深圳地區(qū)三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院銅綠假單胞菌感染分布及耐藥性分析

施俊柱，劉愛勝，文 艷

(1.深圳市龍華新區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518110；2.深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518109；3.深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院ICU，廣東 深圳 518106)

深圳地區(qū)三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院銅綠假單胞菌感染分布及耐藥性分析

施俊柱1，劉愛勝2，文 艷3

(1.深圳市龍華新區(qū)中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518110；2.深圳市龍華新區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518109；3.深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院ICU，廣東 深圳 518106)

目的 了解深圳市龍華新區(qū)和光明新區(qū)三家三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院銅綠假單胞菌感染分布及耐藥性，為科學(xué)用藥提供依據(jù)。方法收集2013年6月至2014年11月三家三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院各科住院臨床標(biāo)本共3176份，采用VITEK-32細(xì)菌鑒定儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定，藥敏試驗(yàn)采用K-B法和微量肉湯稀釋法(MIC法)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果3176份標(biāo)本中銅綠假單胞菌總分離率為51.16%(1625/3176)，其中痰液標(biāo)本為52.8%(858/1625)，其次為支氣管肺泡灌洗液和膿液，分別為20.1%(327/1625)和16.7%(271/1625)；ICU、神經(jīng)外科和心胸外科銅綠假單胞菌分離率分別為41.6%(676/1625)、15.9%(259/1625)和19.1%(310/1625)；碳青霉烯類敏感、耐碳青霉烯類及泛耐藥銅綠假單胞菌分離率分別為67.1%(1090/1625)、31.6%(514/1625)和1.29%(21/1625)；耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌對(duì)臨床常用的15種抗菌藥除了多黏菌素B外均比碳青霉烯類敏感的要嚴(yán)重，耐藥率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.617～80.654，P＜0.05)，2例耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌對(duì)多黏菌素B出現(xiàn)耐藥，除對(duì)阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素有較高的敏感性外，其余11種抗菌藥物的耐藥率均＞60%以上。結(jié)論銅綠假單胞菌分離率較高，主要來自呼吸道標(biāo)本和ICU病區(qū)；耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌耐藥性比碳青霉烯敏感的要嚴(yán)重，應(yīng)采取有效的預(yù)防及合理使用抗菌藥措施，杜絕耐碳青霉烯類和泛耐藥銅綠假單胞菌的蔓延。

銅綠假單胞菌；分離率；分布；耐藥性

銅綠假單胞菌分布廣泛，為院內(nèi)感染重要的條件致病菌，其分離率逐年上升。同時(shí)隨著碳青霉烯類抗菌藥的廣泛濫用，耐碳青霉烯銅綠假單胞菌逐漸增多，給臨床治療帶來嚴(yán)重挑戰(zhàn)[1-3]。為掌握其感染臨床標(biāo)本和病區(qū)分布及耐藥性，本研究分析了2013年6月至2014年11月深圳地區(qū)三家三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院感染的銅綠假單胞菌的臨床標(biāo)本、科室分布及銅綠假單胞菌對(duì)15種抗菌藥的耐藥情況，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集2013年6月至2014年11月深圳市龍華新區(qū)和光明新區(qū)三家三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院各科住院臨床標(biāo)本共3176份，剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗(yàn) 細(xì)菌培養(yǎng)按常規(guī)方法進(jìn)行；細(xì)菌鑒定使用法國(guó)梅里埃公司VITEK-32細(xì)菌鑒定儀與配套的NFC卡進(jìn)行鑒定；藥敏采用K-B法和微量肉湯稀釋法(MIC法)進(jìn)行，結(jié)果判讀及解釋參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》及CLSI2011版[4]，并定期做藥敏質(zhì)控。所有操作均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3 儀器與試劑 藥片由英國(guó)Oxoid公司提供；M-H平板由廣州迪景微生物科技公司提供；質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853由衛(wèi)生部臨檢中心提供；VITEK-32細(xì)菌鑒定儀與配套的NFC卡由法國(guó)生物梅里埃公司提供。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用WHONET5.4軟件進(jìn)行細(xì)菌耐藥性分析，應(yīng)用SPSS19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料組間差異性比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同標(biāo)本和不同病區(qū)銅綠假單胞菌檢出率情況 銅綠假單胞菌檢出率最高的是痰液標(biāo)本為52.8%，其次是支氣管肺泡灌洗液和膿液，分別為20.1%和16.7%，膽汁最低為0.7%。檢出率最高的是ICU為41.6%，其次是心胸外科和神經(jīng)外科，分別為19.1%和15.9%，燒傷科最低為1.4%，見表1。

表1 不同標(biāo)本銅綠假單胞菌感染分布(n=1625)

2.2 分離率 1625株銅綠假單胞菌中耐碳青霉烯類分離率為31.6%(514/1625)；泛耐藥銅綠假單胞菌分離率為1.29%(21/1625)；碳青霉烯類敏感銅綠假單胞菌分離率為67.1%(1090/1625)。

2.3 藥敏試驗(yàn) 1604株銅綠假單胞菌(除21例泛耐藥)中耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌的耐藥性比碳青霉烯類敏感的嚴(yán)重，除多黏菌素B外兩者耐藥率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.617～80.654，P＜0.05)，2例耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌對(duì)多黏菌素B耐藥，此外除阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素有較高的敏感性外，其余11種抗菌藥物的耐藥率均＞60%以上，見表2。

表2 1604株銅綠假單胞菌對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物的耐藥率(%)

3 討 論

銅綠假單胞菌是院內(nèi)感染常見的一種條件致病菌，在醫(yī)院分離出的革蘭氏陰性桿菌中，其分離率僅次于大腸埃希菌，占第2位[5]。本研究結(jié)果顯示，深圳三家三級(jí)區(qū)屬醫(yī)院銅綠假單胞菌總分離率為51.16% (1625/3176)，其中來自呼吸道標(biāo)本為72.9%，與國(guó)內(nèi)報(bào)道一致[1]，這可能與銅綠假單胞菌含有多糖莢膜，它不僅能抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬，還能使細(xì)菌易依附于細(xì)胞表面，特別是囊性纖維化和慢性呼吸道疾病患者的細(xì)胞表面等有關(guān)[6]。本研究結(jié)果顯示，銅綠假單胞菌感染主要分布在ICU、心胸外科和神經(jīng)外科，分別占41.6%(676/1625)、15.9%(259/1625)和19.1% (310/1625)，與國(guó)內(nèi)大多數(shù)報(bào)道一致，這可能與侵入操作是銅綠假單胞菌感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素有關(guān)。ICU、心胸外科和神經(jīng)外科患者往往有基礎(chǔ)疾病，免疫力低下，并伴有器官功能障礙，需長(zhǎng)期侵入性操作(如吸氧、氣管插管、氣管切開、鼻飼及機(jī)械通氣)以及銅綠假單胞菌有較強(qiáng)的抵抗力，可廣泛依附于人體皮膚或醫(yī)療器械，大量定植在患者身上，從而易造成感染。

碳青霉烯類抗菌藥是銅綠假單胞菌抗菌活性最強(qiáng)的藥物之一，是治療銅綠假單胞感染的首選。但隨著碳青霉烯類抗菌藥的廣泛濫用，耐碳青霉烯類和泛耐藥銅綠假單胞菌逐漸增多，給臨床治療帶來極大困難。本研究結(jié)果顯示，耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌分離率為31.6%(514/1625)，高于報(bào)道的28.6%[7-9]，泛耐藥銅綠假單胞菌分離率為1.29%(21/1625)，高于莫善穎等[3]報(bào)道的0.3%，這可能與不同地區(qū)醫(yī)生對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物使用習(xí)慣不同有關(guān)。因此，加強(qiáng)藥敏試驗(yàn)監(jiān)測(cè)，統(tǒng)一科學(xué)合理用藥對(duì)預(yù)防耐碳青霉烯類和泛耐藥銅綠假單胞菌產(chǎn)生有重要臨床意義。

本研究結(jié)果顯示，耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌對(duì)臨床常用的15種抗菌藥除了多黏菌素B外比碳青霉烯類敏感的要嚴(yán)重得多，耐藥率之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.617～80.654，P＜0.05)。其中，碳青霉烯類敏感的耐藥率均＜26.0%，最高的為氨曲南(25.6%)，其次為頭孢噻肟(15.9%)和哌拉西林(12.8%)，其余12種抗菌藥物耐藥率均＜12.0%。耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌對(duì)除多黏菌素B、慶大霉素、阿米卡星和妥布霉素外其他11種抗生素均出現(xiàn)嚴(yán)重的耐藥，耐藥率均＞60%以上，最高的是羅美培南(98.4%)，其次為亞胺培南(97.5%)，這可能與其臨床上廣泛使用導(dǎo)致OprD的缺失或降低有關(guān)[10]。頭孢他啶在兩組中的耐藥率相對(duì)較低，這與其對(duì)銅綠假單胞菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶比較穩(wěn)定有關(guān)。氨曲南在兩組中的耐藥率分別為25.6%和93.8%，這與氨曲南不誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，且對(duì)大多數(shù)β-內(nèi)酰胺酶高度穩(wěn)定有關(guān)。氨基糖苷類藥物如慶大霉素、阿米卡星、妥布霉素在兩組中的耐藥率均＜11.0%，這與其具有耳和腎毒性、臨床少用有關(guān)。兩組對(duì)多黏菌素B只有2例耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌出現(xiàn)耐藥，這與其對(duì)人體具有腎毒性和神經(jīng)毒性，臨床上少用有關(guān)[11-12]。因此，加強(qiáng)臨床上合理科學(xué)用藥，杜絕耐碳青霉烯類和泛耐藥銅綠假單胞菌產(chǎn)生，同時(shí)還要加強(qiáng)新藥研發(fā)的力度。

銅綠假單胞菌是醫(yī)內(nèi)感染常見的一種條件致病菌，這與其生長(zhǎng)繁殖所需條件低、抵抗力強(qiáng)、定植范圍廣、致病力強(qiáng)及感染難控制等特點(diǎn)有關(guān)[13]，醫(yī)院應(yīng)引起重視。預(yù)防院內(nèi)銅綠假單胞菌感染最為關(guān)鍵，尤其銅綠假單胞菌的高發(fā)科室，更應(yīng)加強(qiáng)醫(yī)療器械的消毒、滅菌、感染者的隔離及交叉感染等各個(gè)環(huán)節(jié)，杜絕院內(nèi)感染。

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Distribution of Pseudomonas aeruginosa infection and drug resistance analysis in third district hospitals in Shenzhen.

SHI Jun-zhu1,LIU Ai-sheng2,WEN Yan3.1.Department of Clinical Laboratory,Shenzhen Longhua New District Central Hospital,Shenzhen518110,Guangdong,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,Shenzhen Longhua New District People's Hospital,Shenzhen518109,Guangdong,CHINA;3.ICU,Shenzhen Guangming New District People's Hospital,Shenzhen518106,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the distribution ofPseudomonas aeruginosainfection and drug resistance in three hospitals in Longhua New District and Guangming New District of Shenzhen in order to provide the basis for scientific and medical treatment.MethodsA total of3176 clinical specimens were collected from June2013 to November2014 in the three hospitals.VITEK-32 bacteria identification analyzer system was used for bacteria identification.K-B method and broth dilution method(minimum inhibitory concentration,MIC)were applied for drug sensitive test.ResultsAmong the3176 specimens,1625 strains ofPseudomonas aeruginosawere separated,and the total separation rate ofPseudomonas aeruginosawas51.16%(1625/3176),including52.8%(858/1625)sputum specimens, followed by bronchoalveolar lavage[20.1%(327/1625)]and pus[16.7%(271/1625)].The separation rate ofPseudomonas aeruginosaisolated from ICU,neurosurgery and thoracic surgeons were41.6%(676/1625),15.9%(259/1625)and19.1%(310/1625),respectively.ThePseudomonas aeruginosasensitive to carbapenems,resistant to carbapenems, and those with extensive drug resistance isolated accounted for67.1%(1090/1625),31.6%(514/1625)and1.29% (21/1625),respectively.ThePseudomonas aeruginosaresistant to carbapenems were more sensitive to15 clinical commonly used antimicrobials thanPseudomonas aeruginosasensitive to carbapenems,in addition to polymyxin B,and the differences were statistically significant(χ2=12.617～80.654,P＜0.05).Two cases of pseudomonas aeruginosa resistant to carbapenems were found resistant to polymyxin B,and they were highly resistant to the11 kinds of antimicrobial drugs (＞60%)in addition to amikacin,gentamycin,tobramycin.ConclusionThe separation rate ofPseudomonas aeruginosais high,and the strains are mainly isolated from respiratory tract specimens and ICU ward.The drug resistance in carbapenems-resistantPseudomonas aeruginosais more serious than that in carbapenems-sensitivePseudomonas aeruginosa. Effective measures should be taken for prevention and rational use of antibacterial drugs,and to avoid the spread of carbapenems-sensitivePseudomonas aeruginosaand the strains with extensive drug resistance.

Pseudomonas aeruginosa;Separation rate;Distribution;Drug resistance

R378.99+1

A

1003—6350（2015）16—2397—03

2015-02-06)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.16.0864

深圳市龍華新區(qū)科技創(chuàng)新資金項(xiàng)目(編號(hào)：2013136)

施俊柱。E-mail：curious1997@163.com