規(guī)模養(yǎng)豬場免疫抑制病發(fā)病機(jī)理及綜合防控技術(shù)的研究

齊 軼　王海麗　劉承軍　馬考成

（①山東省東營市畜牧獸醫(yī)局　257091?、诹某锹殬I(yè)技術(shù)學(xué)院　山東 聊城③山東省聊城市動物醫(yī)院）

衛(wèi)生檢疫

規(guī)模養(yǎng)豬場免疫抑制病發(fā)病機(jī)理及綜合防控技術(shù)的研究

齊 軼①王海麗②*劉承軍③馬考成①

（①山東省東營市畜牧獸醫(yī)局257091②聊城職業(yè)技術(shù)學(xué)院山東 聊城③山東省聊城市動物醫(yī)院）

PRRSV、PCV2、霉菌毒素都能引起豬免疫抑制，PRRSV可干擾豬免疫因子的合成、促進(jìn)PAM及淋巴組織中淋巴細(xì)胞凋亡，PCV2可抑制淋巴細(xì)胞激活和增殖、降低PAM吞噬功能、引起豬淋巴細(xì)胞耗竭和淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生變化，霉菌毒素可造成豬免疫器官發(fā)生病變甚至萎縮、抑制T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖反應(yīng)且誘導(dǎo)其凋亡、引起豬合成免疫球蛋白和抗體減少。加強(qiáng)飼養(yǎng)、建立微生物安全制度、嚴(yán)格馴化、科學(xué)免疫及科學(xué)使用藥物是應(yīng)對豬場免疫抑制的有效措施。免疫抑制是指動物免疫系統(tǒng)受到損傷，導(dǎo)致機(jī)體暫時(shí)性或持久性的發(fā)生免疫應(yīng)答障礙。致病因素主要是通過損傷動物機(jī)體免疫器官或者免疫細(xì)胞組織機(jī)構(gòu)，抑制或者阻斷病原呈遞，誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡，抑制免疫細(xì)胞、免疫因子及抗體的形成等方面造成免疫抑制。豬群發(fā)生免疫抑制的主要表現(xiàn)為商品豬發(fā)病不斷，死亡率較正常水平明顯偏高，豬群抗病能力降低，同一時(shí)期的豬群發(fā)生多種疾病，血清抗體檢測合格率偏低等現(xiàn)象。多種因素可造成豬發(fā)生免疫抑制，其中是豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型、霉菌毒素被認(rèn)為是豬發(fā)生免疫抑制的主要原因。

1　豬繁殖與呼吸綜合癥病毒對豬造成免疫抑制的機(jī)理

大量研究表明，豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）可與多種病原體發(fā)生協(xié)同，研究發(fā)現(xiàn)，豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）可增加豬對豬流感病毒（SIV）、豬呼吸道副粘病毒、豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）三種病毒易感性。

1.1PRRSV對機(jī)體合成炎性因子的干擾攻毒試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，PRRSV感染的特征之一就是感染豬的肺內(nèi)炎性銀子表達(dá)不明顯，尤其表現(xiàn)為Ⅰ型干擾素、白細(xì)胞介素-1和腫瘤壞死銀子-α合成不足。I型干擾素作為動物非特異性免疫應(yīng)答的組要組成部分，具有誘導(dǎo)相關(guān)免疫細(xì)胞表面產(chǎn)生抗病毒蛋白，增強(qiáng)免疫活性的功能，起到抗病毒的作用。研究表明，PRRSV能明顯抑制機(jī)體產(chǎn)生Ⅰ型干擾素，導(dǎo)致免疫細(xì)胞活性受到限制。Suradhat等檢測PRRSV感染豬支氣管灌洗液時(shí)發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞介素-10（IL-10）的表達(dá)量顯著提高，并認(rèn)為PRRSV可通過提高外周血單核細(xì)胞中IL-10mRNA表達(dá)量來參與調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。IL-10分泌增多和Ⅰ型干擾素減少則表現(xiàn)為非特異性免疫抑制，這有利于其他病原微生物對豬群造成感染和傳播。

1.2PRRSV引起肺巨噬細(xì)胞死亡POL等第一次對PRRS對豬的致病機(jī)理進(jìn)行論證的時(shí)候發(fā)現(xiàn)，豬巨噬細(xì)胞（PAM）和支氣管上皮細(xì)胞是PRRSV感染宿主的主要靶細(xì)胞。PAM和單核細(xì)胞對細(xì)菌和病毒具有吞噬的作用。并且這種吞噬作用是病毒感染后機(jī)體只管重要的免疫應(yīng)答反應(yīng)。在體外試驗(yàn)中，運(yùn)用PRRSV感染PAM時(shí)發(fā)現(xiàn)，PRRSV可使培養(yǎng)液中PAM在攻毒后24h內(nèi)迅速凋亡，PRRSV 科研可引起溶解性抑制因子的缺失，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞吞噬能力降低。PAM的損傷必然導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的下降，為呼吸道繼發(fā)病原微生物感染創(chuàng)造機(jī)會。

1.3PRRSV對淋巴組織的影響PRRSV具有嗜巨噬細(xì)胞的特性，淋巴結(jié)和脾臟含有大量游離和固定的巨噬細(xì)胞。當(dāng)PRRSV感染豬后首先PAM和肺內(nèi)皮細(xì)胞巨噬崩解，釋放出的病毒借助血液及淋巴循環(huán)到全身淋巴結(jié)和脾臟。進(jìn)入淋巴結(jié)和脾臟的PRRSV可引起廣泛性的血管炎和炎性細(xì)胞聚集，被其他巨噬細(xì)胞吞噬，致使其他巨噬細(xì)胞崩解，最終導(dǎo)致外周淋巴組織器官出現(xiàn)壞死性炎癥。由于淋巴結(jié)、淋巴小結(jié)和副皮質(zhì)區(qū)及脾白髓和紅髓都受到廣泛性損傷，致使機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫功能損傷。

2　豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）對豬造成免疫抑制的作用機(jī)理

一般認(rèn)為，豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）是引起仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥（PMWS）的主要病原體，其發(fā)生的有平常主要為PCV2使仔豬淋巴組織、肺和肝出現(xiàn)以細(xì)胞浸潤為特征的炎性病變，當(dāng)病變不能進(jìn)行代償與修復(fù)時(shí)，機(jī)體代謝機(jī)能出現(xiàn)障礙最終導(dǎo)致PMWS，PMWS組織學(xué)上另外的顯著特征病變是淋巴濾泡區(qū)減小或缺失，淋巴細(xì)胞減少。從組織學(xué)病變觀察得知，PCV2能導(dǎo)致患病豬發(fā)生免疫抑制。

2.1PCV2對機(jī)體淋巴細(xì)胞激活及增加抑制Darwich等通過檢測PCV2感染豬血清樣品時(shí)發(fā)現(xiàn)，PCV2可使感染豬的百細(xì)胞介素-8和IFN-γ產(chǎn)量與健康豬相比明顯下降，PCV2還可誘導(dǎo)單核細(xì)胞產(chǎn)生IL-10，抑制干擾素分泌INF-α間接影響樹突狀細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育成熟，最終導(dǎo)致DC的先天性免疫功能受到影響。PVC2還可在集體中其他單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞中存在，并引起機(jī)體對于抗原遞呈能力的降低。說明PCV2能抑制感染豬產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，參與免疫調(diào)節(jié)的細(xì)胞因子表達(dá)數(shù)量的改變使得PCV2感染后淋巴細(xì)胞不能有效激活或增殖，最終破壞免疫功能。

2.2PCV2對PAM功能的影響MCneilly等在體外培養(yǎng)的豬PAM中進(jìn)行Pcv2攻毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCV2感染后8天可降低PAM主要組織相容性方程基因-Ⅱ類抗原的表達(dá)，導(dǎo)致集體感染免疫反應(yīng)不能及時(shí)啟動，并且，PCV2對巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增生有明顯抑制作用。

2.3PCV2引起患豬淋巴細(xì)胞耗竭PCV2感染豬外周血液中B細(xì)胞和T 細(xì)胞數(shù)量較正常豬少，此為PCV2導(dǎo)致患病豬免疫抑制的另外一個(gè)主要原因。PCV2引發(fā)PMWS癥狀出現(xiàn)的根本原因是PCV2感染豬可誘導(dǎo)機(jī)體淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，尤其在感染初期，B細(xì)胞和T細(xì)胞減少更為顯著，患病豬器官逐漸表現(xiàn)為功能性障礙。研究表明，PMWS患病豬淋巴細(xì)胞減少的主要原因是PCV2可抑制淋巴細(xì)胞增殖。

2.4PCV2引起患豬淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生變化大量研究表明，自然或人工感染PCV2豬外周血液中的淋巴細(xì)胞亞群比例發(fā)生變化，Darwich等通過研究進(jìn)一步證明了PCV2具有降低患病豬外周血液中CD8+細(xì)胞和DP細(xì)胞比例的作用。CD8+細(xì)胞及DP細(xì)胞在機(jī)體免疫反應(yīng)中發(fā)揮著非常重要的作用，其減少必將影響機(jī)體的免疫應(yīng)答。

3　霉菌毒素對豬造成免疫抑制的作用原理

霉菌毒素作為霉菌的次級代謝產(chǎn)物，在自然系中種類繁多，目前發(fā)現(xiàn)300多種有各種毒性作用的霉菌毒素廣泛存在于食品和飼料原料中。霉菌毒素對豬的危害主要體現(xiàn)在對豬免疫系統(tǒng)的破壞及對免疫應(yīng)答的強(qiáng)烈抑制，主要表現(xiàn)為免疫蛋白和抗體水平的下降、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)損傷、細(xì)胞介導(dǎo)的免疫功能下降以及免疫器官發(fā)育異常等。有研究表明，黃曲霉毒素和T-2毒素可通過有 胸腺組織細(xì)胞DNA和RNA結(jié)合并抑制其繁殖，引起胸腺發(fā)育不良甚至萎縮。導(dǎo)致胸腺組織中淋巴細(xì)胞減少，且玉米赤霉烯酮可導(dǎo)致免疫器官實(shí)質(zhì)性損傷，抑制T、B淋巴細(xì)胞增殖，對集體造成免疫抑制。

4　豬場免疫抑制的應(yīng)對措施

可造成豬發(fā)生免疫抑制的因素眾多，包括物理環(huán)境因素、化學(xué)因素、營養(yǎng)及其他病原微生物等因素，涉及豬場的掛你、用藥和防疫等多哥方面。一般情況下，當(dāng)豬場發(fā)生免疫抑制時(shí)候，種母豬血清抗體水平下降，表現(xiàn)為仔豬出生后通過哺乳獲得的母源抗體保護(hù)力降低或保護(hù)時(shí)間縮短，導(dǎo)致仔豬發(fā)病率較正常水平高。此外，發(fā)生免疫抑制的懷孕母豬容易感染某些具有胎毒性的病原體如豬瘟病毒。為避免豬發(fā)生免疫抑制，必須做好以下幾點(diǎn)：

4.1提高豬場飼養(yǎng)管理水平保證豬舍適宜的通風(fēng)、溫度、濕度、養(yǎng)殖密度，夏季注意通風(fēng)降溫，冬季將強(qiáng)保溫工作，避免圈舍過于潮濕。保證豬群飲水清潔，特別是采用地下水飼喂的情況下，暴雨過后需在飲水中添加適量消毒藥。杜絕使用霉變飼料，在潮濕季節(jié)可在飼料中添加脫霉素。保證日糧營養(yǎng)全面和均衡，適當(dāng)補(bǔ)充微量元素。盡量為豬群飲食休息提供良好的環(huán)境，避免豬場因應(yīng)激產(chǎn)生免疫抑制。

4.2建立嚴(yán)格的微生物安全制度一般情況下，豬舍需每周交替使用不同的消毒劑消毒1～2次，消毒時(shí)應(yīng)保證衛(wèi)生死角的徹底消毒。豬場盡量避免外來人員進(jìn)入豬舍，外來人員進(jìn)入豬舍必須經(jīng)消毒、洗澡、更衣、隔離2～5天后方可進(jìn)入豬舍。豬場內(nèi)工作人員每次由生活區(qū)進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)前要經(jīng)過洗澡、更衣后方可進(jìn)入豬舍。

4.3及時(shí)隔離或者淘汰重大疫病患豬定期對豬場進(jìn)行重大一并抽樣檢測，及時(shí)預(yù)防、發(fā)現(xiàn)并處理豬場疾病的發(fā)生。當(dāng)發(fā)現(xiàn)豬場有疑似重大動物疫病時(shí)，為防止病原體傳播，應(yīng)盡早進(jìn)行隔離或淘汰處理，并對豬群進(jìn)行必要的緊急接種和藥物預(yù)防，最大限度避免一并所導(dǎo)致的豬場免疫抑制。

4.4嚴(yán)格執(zhí)行馴化工作為防止新引進(jìn)的豬群攜帶并傳播重大免疫抑制性疾病，新引進(jìn)的豬群必須在隔離區(qū)飼養(yǎng)2～3個(gè)月左右方可與原來的豬群混合飼養(yǎng)，切混群飼養(yǎng)前必須對新引進(jìn)的豬群根據(jù)豬場實(shí)際情況完成疫苗接種，馴化過程中要密切觀察整個(gè)豬群健康狀況，如遇發(fā)病，應(yīng)及時(shí)采取有效措施，帶豬群恢復(fù)后，再次開始馴化工作，嚴(yán)禁縮短馴化時(shí)間。

4.5科學(xué)制訂免疫程序豬場應(yīng)進(jìn)行血清課題檢測3～4次/年，根據(jù)血清抗體檢測結(jié)果調(diào)整或制定豬場免疫程序。在重大一并高發(fā)區(qū)，對相應(yīng)疾病疫苗及時(shí)接種。關(guān)于PRRS疫苗免疫，應(yīng)盡量使用弱毒疫苗免疫，一般情況下每年接種HP-PRRSV弱毒疫苗4次、口蹄疫4次、豬瘟3～4次。為減少疫苗接種產(chǎn)生的應(yīng)激，防止疫苗接種可能產(chǎn)生的免疫抑制，應(yīng)盡量避免同時(shí)接種多種疫苗，接種前后在飲水中添加電解多維等。

4.6科學(xué)使用藥物有些藥物如地塞米松等糖皮質(zhì)激素類藥物、四環(huán)素類藥物，即使在質(zhì)量量水平也可在有一程度上造成豬免疫損傷。豬場大劑量、長時(shí)間使用某種抗生素導(dǎo)致病原微生物耐藥基因產(chǎn)生，且該情況下更容易對豬群造成免疫器官損傷，導(dǎo)致免疫抑制的發(fā)生。豬場應(yīng)避免長時(shí)間使用某一種抗生素，正確的方法是將多種抗生素交替使用。適時(shí)向日糧中添加微生態(tài)制劑，改善豬群亞健康，減少豬場抗生素使用頻率及使用量。

中圖分類號：S852.4

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C

文章編號：1007-1733（2015）04-0042-02

收稿日期：（2015-01-20）

基金項(xiàng)目：山東省高等學(xué)校科技發(fā)展計(jì)劃（課題編號：J14LF56）