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    豬瘟國內(nèi)流行情況及凈化技術(shù)

    2015-04-04 04:19:03張浩吉廣東省佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院
    獸醫(yī)導(dǎo)刊 2015年1期
    關(guān)鍵詞:檢測

    張浩吉/廣東省佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院

    豬瘟(Hog Cholera,HC或Classical Swine Fever,CSF)是 由 黃病毒科、瘟病毒屬成員之一的豬瘟病 毒 (Hog Cholera Virus,HCV 或 Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起豬的一種高度接觸傳染性病毒病,是嚴(yán)重危害國內(nèi)外養(yǎng)豬業(yè)的最主要的烈性傳染病之一。國際獸疫局(OIE)將CSF列為A類16種法定傳染病之一,在我國也被列為一類傳染病。近些年來,我國的豬瘟流行特點發(fā)生了較大的變化,在典型豬瘟的大流行得到較好控制之后,慢性豬瘟、溫和型、繁殖障礙型和亞臨床型豬瘟在許多地區(qū)的規(guī)?;i場時有發(fā)生,其癥狀也容易與其他豬病混淆。尤其是由母豬持續(xù)性感染造成的繁殖障礙以及仔豬先天感染導(dǎo)致的免疫耐受現(xiàn)象越來越普遍,這些持續(xù)帶毒豬成為了豬場主要的傳染源,為豬瘟和其它疾病的防控帶來了巨大的挑戰(zhàn)。本文介紹了當(dāng)前我國豬瘟流行的新特點,并從理論和實踐方面總結(jié)了我國現(xiàn)階段豬瘟防控與凈化的技術(shù)要點。

    一、豬瘟流行的歷史與危害性

    豬瘟歷史悠久,1833年首先出現(xiàn)于美國的俄亥俄州,1903年證明病原體是病毒。該病廣泛分布于亞洲、歐洲、南美洲的大部分養(yǎng)豬國家。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)在2000年至2012年發(fā)布的豬瘟(CSF)在全球的流行報告顯示,CSF主要在中南美洲、亞洲和歐洲三大區(qū)域流行,全球CSF的流行情況較穩(wěn)定。但從2005年開始有報道在非洲南部CSF也多次發(fā)生。

    豬瘟在我國何時開始流行沒有明確記載,據(jù)1935年的豬瘟流行病學(xué)調(diào)查報告,當(dāng)時我國絕大部分省區(qū)都有豬瘟發(fā)生,造成的經(jīng)濟損失十分嚴(yán)重。解放初期豬瘟仍然廣泛流行于我國農(nóng)村。我國于1954年由中國獸藥監(jiān)察所研制出的豬瘟兔化弱毒(Hog cholera lapinized virus,HCLV)疫苗被公認為是安全有效的活疫苗,具備免疫原性強、遺傳性穩(wěn)定、無殘余毒力、對懷孕豬和乳豬安全等特點,為成功控制我國豬瘟大規(guī)模流行以及為世界許多國家和地區(qū)豬瘟的根除做出了巨大的貢獻。

    根據(jù)我國農(nóng)業(yè)部《獸醫(yī)公報》中發(fā)布豬瘟疫情數(shù)據(jù),匯總2001年1月到2010年12月10年間我國31個省、自治區(qū)和直轄市(不包括香港、澳門和臺灣)豬瘟月新發(fā)生次數(shù),統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)在此期間豬瘟共發(fā)生6 052次、163年次和1 181月次。根據(jù)豬瘟發(fā)病月次和發(fā)病次數(shù)地理分布,可將我國豬瘟分為3個主要地區(qū):豬瘟無疫區(qū)、豬瘟疫情穩(wěn)定區(qū)和豬瘟重災(zāi)區(qū)。其中以北方幾個省份為豬瘟無疫區(qū),共有5個??;中東部和西部為豬瘟疫情穩(wěn)定區(qū),這個地區(qū)豬瘟發(fā)生較少,且在2009-2010年期間幾乎無豬瘟發(fā)生;以南部沿海省份為豬瘟重災(zāi)區(qū),其中以福建、廣東、廣西和貴州最為嚴(yán)重。目前我國的生豬飼養(yǎng)量占全球比例接近70%,豬肉消費占國內(nèi)肉類消費60%,是生豬生產(chǎn)、飼養(yǎng)與消費大國,豬瘟等動物疫病一直是阻礙我國養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展的重要因素,每年造成直接經(jīng)濟損失達百億元。

    二、豬瘟病毒的生物學(xué)特性

    CSFV是一種RNA病毒,屬黃病毒科、癍病毒屬。病毒粒子呈球形,有囊膜。CSFV目前一個血清型,但不同病毒株之間存在著抗原性的差異。強毒株引起急性、致死性感染;中等毒力株引起亞急性或慢性感染,以死亡或康復(fù)告終;低毒株引起溫和型和無癥狀持續(xù)性感染,以繁殖障礙,胚胎和仔豬受害為特征。CSFV可在豬的腎、淋巴結(jié)、白細胞、骨髓、睪丸細胞內(nèi)培養(yǎng)生長,不引起細胞病變。病毒對干燥及腐敗較為敏感,但對熱的抵抗力較強,78℃ l h才可致死,低溫也能長期保持病毒活力,如在冰凍豬肉內(nèi)能生存幾星期至幾個月。CSFV對2% NaOH、氯制劑和復(fù)合醛等消毒藥敏感。

    病豬和帶毒豬是主要的傳染源,病豬或帶毒豬通過口、鼻、淚腺分泌物、尿液、糞便排毒。慢性感染豬不斷排毒或間歇排毒,易感豬與病豬的直接接觸是本病傳播的主要方式。研究證實,CSFV低毒力毒株感染妊娠母豬時,可使母豬持續(xù)帶毒500 d以上,這些持續(xù)帶毒豬的存在,形成了豬瘟常發(fā)地區(qū)和豬瘟常發(fā)豬場,成為豬群中CSFV垂直傳播和水平傳播的根源。持續(xù)帶毒母豬所產(chǎn)仔豬CSFV的帶毒陽性率達50%~100%,多為死胎或產(chǎn)弱仔。帶毒種公豬通過精液可將病毒傳播給母豬造成胎兒感染。經(jīng)胎盤感染CSFV的仔豬,可導(dǎo)致先天性免疫耐受,即使通過吃初乳和豬瘟疫苗接種也不能使帶毒仔豬產(chǎn)生免疫保護力。

    國際上將CSFV分為3個基因群(I群、II群和III群),10個基因亞 群(1.1、1.2、1.3、2.1、2.2、2.3、3.1、3.2、3.3和 3.4)。近年來,國內(nèi)對CSFV分子流行病學(xué)研究結(jié)果表明,我國流行的CSFV基因型也在發(fā)生重大變化,中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所等單位經(jīng)對1979-2008年間我國近60個地區(qū)豬場獲得的400多份CSFV樣品的基因序列測定比較發(fā)現(xiàn),目前我國流行的CSFV基因型主要為基因II群,占74.66%,基因I群只占25.34%。王琴等采用CSFV強弱毒鑒別MAb通過ELISA方法對我國流行的29株分離株進行抗原反應(yīng)性研究,結(jié)果顯示針對弱毒株的Mab除3株為陽性外,其余均為陰性;而這些分離株可以被強毒MAb分為強反應(yīng)和弱反應(yīng)兩組,顯示我國豬瘟病毒的流行毒株的抗原性有一定差異。而我國的豬瘟兔化弱毒疫苗株為基因I群,值得慶幸的是我國培養(yǎng)的豬瘟兔化弱毒疫苗對目前我國流行的所有基因型豬瘟野毒均能提供良好的免疫保護。

    三、當(dāng)前我國豬瘟的流行特點

    (一)流行范圍廣,但流行規(guī)模小,呈散發(fā)流行

    我國自2007年實行CSF強制免疫政策后,CSF在我國的大規(guī)模暴發(fā)流行得到控制,這與我國CSF免疫的范圍廣、密度高、強度大密切相關(guān),大規(guī)模免疫接種使豬群均有一定程度的免疫保護率,但是在缺乏有效運輸與市場檢疫情況下仔豬的頻繁交易和流動也導(dǎo)致了CSF的流行范圍更廣。雖然流行的范圍廣,但流行規(guī)模較小、疫區(qū)顯著減少、影響程度較輕、季節(jié)性不明顯,但這種散發(fā)流行見于全國各地。

    (二)豬發(fā)病日齡趨小,亞臨床型持續(xù)感染現(xiàn)象嚴(yán)重

    據(jù)調(diào)查發(fā)現(xiàn),目前我國79%的CSF發(fā)病豬群多在90日齡以下,特別是2~10日齡的哺乳仔豬和斷奶至60日齡的保育豬發(fā)病最多見,而成年豬(育肥豬和種豬)發(fā)病較少,癥狀不明顯,但CSFV持續(xù)感染嚴(yán)重。豬發(fā)生持續(xù)性感染后,CSFV可在豬體內(nèi)存活數(shù)月甚至終生,可持續(xù)向外排毒,但不表現(xiàn)臨床癥狀,是引起CSF流行最不易被發(fā)現(xiàn)和最危險的傳染源。

    亞臨床型無癥狀的持續(xù)感染現(xiàn)象多發(fā)生于仔豬,母豬感染也可表現(xiàn)亞臨床型,但在母豬會進一步發(fā)展為繁殖障礙型。剖檢亞臨床型病者,一般無明顯的病變,常見的是胸腺萎縮和淋巴結(jié)腫大。

    (三)非典型豬瘟是當(dāng)前的主要表現(xiàn)形式

    近年來,CSF在流行過程中毒力發(fā)生變化,低毒力的CSFV進入豬體內(nèi),導(dǎo)致了非典型性的溫和型豬瘟的出現(xiàn),發(fā)病豬癥狀顯著減輕,發(fā)病率、病死率比CSF低,且多呈散發(fā)或局部地區(qū)的少數(shù)養(yǎng)豬場發(fā)生,流行速度緩慢。

    這種非典型的溫和型在大、小豬均可發(fā)病,但以乳豬為多。本病特點是病勢緩慢,病性溫和,病變局限,病程延長。病豬表現(xiàn)鼻干、口渴、減食、尿黃、消瘦、體溫升高。病豬長期便秘,糞如干球狀,常混有血液、粘液或白色脫落的假膜,個別病例于后期出現(xiàn)下痢。部份病豬于四肢下部及腹下呈現(xiàn)淤血紫斑。中、大豬多能自愈,病死率低;但幼齡乳豬有較高的病死率,約30%~50%。

    非典型的溫和型豬瘟的病變是扁桃體有壞死或潰瘍。胃底區(qū)常有片狀充血、出血?;孛ぐ旮浇梢姖冸r形,病久者演變?yōu)殁o扣狀潰瘍。膽囊腫脹,膽汁濃稠,粘膜充血、出血或潰瘍。脾臟常見邊緣出血性梗塞。部份病例的腎臟、膀胱也呈現(xiàn)出血點。小豬常見肋骨與肋軟骨連接處出現(xiàn)黃色輕度鈣化線。

    (四)妊娠母豬帶毒綜合征(繁殖障礙型)危害嚴(yán)重

    帶毒母豬綜合征是指妊娠母豬感染低毒力或中等毒力的CSFV后引起的潛伏性感染,帶毒母豬無明顯的臨床癥狀,但CSFV能通過胎盤屏障垂直傳播給胎兒,導(dǎo)致出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或木乃伊胎,母豬不發(fā)情或不孕等。垂直傳播率高達45%~100%,產(chǎn)下的仔豬貌似健康,實際上仔豬將長期帶毒。帶毒仔豬無論是吃初乳還是進行疫苗免疫,體內(nèi)的CSFV均無法消除,且仔豬易發(fā)病死亡或免疫失敗。仔豬體內(nèi)的病毒長期存在并不斷向外界排毒,造成水平傳播。

    垂直傳播和水平傳播在規(guī)?;i場反復(fù)交替進行,可致CSFV在豬場內(nèi)惡性循環(huán),即無臨床癥狀的持續(xù)感染帶毒母豬一胎盤垂直感染一母豬繁殖障礙一仔豬帶毒—無臨床癥狀的持續(xù)感染帶毒后備母豬一無臨床癥狀的持續(xù)感染帶毒母豬,這種帶毒現(xiàn)象是導(dǎo)致我國CSF長期持續(xù)存在和散發(fā)流行的主要原因。

    (五)混合感染現(xiàn)象嚴(yán)重

    臨床上,豬瘟與其它病毒病、細菌病等混合感染的現(xiàn)象較為普遍。如豬瘟與豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒(PCV-2)、豬流感病毒(SIV)等病毒性疾病的混合感染;尤其近幾年飼料霉變的影響,誘導(dǎo)豬瘟免疫抑制,導(dǎo)致豬瘟散發(fā);豬瘟與鏈球菌、沙門氏菌病、豬肺疫等細菌性疾病混合感染;因此混合感染是導(dǎo)致豬群發(fā)病嚴(yán)重和死亡率升高的主要原因,在控制豬瘟?xí)r要注意對并發(fā)病的預(yù)防和控制。

    四、造成豬瘟流行的原因分析

    (一)對豬瘟防控的重視程度不夠

    目前,雖然我國已經(jīng)實施了CSF疫苗強制免疫政策,大部分地區(qū)的豬場均進行了豬瘟計劃免疫,但仍然有一些地區(qū)或有些人對豬瘟的防控不夠重視,對豬瘟的危害性認識不夠,認為沒有大規(guī)模流行就萬事大吉了,思想松懈,防疫措施執(zhí)行不到位,飼養(yǎng)管理理念跟不上,導(dǎo)致豬瘟在某些地區(qū)或某些豬場時有發(fā)生。

    (二)疫苗質(zhì)量不高或運輸保存不當(dāng)

    目前市場上的豬瘟疫苗種類多,疫苗質(zhì)量參差不齊、注射劑量不足或運輸保存不當(dāng)都可以影響豬瘟的免疫效果。不同的疫苗生產(chǎn)工藝不同,生產(chǎn)出的疫苗質(zhì)量也有很大不同。根據(jù)疫苗病毒含量,決定免疫劑量,一般普通細胞苗都需要加倍到4~6倍免疫,成兔脾淋苗需要2頭份,豬瘟活疫苗(傳代細胞源)使用1頭份。

    疫苗運輸和保存對疫苗品質(zhì)影響很大,豬瘟弱毒疫苗需要在-15℃條件下保存、運輸,并嚴(yán)禁反復(fù)凍融。豬瘟疫苗-15℃條件下保存有效期為1年;0℃~8℃冷暗干燥處保存有效期為6個月;8℃~25℃條件下保存有效期為10 d。保存使用過程中條件不合格都會影響疫苗效果。

    (三)免疫程序不合理

    疫苗免疫比較混亂,沒有科學(xué)合理地制定免疫程序,導(dǎo)致豬瘟免疫效果不好。在生產(chǎn)實踐中,豬瘟的免疫必須依據(jù)豬體的抗體變化規(guī)律實施免疫,母源抗體水平的高低和豬體持續(xù)帶毒情況都會干擾疫苗的免疫效果。但實際上很多養(yǎng)豬企業(yè)并沒有認真的考慮這些因素,盲目制定免疫程序。

    (四)豬瘟低毒力毒株的持續(xù)感染

    在國內(nèi)很多豬場的種豬群中,母豬帶毒但不表現(xiàn)癥狀是一種相當(dāng)普遍的現(xiàn)象。有些豬群的帶毒比例很高,甚至達到了30%。這些帶毒母豬外表正常,但是豬瘟病毒可以通過胎盤感染仔豬,導(dǎo)致帶毒母豬生下的仔豬帶毒率高達100%。因此,帶毒母豬生下的仔豬由于在胎盤內(nèi)接觸豬瘟野毒,從而對豬瘟病毒產(chǎn)生先天性免疫耐受。此類仔豬免疫疫苗后不能產(chǎn)生有效的豬瘟抗體,甚至?xí)驗槊庖哓i瘟造成應(yīng)激而發(fā)生其他疾病。國外試驗也證實,先使豬感染野毒,在1、2和4 d后再免疫C株疫苗,不能起到任何的保護作用。因此,要想控制好豬瘟必須先從種豬著手,要密切監(jiān)測種豬群的帶毒情況。

    (五)免疫抑制性疾病的影響

    豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒(PCV-2)等病毒的感染或霉菌毒素中毒,都可以抑制了機體的免疫應(yīng)答能力,造成豬瘟免疫水平低下。PRRSV所引起的最顯著病理變化是嚴(yán)重損傷肺泡巨噬細胞,造成其大量破壞,并伴有循環(huán)淋巴細胞及黏膜纖毛清除系統(tǒng)的破壞,可以抑制機體的免疫應(yīng)答能力,造成對豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答能力下降。S.Suradhat等試驗證實感染PRRSV后免疫豬瘟疫苗,不能抵抗豬瘟強毒的攻擊,而未感染PRRSV的對照豬則可以抵抗。當(dāng)發(fā)生多病原的同時感染,機體抵抗力和免疫應(yīng)答能力勢必降低,在一定程度上影響豬瘟的免疫效果。

    五、豬瘟凈化技術(shù)

    近些年來,豬瘟在亞洲、歐洲、南美洲等地區(qū)呈現(xiàn)復(fù)發(fā)的趨勢,一些宣布已消滅豬瘟的國家(如法國、荷蘭、德國、比利時等)又見豬瘟復(fù)發(fā)的報道。并且豬瘟的流行趨勢發(fā)生了很大變化,一些地區(qū)典型豬瘟和非典型豬瘟共存,隱性感染和持續(xù)感染并現(xiàn),且免疫失敗的現(xiàn)象時有發(fā)生,這種新的流行形式給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了新的威脅。在我國不同地區(qū)的養(yǎng)殖水平和養(yǎng)殖模式不同,尤其在中小型養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶,豬瘟的防控與凈化面臨巨大的挑戰(zhàn)。

    豬瘟凈化方案的成功實施和凈化結(jié)果的維持是建立在:(1)敏感、特異的豬瘟檢測方法;(2)穩(wěn)定、高效的豬瘟疫苗和合理的免疫程序;(3)切實可行且長期堅持的衛(wèi)生防疫制度和規(guī)范的飼養(yǎng)管理體系。

    (一)豬瘟檢測方法

    豬瘟的實驗室診斷方法可以分為抗體檢測和抗原檢測兩大類。

    抗體檢測是疫苗免疫效果評價的主要方法,酶聯(lián)免疫吸附試驗(簡稱ELISA)以其操作簡便、敏感、檢測樣本量大等優(yōu)點成為最主要手抗體檢測方法。目前使用的抗體間接ELISA方法和抗體阻斷ELISA檢測方法,適用于田間大規(guī)模免疫抗體水平普查,商品豬場免疫效果評價和不同免疫水平豬群的分群。其它的抗體檢測方法包括間接血凝試驗、瓊脂擴散試驗、免疫膠體金快速檢測試驗等。

    抗原檢測方法主要有免疫熒光試驗(FA)和反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)。免疫熒光試驗是最常用的豬瘟抗原檢測方法,用脾、腎、淋巴結(jié)、扁桃體制備冰凍切片或抹片,經(jīng)熒光抗體染色后檢測抗原,該方法的首選病料是扁桃體,因為扁桃體是豬瘟病毒最早的增殖部位。RT-PCR檢測方法目前也已經(jīng)廣泛用于豬瘟病毒的實驗室檢測,包括常規(guī)RT-PCR、套式RT-PCR、熒光定量RT-PCR(Real-timeRTPCR)。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所和軍事獸醫(yī)研究所研制的通用熒光RT-PCR試劑盒,為非典型、溫和型及持續(xù)感染CSFV的檢測提供一個快速、敏感、準(zhǔn)確的方法,是適用于種豬凈化的可靠手段。另據(jù)報道,套式RT-PCR(巢式PCR),其敏感性比普通RT-PCR高出100倍,而且特異性很高,應(yīng)用前景廣闊。

    (二)豬瘟疫苗和免疫程序

    1.豬瘟疫苗。

    現(xiàn)有國內(nèi)市場上主要有三種豬瘟弱毒疫苗,即豬瘟牛睪丸原代細胞疫苗(原代細胞苗)、豬瘟兔脾淋組織疫苗(脾淋組織苗)和豬瘟豬睪丸傳代細胞苗(傳代細胞苗)。三類疫苗使用的豬瘟疫苗種毒均為豬瘟兔化弱毒疫苗C株,該疫苗免疫接種豬可完全有效地抵抗各種我國流行的不同基因亞群豬瘟野毒株的攻擊。三類疫苗區(qū)別主要在種毒的培養(yǎng)繁殖系統(tǒng)上,成兔脾淋苗使用成年新西蘭大耳白兔增殖豬瘟疫苗種毒;牛睪丸細胞苗使用犢牛睪丸細胞增殖;而豬瘟傳代細胞苗使用豬源睪丸傳代細胞系增殖。

    豬瘟疫苗質(zhì)量不高的主要原因是生產(chǎn)工藝不過關(guān)和疫苗生產(chǎn)的原材料質(zhì)量存在問題,導(dǎo)致豬瘟細胞疫苗病毒滴度不高和BVDV(牛病毒性腹瀉病毒)污染。和歐洲等發(fā)達國家豬瘟疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)相比,我國豬瘟疫苗原有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)只有歐盟標(biāo)準(zhǔn)的約1/4。因此,疫苗品質(zhì)是有效預(yù)防控制豬瘟的關(guān)鍵,要選擇正規(guī)生產(chǎn)廠家,相對穩(wěn)定的產(chǎn)品。

    2.免疫程序。

    免疫程序的制定與豬群的帶毒情況、疫苗種類和飼養(yǎng)管理模式有關(guān)。種豬群作為免疫重點,通過監(jiān)測種豬體內(nèi)抗體的變化,當(dāng)抗體保護率水平在70%以下時,種豬群進行免疫;仔豬通過初乳獲得了母源抗體,母源抗體在早期對初生仔豬有保護作用,通過仔豬體內(nèi)母源抗體的監(jiān)測確定首免日齡,按照同樣的原則制定二免、三免時間。參考的免疫程序:豬瘟陰性場:公母豬按一年三次普免豬瘟疫苗2頭份/頭;仔豬在21日齡接種豬瘟疫苗1頭份/頭,隨后在60、100日齡分別接種豬瘟疫苗1.5頭份/頭。豬瘟陽性場:公母豬按一年三次普免豬瘟疫苗2頭份/頭;新生仔豬零時免疫豬瘟苗1頭份/頭,隨后在60、100日齡分別接種豬瘟疫苗1.5頭份/頭。

    (三)豬瘟凈化方案

    1.凈化方法。

    (1)檢測淘汰法:即反復(fù)多次對全場種豬群逐頭進行檢測,淘汰陽性豬只,再引進陰性后備種豬擴群,是目前豬場最常用的凈化方法。該方法對檢測手段要求高,必須對健康狀態(tài)下低帶毒量豬敏感性高。

    (2)后代隔離法:仔豬提早斷奶,然后將仔豬轉(zhuǎn)移到“無特定病原的清潔區(qū)”內(nèi),進行人工飼養(yǎng)。該方法可阻止多種傳染因子的傳播,有利于多種疾病的凈化,但對飼養(yǎng)管理要求高。目前,也有豬場在新場建設(shè)時采用該方法建立健康繁殖群體,并取得了較好的效果。

    2.具體凈化方案。

    (1)種豬場凈化標(biāo)準(zhǔn):以種豬場為單位,連續(xù)2年無臨床病例,免疫抗體合格率多85%;病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果連續(xù)1年以上無陽性。

    (2)種豬場凈化技術(shù)路線:按照“檢測→淘汰/分群→免疫→檢測→淘汰→凈化”的程序,采取對野毒感染豬群進行撲殺或淘汰,對假定陰性豬群實施高密度免疫,同時加強消毒和提高綜合飼養(yǎng)管理水平實施豬瘟凈化。

    (3)凈化檢測方法:病原檢測可用免疫熒光試驗或RT-PCR,該方法適用于扁桃體和血清樣品的檢測??贵w檢測可用ELISA,如用IDEXX的ELISA試劑盒檢測豬瘟抗體,阻斷率低于50%的種豬用豬瘟疫苗補充免疫一次,在免疫后6~8周再次采樣進行檢測,所有抗體水平達到阻斷率50%以上的種豬保留,抗體水平在補免后仍未達到理想抗體標(biāo)準(zhǔn)則淘汰。

    (4)凈化步驟:建議在種豬群豬瘟病毒感染率<10%的條件下實施凈化。

    ①首次檢測:對核心群、后備群所有種豬進行病原和抗體檢測。后備群轉(zhuǎn)為生產(chǎn)群前再次進行病原和抗體檢測,病原學(xué)檢測陰性且免疫抗體合格者留作種用。

    ②撲殺/隔離、免疫:病原檢測陽性豬進行撲殺和無害化處理。對病原檢測陰性、群體免疫抗體合格率多85%的豬群,個體免疫抗體合格的豬留作種用,隔離個體免疫不合格的豬并進行加強免疫。對病原檢測陰性、群體免疫抗體合格率<85%的豬群,全群加強免疫一次。

    ③二次檢測:間隔3個月再次對核心群、后備種豬群以及免疫后的隔離種豬群進行病原和免疫抗體檢測。病原學(xué)檢測陰性且免疫抗體合格的豬可留作種用。

    ④撲殺/淘汰:二次檢測病原學(xué)陽性豬進行撲殺和無害化處理;對病原學(xué)檢測陰性但連續(xù)2次免疫抗體不合格的豬進行淘汰。

    ⑤再次檢測:對連續(xù)2次病原學(xué)檢測結(jié)果均為陰性的豬,每6個月進行一次抽檢,每次每群抽檢數(shù)量30~60頭;不足30頭者全部檢測。凡出現(xiàn)病原學(xué)陽性個體者對全群進行普檢,并撲殺陽性豬;凡病原檢測陰性的豬群,免疫抗體合格的豬繼續(xù)留作種用,免疫抗體不合格的豬參照②“撲殺/隔離、免疫”的相關(guān)要求進行處置。

    ⑥結(jié)果判定:連續(xù)2次病原檢測結(jié)果均為陰性且免疫抗體合格率多85%,該豬群為凈化豬群;否則按照凈化步驟循環(huán)進行。每次樣品的采集、檢測、陽性豬的處理均應(yīng)在10天內(nèi)完成。

    (5)凈化效果的維持:

    ①管理嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生防疫制度,全面做好清潔和消毒;實行人員進出控制隔離制度;規(guī)范飼養(yǎng)管理行為。

    ②免疫種豬場堅持免疫接種,嚴(yán)格遵循《國家動物疫病強制免疫計劃》的要求對豬群實施免疫。免疫抗體合格率達到國家規(guī)定的要求。

    ③持續(xù)監(jiān)測凈化種豬群建立后,每6個月進行一次病原和免疫效果監(jiān)測,每次每群抽檢30~60頭,不足30頭者全部檢測,以持續(xù)維持凈化豬群的健康狀態(tài)。

    總之,CSF困擾我國養(yǎng)豬業(yè)已經(jīng)半個多世紀(jì),在我國目前豬病流行狀態(tài)下,在規(guī)模化豬場和部分區(qū)域開展CSF的凈化是完全可行的。要在全國范圍內(nèi)逐步真正實現(xiàn)防制CSF的目的,除了技術(shù)手段不斷提高外,還需要有強有力的國家政策、法規(guī)的支持,制訂完整系統(tǒng)的CSF防制工作計劃。

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