佟士淼 汪國棟
(哈爾濱市雙城區(qū)畜牧獸醫(yī)局,黑龍江哈爾濱 150100)
雞傳染性支氣管炎的診斷及防制
佟士淼 汪國棟
(哈爾濱市雙城區(qū)畜牧獸醫(yī)局,黑龍江哈爾濱 150100)
雞傳染性支氣管炎的病原體為雞傳染性支氣管炎病毒,由此引發(fā)的雞傳染性支氣管炎是一種急性、高度接觸性的呼吸道傳染病。幼年雞的死亡率可達(dá)30%,甚至更高,6周齡以上的雞死亡率較低,一般肉雞的死亡率比蛋雞高。該病給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
雞傳染性支氣管炎;病理;防制
本病的潛伏期,自然感染約需36h或更長時(shí)間?;茧r表現(xiàn)為打噴嚏、咳嗽、呼吸困難和氣管哆音;流漿液性鼻涕;可見眼睛濕潤,個(gè)別雞的眼眶下竇腫脹;病雞精神沉郁,擁擠在熱源附近。6周齡以上的雞及成年雞癥狀與小雞大致相同,但通常無鼻涕,在夜間雞處于安靜的情況下才能發(fā)現(xiàn)。感染腎毒株的雛雞似能從典型的呼吸道病程中得以恢復(fù),但接著出現(xiàn)精神沉郁、羽毛松亂、水樣排泄(多為白色水樣便)及飲水量增加(通常增加1倍以上)。如果產(chǎn)蛋雞群并發(fā)尿石癥,死亡率會(huì)增加。在產(chǎn)蛋雞群,除呼吸道癥狀外,還可見到產(chǎn)蛋量和蛋的品質(zhì)下降。產(chǎn)蛋量下降的嚴(yán)重程度可能隨產(chǎn)蛋階段和致病毒株而改變,嚴(yán)重的可下降30~50%。除產(chǎn)蛋量下降外,不適合孵化的蛋數(shù)量增加,如軟殼蛋、畸形蛋、殼面粗糙的蛋、水樣蛋清、蛋黃和蛋白分離以及蛋白粘于蛋殼表面等。
病雞呼吸道黏膜充血、水腫,并有滲出物,肺出現(xiàn)水腫。產(chǎn)蛋母雞卵泡充血、出血、變形和破裂。輸卵管的長度和重量明顯減小,管腔變窄。雛雞常發(fā)生輸卵管發(fā)育不全,表現(xiàn)為輸卵管變短,管腔狹小、閉塞,部分缺損,囊泡化。到性成熟時(shí)輸卵管的長度和重量尚不及正常的一半,致使成熟期不能正常產(chǎn)蛋。侵害腎臟的毒株致病時(shí),腎臟腫大、蒼白,輸尿管擴(kuò)張充滿白色的尿酸鹽結(jié)晶。有時(shí)在肝、心外膜、腹膜、胸膜等黏膜上也沉積尿酸鹽,腸管黏膜呈卡他性炎性變化,全身皮膚和肌肉發(fā)紺。腺胃型傳染性支氣管炎以腺胃嚴(yán)重腫大為特征,眼觀如乒乓球樣。組織病理學(xué)檢查呼吸道黏膜上皮細(xì)胞顯示增生、空泡變性和纖毛脫失,病情嚴(yán)重時(shí)黏膜上皮細(xì)胞呈不同程度的脫落,黏膜固有層和黏膜下層充血、水腫、輕度出血,并有多量淋巴細(xì)胞浸潤。腎臟可見腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死,腎小管擴(kuò)張,內(nèi)含尿酸鹽結(jié)晶,間質(zhì)水腫,有淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞和異染性細(xì)胞浸潤,并見成纖維細(xì)胞增生。有時(shí)形成由多核巨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞包圍的尿酸鹽性肉芽腫。
3.1 病毒分離與鑒定
(1)病料處理。從有急性呼吸道癥狀的病禽中采集氣管和肺組織,或從疑似腎病變型病例中采取腎臟、盲腸扁桃體等作病毒分離材料。按20%比例加入每毫升含有青霉素1萬單位、鏈霉素10mg的磷酸緩沖液(pH7.2)研磨制成懸液,室溫下放置30min,3000~5000轉(zhuǎn)/min離心10min,取上清液經(jīng)孔徑為0.3~0.65μm的濾膜過濾收取濾液供接種培養(yǎng)用。
(2)雞胚接種。取濾液0.2ml經(jīng)絨毛尿囊腔接種9~11日齡無雞傳染性支氣管炎的雞胚或無母源抗體的健康雞胚。接種3d后收取部分雞胚,收獲尿囊液存于-60℃或4℃待檢或盲傳。培養(yǎng)7天后可見典型病變:胚體發(fā)育受阻,蜷縮成團(tuán),羽毛桿狀,腎有尿酸鹽沉積等。接種2~7d后雞胚死亡,為特異性病毒感染。
(3)氣管環(huán)培養(yǎng)。無菌摘取18~20日齡的雞胚或1~5日齡無此病雛雞氣管,放入事先加有37℃組織保存液的平皿(100mm×15mm)中,用刀片將氣管剝離干凈,切成1mm厚的氣管環(huán)薄片,放入另一個(gè)含有37℃組織保存液的平皿中。在24孔組織培養(yǎng)板上,每孔放入2個(gè)氣管環(huán)片,并加入0.5毫升組織培養(yǎng)液(含10%犢牛血清、4mol/LL-谷氨酰胺、10mol/L丙酮酸鈉、100μg/ml慶大霉素和卡那霉素的組織保存液),每兩天換液一次,氣管環(huán)上皮纖毛可持續(xù)擺動(dòng)2周以上。每孔分別加入處理后的病料0.1ml,并設(shè)陽性和陰性對(duì)照組。置含5%二氧化碳培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng),每天鏡檢,如為陽性,一般在接種后3~4d氣管環(huán)上皮纖毛將停止擺動(dòng)并脫落。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)。本病病毒能在15~18日齡雞胚細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)生長,尤以腎細(xì)胞最敏感。6~10代雞胚傳代毒株,在腎細(xì)胞中能產(chǎn)生明顯的病變,使細(xì)胞出現(xiàn)空斑,表現(xiàn)胞漿融合形成合胞體。
(5)病毒鑒定。取初代雞胚尿囊液經(jīng)氣管內(nèi)接種易感雛雞,如為本病病毒,接種雛雞在18~36h可出現(xiàn)氣管哆音等癥狀,用同型特異抗血清可以抑制這種致病作用,從而可以作出鑒定。本病病毒鑒定的最常用方法是病毒中和試驗(yàn)。
3.2 血清中和試驗(yàn)
一般用已知的病毒來測(cè)定被檢血清,可以固定病毒稀釋血清,也可稀釋病毒固定血清。此試驗(yàn)可以在雞胚、細(xì)胞培養(yǎng)物或氣管環(huán)培養(yǎng)物上進(jìn)行。作為流行病學(xué)的調(diào)查,當(dāng)被檢血清可以中和1000半數(shù)卵感染劑量(EID50)時(shí),即可認(rèn)為該雞群患過雞傳染性支氣管炎或接種過本病疫苗。如果要確定新近發(fā)生的呼吸道病是否為本病,則必須比較感染前與感染后2~3周的雙份血清,同時(shí)測(cè)定兩份血清對(duì)本病病毒的中和抗體,如康復(fù)期血清中和抗體效價(jià)高于第一次血樣4倍以上,即可診斷為本病。由于存在著多個(gè)本病病毒血清型,所以必須準(zhǔn)備多個(gè)標(biāo)準(zhǔn)本病病毒分別與被檢血清作中和反應(yīng),才能獲得更可靠的結(jié)果。
本病目前尚無有效藥物治療,但可以通過增強(qiáng)雛雞抵抗力來減少損失,如注意通風(fēng),添加抗菌素及維生素用量,在飲水中添加4%的葡萄糖等,可降低死亡率??刹捎妹庖呓臃N來進(jìn)行預(yù)防。弱毒疫苗:目前以H120和H52應(yīng)用較廣泛,其中H120適用于初生雛雞,免疫原性較弱,免疫期短;H52毒力稍強(qiáng),適用于1月齡以上的雞。滅活疫苗:制備的油乳劑滅活苗,用于8~16周齡雞效果良好。
[1] 呂愛軍,胡步榮.雞傳染性支氣管炎的診斷與防制研究進(jìn)展[J].養(yǎng)禽與禽病防治,2000,(10):6-7.