王行龍 白學兵 孫欽波
(①山東省臨沂市臨港區(qū)朱蘆鎮(zhèn)獸醫(yī)站 276613 ②山東省莒南縣畜牧局)
瘦肉精是鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇等物質(zhì)的俗稱。曾被廣泛作為飼料添加劑使用,在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中帶來很大的效益。但是人食用了含鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺或沙丁胺醇殘留的動物性食品,殘留通過食物進入人體,就使人體積蓄中毒。如果一次攝入量過大,就會產(chǎn)生異常生理反應的中毒現(xiàn)象,均會對健康帶來危害。常規(guī)儀器檢測方法不能滿足實際生產(chǎn)中大批量檢測的需求。用快速檢測卡(尿樣)檢測這三種藥物,具有操作方便、快捷、靈敏高等特點,不需要其他儀器,適用于現(xiàn)場檢測。筆者作為一名基層獸醫(yī)工作者,根據(jù)近幾年在實際工作中遇到的問題整理如下,僅供同行參考。
(1)尿樣必須新鮮無污染。(2)尿樣必須收集在潔凈、干燥、不含有任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器里,如尿樣混濁,可在室溫4000r/min條件下離心5min處理后待檢。筆者在實際操作(產(chǎn)地檢疫時現(xiàn)場檢測)曾遇到過因尿液太混濁,液面不走的現(xiàn)象。(3)不潔凈樣本,如含有漂白劑、明礬,可能在正確的分析操作方法下也會產(chǎn)生錯誤的結(jié)果。(4)若不能及時送檢,尿液樣本在2~8℃冷藏可保存24h,要注意避免造成失效或污染。長期保存需冷凍于-20℃,忌反復凍融。(5)冷藏或冷凍尿樣需恢復至室溫即20±5℃后方可進行檢測。
(1)從原包裝未開封的鋁箔袋中取出檢測卡,打開后請在在1h內(nèi)盡快地使用。(2)檢測卡應平放。筆者在現(xiàn)場檢疫時曾遇到過這樣的情況:檢測卡不平放(地面不平,有一定的坡度) 時,滴加尿樣后液面流動過快,有時出現(xiàn)質(zhì)控線和檢測線都不顯色,但平放后顯色正常。所以在實際操作時一定注意檢測卡不能傾斜,否則影響結(jié)果判定。(3)使用過程中盡量不要觸摸檢測卡中央的白色面膜;避免陽光直射和風扇直吹。(4)點樣前,應待檢測卡和樣本溫度恢復至室溫即20±5℃后,方可進行檢測。筆者在某年的冬季,檢測一批發(fā)往杭州的生豬時,在室外點樣后幾個檢測卡竟質(zhì)控線和與檢測線都不顯色。后來在室內(nèi)檢測時各個檢測卡都顯色,這才知道是溫度的問題。(5)過期、破損、污染或無效的檢測卡切勿使用。(6)檢測卡為一次性產(chǎn)品,請勿重復使用。(7)一定注意未使用產(chǎn)品的防潮保護,確保封口的緊密度,否則會產(chǎn)生錯誤或者不確定的結(jié)果。(8)產(chǎn)品應儲存于陰涼避光干燥處,4~30℃密封。忌冷凍。使用過程中請注意檢測卡有效期。該產(chǎn)品有效期為12個月。
(1)將檢測卡平置于干凈平坦的臺面上,用一次性塑料滴管垂直滴加2滴無空氣泡的尿液樣本至加樣孔中。(2)滴加、吸取尿樣時請使用本產(chǎn)品所帶滴管。(3)一次性塑料滴管不可重復使用,以免出現(xiàn)交叉污染。(4)樣本不能濺到或者直接滴到檢測卡中央的白色面膜,這樣會影響顯色效果。筆者實踐中不小心把樣本濺到檢測卡中央的白色面膜,結(jié)果無顯示。(5)尿樣加入過多或過少均會影響顯色效果,要嚴格按照說明書操作。
(1)加樣后開始計時,靜置反應3~5min后,觀察顯色區(qū),判斷結(jié)果,其它時間判斷無效。(2)自來水、蒸餾水、去離子水或其它液體不能作為陰性對照。(3)由于不同尿液樣本之間的差異,有的檢測線可能出現(xiàn)顏色偏淺或偏灰現(xiàn)象,但只要出現(xiàn)紅色條帶,即可判定為陰性。(4)出現(xiàn)陽性結(jié)果,需用本卡復檢一次。(5)若遇見判定結(jié)果有爭議的樣品,請用儀器確證。(6)操作失誤,以及樣本中存在干擾物質(zhì),有可能導致錯誤的結(jié)果,需查閱在特異性中列出的能引起陽性結(jié)果的物質(zhì)。(7)當實驗操作環(huán)境溫度低時,會影響線條變淺,有可能出現(xiàn)假陽性結(jié)果,建議操作環(huán)境溫度最好不低于10℃。
5.1 陰性 質(zhì)控線(C線)出現(xiàn)紅色條帶,檢測線(T線)也出現(xiàn)紅色條帶。無論顏色深淺均判為陰性。
5.2 陽性 質(zhì)控線(C線)出現(xiàn)紅色條帶,而檢測線(T線)不出現(xiàn)紅色條帶。判為陽性。
5.3 無效 質(zhì)控線(C線)與檢測線(T線)均無紅色條帶出現(xiàn)或者質(zhì)控線(C線)無紅色條帶出現(xiàn)但檢測線(T線)出現(xiàn)紅色條帶,說明此檢測卡已失效、過期,或操作不當,需另做一次測試。
該檢測卡僅是一種定性篩查方法,不能定量克倫特羅、萊克多巴胺或者沙丁胺醇在樣本中的精確濃度。樣本若需復核確證,請參考中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準(農(nóng)業(yè)部1063號公告-3-2008動物尿液中11種β-受體激動劑的檢測液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法)。