雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群、血清及腸黏膜中細(xì)胞因子含量的影響

候兵

(成都市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 成都 610041)

雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群、血清及腸黏膜中細(xì)胞因子含量的影響

候兵

(成都市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 成都 610041)

目的 分析雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群、血清及腸黏膜中細(xì)胞因子含量的影響。方法選擇于2012年10月至2014年10月間在本院接受住院治療的潰瘍性結(jié)腸炎患者82例作為研究對象，按照隨機數(shù)表法將所有入組患者分為接受柳氮磺胺吡啶治療的對照組和接受雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療的觀察組，每組各41例。比較兩組患者的腸道菌群、血清及腸黏膜中細(xì)胞因子含量的差異。結(jié)果(1)觀察組患者接受治療后的腸球菌、乳酸菌及雙歧桿菌數(shù)量均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；(2)觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)水平均低于對照組，白細(xì)胞介素10(IL-10)水平高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；(3)觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜超氧化物歧化酶(SOD)水平高于對照組，丙二醛(MDA)水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶可以有效優(yōu)化潰瘍性結(jié)腸炎患者的腸道菌群數(shù)量，抑制腸道炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)，降低疾病活動度。

潰瘍性結(jié)腸炎；雙歧桿菌；柳氮磺胺吡啶

潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)為多因素作用下、病因尚不明確的慢性非特異性結(jié)腸炎癥性疾病，臨床治療較為棘手。UC已經(jīng)嚴(yán)重影響患者正常的生活及工作，且有惡變可能性，需積極治療[1]。柳氮磺吡啶是臨床治療UC的最主要藥物，其療效確切但是不良反應(yīng)也較大。雙歧桿菌是人體腸道正常菌群之一，具有抗感染、促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)吸收、調(diào)節(jié)免疫功能等綜合作用，UC患者存在腸道益生菌與致病菌比例失衡，加入外源性益生菌制劑有望成為改善UC患者病情的途徑之一[2-3]。本次研究主要分析雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療對潰瘍性結(jié)腸炎患者腸道菌群、血清及腸黏膜中細(xì)胞因子含量的影響，具體報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇于2012年10月至2014年10月間在本院接受住院治療的潰瘍性結(jié)腸炎患者82例作為研究對象，按照隨機數(shù)表法將所有入組患者分為接受柳氮磺胺吡啶治療的對照組和接受雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療的觀察組，每組各41例。觀察組患者中男性23例，女性18例，年齡32～72歲，平均(45.28±9.33)歲，病程3～11年，平均(6.32±0.75)年；對照組患者中男性24例，女性17例，年齡30～71歲，平均(43.76±8.26)歲，病程4～10年，平均(6.53±0.81)年。兩組患者的基線資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法 觀察組患者接受雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶治療，柳氮磺吡啶腸溶片1.0 g口服，4次/d，雙歧桿菌膠囊0.63 g口服，3次/d，均為飯后服用，兩藥服用時間間隔為2 h，連續(xù)服用2個月。對照組患者單純接受柳氮磺胺吡啶治療，具體方法及時間同觀察組。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 腸道菌群 患者接受治療前后，均采集0.5 g新鮮大便標(biāo)本10倍連續(xù)稀釋。滴注法接種于選擇培養(yǎng)基上，選擇具有代表性的腸球菌、乳酸菌及雙歧桿菌作為觀察菌群，計算每克糞便濕重內(nèi)菌群CFU的對數(shù)值(IgCFU/g)。

1.3.2 炎癥因子 治療后抽取患者外周靜脈血5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平。

1.3.3 超氧化物歧化酶及丙二醛 治療后抽取患者外周靜脈血5 ml，采用亞硝酸鹽法檢測血清超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0軟件對本組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腸道菌群 治療前兩組患者腸道菌群比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，觀察組患者接受治療后的腸球菌、乳酸菌及雙歧桿菌數(shù)量均明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者治療前后的腸道菌群檢測結(jié)果比較(IgCFU/g，±s)

組別 治療前 治療后腸球菌 乳酸桿菌 雙歧桿菌 腸球菌 乳酸桿菌 雙歧桿菌觀察組對照組t值P值7.04±0.89 6.98±0.87 0.385＞0.05 5.87±1.03 5.76±0.95 0.285＞0.05 6.03±0.96 5.99±1.02 0.338＞0.05 7.53±1.16 6.86±0.95 6.291＜0.05 7.25±0.92 6.53±0.81 7.395＜0.05 7.37±1.18 6.59±1.07 6.496＜0.05

2.2 炎癥因子 觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜中TNF-α、IL-6水平低于對照組，IL-10水平高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組患者治療后的血清及腸黏膜中炎癥因子水平比較(ng/L，±s)

表2 兩組患者治療后的血清及腸黏膜中炎癥因子水平比較(ng/L，±s)

組別 血清腸黏膜觀察組對照組t值P值TNF-α21.03±2.17 26.52±3.05 5.483＜0.05 IL-6 20.18±2.25 33.63±6.17 7.274＜0.05 IL-10 69.35±7.25 55.62±5.16 7.038＜0.05 TNF-α12.11±2.35 18.63±3.28 6.204＜0.05 IL-6 9.16±2.17 15.83±6.32 7.285＜0.05 IL-10 26.36±7.75 12.29±5.53 8.385＜0.05

2.3 超氧化物歧化酶及丙二醛 觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜SOD水平高于對照組，MDA水平低于對照組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組患者治療后的血清及腸黏膜中超氧化物歧化酶及丙二醛水平比較(±s)

表3 兩組患者治療后的血清及腸黏膜中超氧化物歧化酶及丙二醛水平比較(±s)

組別腸黏膜觀察組對照組t值P值血清SOD(U/ml) 1.43±0.18 1.30±0.16 5.839＜0.05 MDA(mmol/L) 5.93±0.47 6.67±0.58 7.193＜0.05 SOD(U/ml) 1.07±0.15 0.76±0.11 5.395＜0.05 MDA(mmol/L) 3.85±0.29 5.12±0.43 7.049＜0.05

3 討論

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)是一種慢性非特異性結(jié)腸炎癥性疾病，由多因素作用所致，包括自身基因易感性、腸道菌群失衡、自身免疫失衡等。UC治療的傳統(tǒng)藥物包括柳氮磺胺類、類固醇激素、免疫抑制劑，雖然可以取得確切療效但是長期應(yīng)用可出現(xiàn)諸多并發(fā)癥且治療效果降低[4]。益生菌制劑是目前受到廣泛關(guān)注的UC治療輔助藥物，其中以雙歧桿菌最為常見。雙歧桿菌作為哺乳動物腸道的正常菌群，具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗感染、促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化等正常作用。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)端回腸和結(jié)腸的細(xì)菌高密度區(qū)域恰好是UC患者炎癥高發(fā)部位，提示體內(nèi)菌群紊亂可能是導(dǎo)致UC發(fā)病的原因之一，也表明調(diào)節(jié)機體正常菌群平衡可能成為治療UC的有效手段[5-6]。

UC患者腸道內(nèi)環(huán)境紊亂，益生菌與致病菌比例失衡，嗜酸乳桿菌及雙歧桿菌等有益菌群比例降低，腸黏膜屏障功能低下，進(jìn)一步加重UC病情及治療難度[7]。相關(guān)研究顯示雙歧桿菌應(yīng)用可以緩解患者腸道癥狀，減輕腸黏膜的損害，此次研究亦在柳氮磺吡啶之外加用雙歧桿菌以觀察患者的腸道變化[8]。上述研究對兩組患者的腸道菌群情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示觀察組患者接受治療后的腸球菌、乳酸菌及雙歧桿菌數(shù)量均明顯高于對照組患者，提示雙歧桿菌使用后有助于糾正腸道益生菌與致病菌的比例，進(jìn)一步抑制致病菌繁殖，促使患者腸道恢復(fù)菌群正常動態(tài)平衡[9]。

Danese等[10]的研究發(fā)現(xiàn)小鼠UC早期應(yīng)用雙歧桿菌，可以降低炎癥細(xì)胞因子TNF-α的表達(dá)；Baert等[11]在研究UC患者的腸道炎癥水平時發(fā)現(xiàn)，益生菌比例的增高有助于降低腸道炎癥活動度。益生菌對UC患者的治療價值不僅體現(xiàn)于腸道菌群狀態(tài)的平衡調(diào)節(jié)，還可以影響患者的腸道黏膜通透性進(jìn)而改變機體炎癥水平。本研究對兩組患者的治療后血清及腸黏膜炎癥因子水平進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示：觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜中TNF-α、IL-6水平低于對照組，IL-10水平高于對照組患者。TNF-α、IL-6為促炎因子，IL-10為抗炎細(xì)胞因子，炎性細(xì)胞浸潤可以進(jìn)一步損傷黏膜、加重UC病情，上述結(jié)果提示雙歧桿菌對炎癥反應(yīng)生物學(xué)上下游均有明顯的抑制作用，可以減輕腸道及全身炎癥反應(yīng)[12]。

氧化/抗氧化平衡也是UC病情進(jìn)展及復(fù)發(fā)的關(guān)鍵因素，在UC患者結(jié)腸黏膜中氧化應(yīng)激水平大幅提高，抗氧化物質(zhì)的水平相應(yīng)降低，氧化/抗氧化平衡被打破[13]。已經(jīng)有研究顯示嗜酸乳桿菌胞壁粗提物可以有效阻止UC小鼠結(jié)腸縮短，恢復(fù)黏膜腺體及絨毛排列，可見益生菌制劑在UC致病的生物學(xué)機制方面發(fā)揮了重要作用。上述研究對患者的機體氧化/抗氧化水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示觀察組患者接受治療后的血清及腸黏膜SOD水平高于對照組、MDA水平低于對照組患者。SOD為典型的抗氧化物質(zhì)，可以消除新陳代謝過程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，是體內(nèi)氧自由基的頭號殺手；MDA是自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，且具有細(xì)胞毒性[14]。上述結(jié)果提示聯(lián)合用藥對UC患者的氧化應(yīng)激水平具有更強的抑制效果。

綜上所述，雙歧桿菌聯(lián)合柳氮磺胺吡啶可以有效優(yōu)化潰瘍性結(jié)腸炎患者的腸道菌群數(shù)量，抑制腸道炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)，值得在日后臨床實踐中推廣應(yīng)用。

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Effect of bifidobacterium combined with sulfasalazine on intestinal flora,serum and cytokine levels in intestinal mucosa in patients of ulcerative colitis.

HOU Bing.Department of Gastroenterology,the First People's Hospital of Chengdu,Chengdu 610041,Sichuan,CHINA

Objective To analyze the effect of bifidobacterium combined with sulfasalazine on intestinal flora,serum and cytokine levels in intestinal mucosa in patients of ulcerative colitis.MethodsEighty-two patients with ulcerative colitis in our hospital from October 2012 to October 2014 were selected as research objects.According to random number table,the patients were divided into control group(n=41,treated by sulfasalazine)and observation group(n=41,treated by bifidobacterium combined with sulfasalazine).The intestinal flora,serum and cytokines levels in intestinal mucosa were compared between the two groups.Results(1)In the observation group,the quantities of intestinal bacteria,lactobacillus and bifidobacterium after treatment were significantly larger than those in the control group(P＜0.05).(2)In the observation group,the levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-6(IL-6) in serum and intestinal mucosa after treatment were significantly lower than those in the control group,while interleukin-10(IL-10)level was significantly higher(P＜0.05).(3)In the observation group,the superoxide dismutase(SOD) level in serum and intestinal mucosal after treatment was significantly higher than that in the control group,while malondialdehyde(MDA)level was significantly lower(P＜0.05).ConclusionBifidobacterium combined with sulfasalazine could effectively optimize the number of intestinal flora in patients with ulcerative colitis,inhibit intestinal inflammation and oxidative stress reaction,and reduce disease activity.

Ulcerative colitis;Bifidobacterium;Sulfasalazine

R574.62

A

1003—6350（2015）14—2047—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.14.0740

2014-11-11)

候 兵。E-mail：492169618@qq.com