橄欖果提取物抗氧化活性及在皮膚健康中的作用

賀瑞坤，羅海吉

（1.湯臣倍健股份有限公司技術(shù)研發(fā)中心，廣東廣州 510663；2.南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系，廣東廣州 510515）

橄欖果提取物抗氧化活性及在皮膚健康中的作用

賀瑞坤1，羅海吉2

（1.湯臣倍健股份有限公司技術(shù)研發(fā)中心，廣東廣州 510663；2.南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)系，廣東廣州 510515）

摘 要：本文綜述了橄欖果提取物中橄欖多酚、羥基酪醇等主要化學(xué)成分的抗氧化作用機(jī)制及研究進(jìn)展，探究了橄欖果提取物對(duì)皮膚健康方面的作用。

關(guān)鍵詞：橄欖果提取物；抗氧化；皮膚健康

油橄欖Oleaeuropaea L.為木犀科木犀欖屬常綠喬木，是世界著名的木本油料樹種，有四千多年的栽培歷史。油橄欖主要分布在地中海國(guó)家，希臘、意大利、突尼斯、西班牙為集中產(chǎn)地。自古以來，由橄欖果制作的產(chǎn)品就被作為食物和傳統(tǒng)藥物使用。研究表明橄欖具有增強(qiáng)心臟健康[1-3]、抗癌、抗菌、抗炎等多種生物和藥理活性[4]?，F(xiàn)代生物技術(shù)分析表明，油橄欖中活性物質(zhì)主要有橄欖多酚、黃酮類、裂環(huán)烯醚萜類（包括橄欖苦苷）、雙黃酮等，并且其抗氧化生物活性物含量高于油橄欖果和莖[5-8]。

本文對(duì)橄欖多酚類物質(zhì)的抗氧化研究作一綜述，表明橄欖多酚的自由基清除能力也可能對(duì)皮膚健康產(chǎn)生直接影響。

1 橄欖果中的主要化學(xué)組成及抗氧化研究綜述

橄欖果實(shí)含油率高達(dá)30%，栽培油橄欖主要是利用果實(shí)中的油脂加工橄欖油。據(jù)生化分析，橄欖油由皂化物部分和不皂化物部分組成。皂化物部分包括游離脂肪酸和三甘油酯，三甘油酯占98.5%左右；不皂化物占1.5%左右，包括游離醇、三萜烯、色素（葉綠素和類胡蘿卜素）、生育酚、多酚、甾醇、角鱉烯及揮發(fā)性成分等。油橄欖葉中橄欖苦甙和黃酮等多酚類化合物成分復(fù)雜，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)油橄欖的化學(xué)成分做了深人的研究，已經(jīng)分離得到100多個(gè)化合物[9-11]。油橄欖抗氧化生物活性成分主要是橄欖苦甙（oleuropein）、羥基酪醇（hydroxytyrosol）、黃酮類（flavonoids）、木酚素類（lignan）等，而具有羥基酪醇母體結(jié)構(gòu)的小分子二酚類化合物最具有抗氧化活性作用，其中羥基酪醇和橄欖苦苷是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

孫瑾等[12]對(duì)提取純化后得到的橄欖多酚類物質(zhì)，通過測(cè)定其還原力、對(duì)自由基的清除能力，及對(duì)油脂過氧化的抑制作用，研究了其體外抗氧化活性，并與VC和BHT進(jìn)行了對(duì)比結(jié)果表明，橄欖多酚對(duì)羥基自由基、亞硝酸鹽有較強(qiáng)的清除作用，在一定范圍內(nèi)，清除效果隨質(zhì)量濃度的升高而加強(qiáng)。另外，在相同濃度下，橄欖多酚對(duì)超氧陰離子自由基的清除率低于VC和BHT。另有研究對(duì)橄欖酚類提取物進(jìn)行不同的抗氧化體系檢測(cè)，結(jié)果表明，橄欖酚類提取物具有比BHA（與食品抗氧化劑丁基羥基茴香醚）和VC更強(qiáng)的自由基清除能力及鐵離子還原力，具有較好的體外抗氧化能力[13]。很多實(shí)驗(yàn)都證明橄欖多酚提取物具有較強(qiáng)的自由基清除能力及較高的抗氧化活性；而且在各體系中，橄欖多酚提取物的抗氧化活性與其濃度之間均有良好的量效關(guān)系[14]。

橄欖多酚的抗氧化性是一種綜合效應(yīng)，抗氧化性主要來源于多酚分子中大量的羥基酪醇[15-18]。羥基酪醇（hydroxytyrosol），又名 3，4-二羥基苯乙醇，是一種天然抗氧化劑，廣泛存在于橄欖的枝葉及果實(shí)中，特別是地中海地區(qū)的橄欖樹中含量較高，是橄欖油的有效成分。大量的研究表明羥基酪醇具有很強(qiáng)的抗氧化作用[19-23]，羥基酪醇作為氫供體，對(duì)多種活性氧具有清除作用，可將單線態(tài)氧1O2還原成活性較低的三線態(tài)氧3O2，減少氧自由基產(chǎn)生的可能性，同時(shí)也是各種自由基有效的清除劑，生成活性較低的多酚自由基，打斷自由基氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)[24]；并可阻止多不飽和脂肪酸的自氧化，防止DNA受氧化損害[25]。

機(jī)體不正常的代謝產(chǎn)生大量的氧自由基，當(dāng)氧自由基的數(shù)量超過體內(nèi)抗氧化防御能力，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷，此時(shí)機(jī)體則處于氧化應(yīng)激態(tài)。氧化應(yīng)激是活性氧（ROS）的產(chǎn)生和細(xì)胞抗氧化能力的失衡引起的[26]，它將影響細(xì)胞大多數(shù)成分，如脂質(zhì)，蛋白質(zhì)和DNA。氧化應(yīng)激與疾病有顯著的直接關(guān)系，其可導(dǎo)致亞健康甚至疾病的發(fā)生。

流行病學(xué)研究顯示，大量攝入食物中的抗氧化劑可有效對(duì)抗氧化應(yīng)激。藥理學(xué)數(shù)據(jù)和臨床試驗(yàn)證明，橄欖果提取物可有效提高抗氧化防御能力、對(duì)抗氧化應(yīng)激[27-28]。如通過測(cè)量大鼠體內(nèi)氧化標(biāo)記物8-異前列烷（8-異前列腺素F2α）的排泄量，證明橄欖果提取物在大鼠體內(nèi)具有顯著的抗氧化效果[29]。此外，另有臨床試驗(yàn)對(duì)19名健康受試者連續(xù)4周每天服用400 mg的橄欖果提取物，在研究開始前和為期四周的治療結(jié)束后，分別測(cè)量尿樣中的氧化應(yīng)激標(biāo)記物8-異前列烷的尿排泄量。試驗(yàn)表明橄欖果提取物顯著降低了氧化標(biāo)記物的形成（47%，P＜0.05平均數(shù)據(jù)），顯著改善健康受試者的氧化狀態(tài)[30]。

2 橄欖果提取物對(duì)皮膚健康研究進(jìn)展

皮膚的衰老與機(jī)體的衰老是同時(shí)進(jìn)行的，皮膚老化是機(jī)體衰老的一部分。因?yàn)槠つw位于機(jī)體的最外層，更多地受到外源性因素的影響，因此皮膚的老化是內(nèi)源性因素和外源性因素共同作用的結(jié)果[31]。皮膚外源性的老化與紫外線（UV）的照射、風(fēng)吹、吸煙、飲酒、與刺激物接觸有關(guān)。而UV的長(zhǎng)期照射是環(huán)境中促進(jìn)皮膚老化的最主要因素，故外源性老化一般是指光老化[32]。

光老化在臨床上及組織學(xué)上均有特點(diǎn)。臨床表現(xiàn)主要是：暴露部位皮膚松弛、粗深皺紋、結(jié)節(jié)、皮革樣外觀，色素斑增多，毛細(xì)血管擴(kuò)張，原有幾何圖形外觀明細(xì)改變或消失，膚色常呈灰黃色，可發(fā)生各種良性、癌前期或惡性腫瘤。光老化皮膚在組織學(xué)主要表現(xiàn)為：真皮層炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，彈性纖維增粗、排列紊亂或聚集成團(tuán)，真皮層上層膠原退行性變明細(xì)、最后成為無定形物質(zhì)；皮膚毛細(xì)血管擴(kuò)張并扭曲，最后變得極為稀疏，黑素細(xì)胞灶性增生等[32]。

光老化皮膚中的許多改變，如粗細(xì)皺紋、皮膚粗糙及色素沉著等可以通過藥物改善和逆轉(zhuǎn)，治療和預(yù)防皮膚的光老化是可能的。在皮膚皺紋與飲食結(jié)構(gòu)關(guān)系的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，日常大量食用橄欖制品的人群皮膚皺紋相對(duì)較少，進(jìn)一步推測(cè)橄欖多酚的自由基清除能力也可能對(duì)皮膚健康產(chǎn)生直接的影響，包括預(yù)防與皺紋形成、皮膚變薄以及缺水有關(guān)的氧化效應(yīng)[33-34]。并陸續(xù)有研究不斷證明的此推論的正確性。

近年來國(guó)內(nèi)外對(duì)橄欖果提取物對(duì)皮膚光老化的防治作用進(jìn)行了頗有成效的研究，現(xiàn)綜述如下。

2.1 促進(jìn)曬后皮膚的健康

在一項(xiàng)安慰劑對(duì)照試驗(yàn)中，連續(xù)4周給13位男性研究對(duì)象口服橄欖果提取物，劑量為160 mg/天。然后在其背部區(qū)域連續(xù)使用0.054 J/cm2到0.135 J/cm2劑量的紫外線（UVA+UVB0.45Mw/cm2）照射。在口服橄欖果提取物前后，分別測(cè)量最低紅斑劑量（MED）。結(jié)果顯示橄欖果提取物使MED平均增加16.45%（P＜0.01），表明橄欖果提取物有助于促進(jìn)曬后皮膚的健康[30]。

另外，研究通過模擬活體內(nèi)的情況，如皮膚受紫外線照射后導(dǎo)致超氧陰離子在組織和細(xì)胞內(nèi)生成，顯示橄欖果提取物中多酚對(duì)活性氧如超氧陰離子O2-具有清除能力[34-35]。生物體內(nèi)氧的單電子還原，生物分子的酶促氧化和自氧化都可產(chǎn)生各種氧自由基。這些自由基的強(qiáng)反應(yīng)性是導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷和衰老的主要原因。通過對(duì)橄欖中多酚類物質(zhì)體外抗氧化活性研究顯示橄欖多酚類物質(zhì)具有良好的抗氧化性能，特別是在清除羥自由基方面，表現(xiàn)出了明顯的優(yōu)勢(shì)[12]。

2.2 修復(fù)表皮滲透屏障，防止形成紫外線導(dǎo)致的光老化皺紋

紫外輻射可破壞皮膚表皮滲透屏障。有研究通過每天給成年無毛小鼠喂食6.25 mg/kg～125 mg/kg劑量的橄欖果提取物中的毛蕊花苷，持續(xù)11 d。分別于紫外線照射后的當(dāng)天、第3天、第4天測(cè)量TEWL（經(jīng)表皮失水率），發(fā)現(xiàn)TEWL有顯著性下降，這表明毛蕊花苷對(duì)表皮滲透屏障發(fā)揮了保護(hù)作用[29]。

太陽光照會(huì)促進(jìn)光老化，并形成皺紋。有試驗(yàn)將成年無毛小鼠置于紫外線UVA和UVB下進(jìn)行照射，同時(shí)不斷增加紫外線的劑量，并給小鼠喂食橄欖果提取物。根據(jù)皺紋等級(jí)評(píng)分表來測(cè)量每只小鼠的皺紋形成情況，結(jié)果顯示服用橄欖果提取物后紫外線誘發(fā)的皺紋形成率降低的38%（P＜0.001）；同時(shí)，因?yàn)楸砥ず穸仁窃u(píng)價(jià)紫外線誘發(fā)的皮膚炎癥的有用參數(shù)，經(jīng)測(cè)量，表皮厚度降低了28%[29]。

2.3 抑制皮膚脂質(zhì)過氧化

皮膚干燥是富含脂質(zhì)的組織發(fā)生氧化應(yīng)激所致[36-37]。對(duì)于干燥的皮膚而言，脂質(zhì)過氧化物是主要的非自由基中間體。對(duì)23名健康男性受試者進(jìn)行了臨床評(píng)價(jià)，他們每天分別在兩頰上涂抹含有橄欖果提取物的制劑和安慰劑，一天2次，連續(xù)3個(gè)月。分別在研究開始前、第8周和第12周測(cè)量皮膚角質(zhì)層的水分、皮膚彈性以及皮膚紋理。與安慰劑組相比，含有橄欖果提取物的樣品對(duì)紋理分析中的粗糙度參數(shù)有顯著改善。同時(shí)，角質(zhì)層中的水分也呈現(xiàn)改善趨勢(shì)[38]。

2.4 葡萄糖苷酶的抑制作用

對(duì)于皮膚健康而言，健康的血糖代謝至關(guān)重要。高血糖使人體代謝功能紊亂，病人體內(nèi)葡萄糖不能利用，蛋白質(zhì)、脂肪消耗增多，組織、細(xì)胞正常必需營(yíng)養(yǎng)得不到供應(yīng)，引起免疫力下降，而且高血糖也是各種細(xì)菌和真菌的良好培養(yǎng)基，所以容易被細(xì)菌感染，引起皮膚真菌性感染，如如體癬、指甲癬、足癬等[39]。使用不同濃度的橄欖果糖提取物測(cè)試α-葡萄糖苷酶的活性，結(jié)果顯示橄欖果提取物對(duì)這種酶有很好的抑制作用，可以通過維持健康的血糖代謝促進(jìn)皮膚健康[27]。

3 結(jié)語

綜上所述，橄欖果提取物的抗氧化和自由基清除能力已經(jīng)顯示了其在皮膚層面的有益作用，而且可以有效處理自由基介導(dǎo)的應(yīng)激問題，如皺紋形成、表皮屏障破壞等，使其在食品添加劑、化妝品、保健食品和醫(yī)藥工業(yè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。但橄欖果提取物中的化學(xué)成分，尤其是橄欖多酚、羥基酪醇的抗氧化及對(duì)抗皮膚光老化作用機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，當(dāng)前的研究多限于體外生物實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)，臨床研究較少，橄欖果提取物在皮膚健康方面的作用需要更多的理論、臨床數(shù)據(jù)支持。

：

[1]VALENTINI K,MARIA-ISABEL C,DANIEL MA,et al.In vivo nutrigenomic effects of virgin olive oil polyphenols within the frame of the Mediterranean diet:a randomized controlled trial[J].The Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology,2010,24(7):2546-2557

[2]KARINA TC,JORGE CS,OLGA J,et al.Elevated circulating LDL phenol levels in men who consumed virgin rather than refined olive oil are associated with less oxidation of plasma LDL[J].The Journal of Nutrition,2010,140(3):501-508

[3]ANTONIO C,JUAN R,JUAN MF,et al.Gene expression changes in mononuclear cells in patients with metabolic syndrome after acute intake of phenol-rich virgin olive oil[J].BMC Genomics,2010,11:253

[4]王紅亮,史慧賢,姜申德.羥基酪醇的研究進(jìn)展[J].化工進(jìn)展,2010,29(6):1133-1137

[5]吉騰飛,馮孝章.木犀屬植物化學(xué)成分和藥理活性研究概況[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2004,16(4):71-78

[6]肖純,張凱農(nóng).Folin-Denis試劑測(cè)定茶中酚類化合物[J].茶葉通訊,1996(4):23-25

[7]BENAVENTE-GARCI?AA O,CASTILLOA J,LORENTE J,et al.Antioxidant activity of phenolics extracted from Oleaeuropaea L.leaves[J].Food Chemistry,2000(68):457-462

[8]王曉飛,李辰,鄭媛媛,等.油橄欖葉多酚類成分研究[J].中草藥,2011,42(5):848-851

[9]王成章.希臘橄欖油的加工技術(shù)[J].林產(chǎn)化工通訊,2004,38(1):36-40

[10]怡悅.木犀欖屬植物葉中的酚類化合物[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè)),2004,26(1):51-52

[11]趙天增,尹衛(wèi)平,張海艷,等.橄欖苦甙的NMR數(shù)據(jù)解析[J].波譜學(xué)雜志,2002,19(1):57-61

[12]孫瑾,王宗舉,陳崗,等.橄欖中多酚類物質(zhì)體外抗氧化活性研究[J].中國(guó)食品添加劑,2010,21(3):69-73

[13]馮英委,何志勇,陳潔,等.橄欖酚類提取物的抗氧化性能[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2011,37(12):38-42

[14]張亮亮,楊志偉,林益明.橄欖多酚抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技,2008,29(4):57-59

[15]ANNALISA R,NADIA M,PATRIZIA P,et al.Polyphenolic content in five tuscany cultivars of Oleaeuropaea L.[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,1999,47(3):964-967

[16]ANA FV,FEDERICO F,BRANCA MS,et al.Phenolic profiles of Portuguese olive fruits(Oleaeuropaea L.):Influences of cultivar and geographical origin[J].Food Chemistry,2005,89(4):561-568

[17]MULINACCI N,ROMANI A,GALARDI C,et al.Polyphenolic content in olive oil waste waters and related olive samples[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2001,49(8):3509-3514

[18]JOSé AP,ANA P,ISABEL F,et al.Cultivar effect on the phenolic composition and antioxidant potential of stoned table olives:Influ－ences of cultivar and geographical origin[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry,2006,54(22):8425-8431

[19]ALDINIA G,PICCOLIA A,BERETTAA G,et al.Antioxidant activity of polyphenols from solid olive residues of cv Coratina[J].Fitoterapia,2006,77(2):121-128

[20]HASSAN KO,PAUL DP,IZABELA K,et al.Chemistry and bioactivity of olive biophenols in some antioxidant and antiproliferative in vitro bioassays[J].Chemical Research in Toxicology,2009,22(1):227-234

[21]FRANCESCO V,GIORGIO B,CLAUDIO G.Free radical-scavenging properties of olive oil polyphenols[J].Biochemical and Biophysical Research Communications,1998,24(1):60-64

[22]ELENA DM,MARIA S,ANTONELLO P,et al.Characterization and fractionation of phenolic compounds extracted from olive oil mill waste waters[J].Food Chemistry,2007,104(2):58-867

[23]BENAVENTE-GARCIíAA O,CASTILLOA J,LORENTE J,et al.Antioxidant activity of phenolics extracted from Oleaeuropaea L.leaves[J].Food Chemistry,2000,68(4):457-462

[24]YOSHIDA T,MORI K,HATANO T,et al.Effects of tannins and related polyphenols on superoxide anion radical,and on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical[J].Chemical and Pharmaceutical Bulletin,1989,37:2016-2025

[25]王芳,鄔樹偉.羥基酪醇的作用機(jī)制及研究進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2010(8):358-359

[26]DEY A,CEDERBAUM AI.Alcohol and oxidative liver injury[J].Hepatology,2006,43(S1):S63-S74

[27]KEIKOS.effectofolivepolyphenoldryextractonglucosemetabolism insubjects with hypertension[J].Japan Society of Ningen Dock,2011,25:825-830

[28]MCGRAW H,MINNEAPOLIS MN.Cutaneous manifestations of diabetes:signs of poor glycemic control or new-onset disease[J].Postgraduate Medicine,2006,119,3:38-44

[29]FRANCESCO V,CLAUDIO G,ELENA P,et al.Olive Phenol Hydroxytyrosol Prevents Passive Smoking-Induced Oxidative Stress[J].Circulation,2000,102:2169-2171

[30]MARAMALDI G,ARTARIA C,IKEMOTO T.Estrattostandardizzato di frutti di Oleaeuropaea L.[J].IntegratoreNutrizionale,2006,9(3):23-29

[31]趙辨.臨床皮膚性病學(xué)[M].3版.江蘇科學(xué)技術(shù)出版社,2001:275-278

[32]劉仲榮.皮膚光老化的診斷[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)皮膚性病學(xué)分冊(cè),2000,26(3):138

[33]MARTALENABR P,ANTIGONE KB,NAIYANA W,et al.Skin wrinkling:can food make a difference[J].Journal of the American College of Nutrition,2001,20(1):71-80

[34]VIOLA P,VIOLA M.Virgin olive oil as a fundamental nutritional component and skin protector[J].American Journal of Clinical Dermatology,2009,27:159-165

[35]KOHL E.Skin ageing[J].Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology,2011,25(8):873-884

[36]BAUMANN L.Skinageinganditstreatment[J].The Journal of Pathology,2007,211(2):241-251

[37]ALBERT WG.Lipid hydroperoxide generation,turnover,and effector action in biological systems[J].The Journal of Lipid Research,1998,39:1529-1542

[38]MATSUOKA Y.Curative properties of a topical product containing olive fruit polyphenol shown by a placebo controlled,double blind study using half face[C].107th Annual Meeting of Japanese Dermatological Association,2008

[39]SIMONE VH,AART HB.Skin manifestations of diabetes[J].Cleveland Clinic Journal of Medicine,2008,75(11):772-787

Antioxidant Capacity and the Role of Skin Health of Olive Fruit Extract

HE Rui-kun1，LUO Hai-ji2
（1.Research and Development Center，By-health Co.，Ltd，Guangzhou 510663，Guangdong，China；2.Department of Nutrition and Food Hygiene，College of Public Health and Tropical Medicine，Southern Medical University，Guangzhou 510515，Guangdong，China）

Abstract：This paper summarized the antioxidant capacity and the role of skin health of olive fruit extract， such as polyphenols and hydroxytyrosol.To explore the effect of olive fruit extract on skin health.

Key words：olive fruit extract；antioxidant capacity； skin health

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.06.013

賀瑞坤（1983—），女（漢），工程師，博士，研究方向：植物化學(xué)及分子生物學(xué)。

2013-09-27