚴重的疫病之一。2015年3月下旬，廈門市某豬場先后出現(xiàn)妊娠母豬流產(chǎn)及新生仔豬口吐白沫、體溫升高等癥狀。根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化和實驗室檢查，確診為豬偽狂犬病。

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

該豬場飼養(yǎng)母豬230余頭，公豬5頭。2015年3月19日下午9頭妊娠母豬突然流產(chǎn)，20日上午2窩新生仔豬出現(xiàn)口吐白沫，體溫升高至41℃，精神沉郁、食欲不振、咳嗽、呼吸急促、站立不穩(wěn)、頭往后仰、四肢劃動等癥狀，新生豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的病死率近80%，經(jīng)抗生素治療后效果不顯著，疫情仍然得不到控制。

2 剖檢病變

剖檢5頭新生豬，扁桃體肉眼可見充血、水腫、壞死，腎臟有點狀出血，腸系膜淋巴結(jié)、下頜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)均有充血、腫大，肝臟表面出現(xiàn)壞死灶，腦部有充血現(xiàn)象，其他臟器未見明顯變化。

3 實驗室檢查

將病料送福建省農(nóng)科院進行檢測，采用PCR或RT-PCR方法對豬偽狂犬病病毒、豬圓環(huán)病毒、豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒進行檢測。

3.1 病料采集 淋巴結(jié)、肝臟、腎臟分別采自4頭發(fā)病的哺乳仔豬。

3.2 病料處理 取4份病死豬的淋巴結(jié)、肝臟、腎臟，分別剪碎并在液氮中迅速研磨，用PBS溶液以1∶10進行稀釋，研磨后的勻漿分別倒入4管5 mL無菌收集管中，做好標(biāo)記，凍存于-70℃冰箱中。

3.3 核酸的提取及PCR和RT-PCR檢測 將研磨好的4份病料于-70℃和室溫之間凍融3次，12 000 r/min離心15 min，吸取200μL上清液，根據(jù)生工生物工程（上海）股份有限公司提供的Ezup柱式病毒核酸抽提試劑盒說明書提取核酸。反轉(zhuǎn)錄體系 Tota1RNA 4 μL、5×TransScriptTM A11-in-One SuperMix for PCR 4 μL、Rnase-free Water 12 μL，反應(yīng)條件：25 ℃ 10 min，42 ℃ 30 min，85 ℃ 5 min。

PCR反應(yīng)體系：Premix Taq 10?L，上下游引物各1μL，cDNA模版3μL，無菌去離子水5μL，混勻后進行擴增，擴增條件為：95℃預(yù)變性5 min，95 ℃變性 30 s，50～55 ℃復(fù)性 30 s，72 ℃延伸 30 s，35個循環(huán)；72℃終延伸7 min。1%瓊脂糖凝膠電泳觀察結(jié)果。

4份病料PCR及RT-PCR檢測結(jié)果表明，豬偽狂犬病病毒均為陽性，豬圓環(huán)病毒、豬瘟病毒和豬繁殖與呼吸綜合癥病毒均為陰性，

4 診 斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變和實驗室檢查結(jié)果確診為豬偽狂犬病。

5 綜合防治

1）對全場母豬和哺乳仔豬緊急接種某進口的偽狂犬病基因缺失疫苗，同時加強飼養(yǎng)管理，7 d后，疫情得到較好控制。

2）對于該病要做到“防重于治”，可以從以下幾個方面著手。首先，豬場應(yīng)做好生物安全措施，保持圈舍的干燥整潔，定期開展消毒等常規(guī)工作。工作人員進入豬場要穿工作服工作鞋，圈舍門口消毒池經(jīng)常更換不同的消毒藥水，謹防耐藥和失效，豬舍用具定期消毒，做好滅鼠滅貓工作。其次，做好疫苗免疫接種，根據(jù)自場情況制定一套符合自場的免疫程序。建議全場母豬一年免疫4次，保證母源抗體對哺乳仔豬的被動免疫。小豬在40～50日齡免疫，若偽狂犬病壓力較大的豬場，哺乳小豬可以選擇出生時增加滴鼻免疫1次。最后，有條件的話，最好在種豬群中開展偽狂犬病凈化工作，及時淘汰陽性豬群。對于新進種豬，則要進行偽狂犬野毒抗體檢測，確保引進偽狂犬野毒為陰性的種豬。

6 體 會

1）該場暴發(fā)豬偽狂犬病主要原因可能有以下幾點，一是當(dāng)前國內(nèi)流行變異偽狂犬病毒，造成豬場對偽狂犬病毒的防控壓力增大；二是該場飼養(yǎng)管理等技術(shù)比較薄弱，環(huán)境消毒不到位，忽視滅鼠滅貓工作；三是該場疫苗免疫比較混亂，疫苗免疫程序不夠合理，種豬尤其是后備母豬免疫沒有到位，同時也未進行疫苗免疫抗體檢測，不知疫苗免疫效果。四是該場從未開展過偽狂犬病的凈化工作，估計種豬攜帶偽狂犬病毒比較嚴重。

2）我省是豬偽狂犬病疫區(qū)，此類病案時有發(fā)生，給廣大養(yǎng)殖戶帶來較大的經(jīng)濟損失。為此，宣傳和普及科學(xué)預(yù)防豬偽狂犬病具有現(xiàn)實意義。