乙肝相關(guān)肝纖維化發(fā)病機(jī)制研究新進(jìn)展

梁 真劉鋼濤藍(lán)柏釗曾冬娟沈 震劉旭東

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001；2.湖北中醫(yī)院，湖北 黃石 435000；3.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530011）

乙肝相關(guān)肝纖維化發(fā)病機(jī)制研究新進(jìn)展

梁 真1劉鋼濤1藍(lán)柏釗1曾冬娟1沈 震2劉旭東3

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530001；2.湖北中醫(yī)院，湖北 黃石 435000；3.廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西 南寧 530011）

肝纖維化是各種慢性肝病進(jìn)展為肝硬化的早期病理改變，早期發(fā)現(xiàn)并積極干預(yù)對能否扭轉(zhuǎn)肝纖維化至關(guān)重要。乙肝病毒感染及多種細(xì)胞因子對肝纖維化甚至肝硬化的發(fā)生起著舉足輕重的作用，其致病機(jī)制復(fù)雜，文章就常見相關(guān)因素致使肝纖維化機(jī)制做一綜述。

乙肝；肝纖維化；發(fā)病機(jī)制；綜述

一直以來，國內(nèi)外的學(xué)者普遍認(rèn)為肝纖維化的本質(zhì)是各種致病因素導(dǎo)致肝星狀細(xì)胞的激活，并通過其自分泌和旁分泌的機(jī)制促進(jìn)了炎癥介質(zhì)的釋放和細(xì)胞外基質(zhì)的大量沉積的病理改變，最終將形成肝硬化[1]。乙型肝炎病毒(Hepatitis b virus,HBV)感染是導(dǎo)致肝纖維化的主要病因之一，而肝纖維化也是慢性乙型肝炎發(fā)展為肝硬化的重要中間環(huán)節(jié)，最近的流行病學(xué)調(diào)查表明,我國有近2000萬的乙肝感染者，每年因乙肝病毒感染所致的肝損傷包括肝衰竭、肝硬化以及肝細(xì)胞癌而死亡的約有100萬[2]。因此，延緩或逆轉(zhuǎn)肝纖維化進(jìn)程是目前治療乙型肝炎防治肝硬化的關(guān)鍵[3]。肝纖維化的發(fā)病的確切機(jī)制至今尚未完全明了，本文就近年來有關(guān)乙肝相關(guān)肝纖維化的發(fā)病機(jī)制研究新進(jìn)展進(jìn)行了綜述。

1 乙型肝炎病毒可間接或直接促進(jìn)肝纖維化

慢乙肝患者HBsAg水平并不隨著肝纖維化加重的程度而升高，這可能是人體的機(jī)體免疫作用在清除體內(nèi)的HBV病毒的同時(shí)，也不可避免地對正常肝細(xì)胞產(chǎn)生免疫性損傷，進(jìn)而引發(fā)肝纖維化甚至肝硬化[4]。段惠春等[5]則認(rèn)為感染機(jī)體的HBV是通過誘導(dǎo)機(jī)體的免疫反應(yīng)間接損傷肝細(xì)胞的。包雙寶[6]也發(fā)現(xiàn)乙肝肝硬化患者中血清肝纖四項(xiàng)水平高低與血清所含HBVDNA無關(guān)。在細(xì)胞免疫引起的肝損傷發(fā)病機(jī)理中，肝細(xì)胞膜上HBcAg 是細(xì)胞免疫攻擊的靶抗原,HBcAg表達(dá)狀態(tài)與慢性乙肝肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展也有重要關(guān)系[5、7]。而乙肝病毒誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)也可能導(dǎo)致肝臟單核細(xì)胞升高，從而引發(fā)炎癥反應(yīng)[8]。

雖然大量文獻(xiàn)表明，HBV并不會(huì)直接導(dǎo)致肝細(xì)胞的損傷和肝纖維化的發(fā)生。但最近的研究也發(fā)現(xiàn)，HBV也可能直接作用于HSC促進(jìn)肝纖維化的發(fā)生[9]，盡管在HBeAb陽性的乙肝病毒攜帶者，他們的肝臟仍然檢測出低水平的膠原蛋白分泌，而且表現(xiàn)為肝損傷和纖維化活動(dòng)[10]。劉旭東等[11]探討乙肝表面蛋白HBs能否直接或者間接刺激肝星狀細(xì)胞分泌表達(dá)Ⅰ型膠原蛋白和α-SMA，通過體外共培養(yǎng)LX-2與HBs，MTT結(jié)果顯示HBs (10-50 ng/ml)與LX-2共培養(yǎng)能抑制LX-2增殖，而低濃度的HBs（0.5-5 ng/ml）對LX-2增殖沒有影響。ELISA檢測LX-2/ HepG2與HBs共培養(yǎng)的Ⅰ型膠原蛋白和α-SMA，兩組結(jié)果無差異，但是LX-2、HepG2及HBs共培養(yǎng)的Ⅰ型膠原蛋白明顯增高，因此認(rèn)為HBs能夠直接刺激LX-2增殖，并且通過肝細(xì)胞HepG2產(chǎn)生TGF-β1的作用，產(chǎn)生Ⅰ型膠原蛋白，這或許解釋了乙肝相關(guān)蛋白在乙肝肝纖維化進(jìn)程的機(jī)制。

2 細(xì)胞因子與乙肝相關(guān)肝纖維化的關(guān)系

2.1轉(zhuǎn)化生長因子

TGF-β1是目前為止致使纖維化最強(qiáng)的細(xì)胞因子，在肝纖維化過程中的生物活性主要表現(xiàn)在以下幾點(diǎn)：（1）促進(jìn)ECM 的合成和抑制 ECM 降解；（2）對 HSC 的激活；（3）調(diào)節(jié)細(xì)胞周期[12]。孫書書等[13]采用ELISA檢測 62 例慢性乙型肝炎及肝硬化患者血清中 TGF-β1與四項(xiàng)肝纖維化指標(biāo)水平，結(jié)果表明，與正常對照組相比，TGFβ1在CHB 組、LC組高表達(dá)，且TGF－β1與 PCⅢ、Ⅳ－C、LN、HA 水平均呈正相關(guān)，P＜0. 05( r值分別為0.89、0.81、0.84、0.92)。劉蓮等[14]對120 例慢性乙型肝炎患者進(jìn)行肝穿刺組織活檢，并進(jìn)行半定量分析肝組織中 TGF－β1和 Leptin表達(dá)水平，研究結(jié)果可以看出肝組織損傷時(shí)可引起TGF-β1分泌增加，分泌的TGF-β1通過TGF-β1/Smad途徑進(jìn)一步激活HSC，促進(jìn)HSC表型向肌成纖維樣母細(xì)胞轉(zhuǎn)化，從而刺激ECM的合成與沉積。此外，TGF-β1產(chǎn)生的量可能與基因調(diào)控有關(guān)，在氣滯血瘀組中 TGFβ1密碼子 10LeuLeu基因型頻率為47.5%，相對而言，非肝硬化組和對照組LeuLeu基因型分別為25%和20%，氣滯血瘀組與其余兩組LeuLeu分布有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），肝纖維化氣滯血瘀型密碼子 10基因型以LeuLeu為主可能更易發(fā)展成肝硬化[15]。

2.2堿性成纖維細(xì)胞生長因子

堿性成纖維細(xì)胞生長因子（b-FGF）在由HBV 感染引發(fā)的肝纖維化進(jìn)程中的作用日益受到關(guān)注，可以調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的生長分化、遷移及凋亡,促進(jìn)HSC的活化，進(jìn)而促進(jìn)ECM合成增加，導(dǎo)致肝纖維化的發(fā)生及進(jìn)展[16、17]。研究表明[18],b-FGF水平的升高參與 ECG的產(chǎn)生。楊靜[19]等研究乙肝患者 TGF-β及 b-FGF 水平與肝纖維化程度相關(guān)性分析，結(jié)果顯示隨著慢性乙型肝炎的進(jìn)展，各組b-FGF、TGF-β1、HA、LN均呈現(xiàn)出顯著增高的趨勢，（P＜0.05），LN 與 ALT、AST及 b-FGF、TGF-β1 呈相關(guān)性（P＜0.05）。

2.3血小板衍生生長因子-BB

HSC在各種慢性肝病演變?yōu)楦卫w維化的過程中同樣發(fā)揮著重要作用，而最近的研究表明，血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)對HSC有強(qiáng)烈的趨化作用，是肝星狀細(xì)胞活化標(biāo)志之一，肝臟受到刺激發(fā)生炎癥后，浸潤的炎性細(xì)胞分泌PDGF-BB，介導(dǎo)肝臟完成損傷-修復(fù)反應(yīng)，促進(jìn)纖維化[20]。CHB患者血清PDGF-BB水平與肝功能、血清肝纖維化指標(biāo)均顯著相關(guān)（P＜0.01），血清PDGF-BB水平隨著肝功能損害程度和纖維化程度而加重而升高[21]。血小板同樣參與了肝纖維化的形成過程，當(dāng)肝細(xì)胞壞死時(shí)，激活壞死區(qū)聚集的血小板，釋放TGF-β1[22]。

2.4IP10

CXCR3是目前發(fā)現(xiàn)的IP10的唯一受體，兩者的相互作用在CHB免疫病理損傷的發(fā)生發(fā)展中起重要作用[23]。乙肝病毒致使肝臟被大量炎癥細(xì)胞浸潤，使得CXCR3和IP 10較高水平表達(dá)[24、25]，CHB患者肝組織高表達(dá)的 IP10可通過趨化激活的單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞等向肝臟組織定向遷移，在感染局部發(fā)揮輔助CTL及活化其他免疫細(xì)胞作用，同時(shí)活化細(xì)胞又分泌更多趨化因子，進(jìn)一步介導(dǎo)淋巴細(xì)胞在肝臟內(nèi)聚集，通過分泌損害肝臟的炎癥遞質(zhì)造成組織損傷，參與肝臟炎性反應(yīng)及慢性化[23]。

2.5白細(xì)胞介素

乙肝病毒感染的免疫機(jī)制中，促進(jìn)免疫活化和誘導(dǎo)免疫耐受的因子共同作用。目前普遍認(rèn)為HBV不直接對肝臟進(jìn)行損傷，而主要是通過細(xì)胞免疫清除，參與免疫應(yīng)答的免疫細(xì)胞會(huì)釋放多種炎癥因子，不間斷地刺激肝臟。IL-17作為是重要的促炎癥細(xì)胞因子，可能參與慢性HBV感染尤其是肝纖維化的發(fā)生過程,可通過激活多種免疫細(xì)胞釋放的炎癥介質(zhì)，作用于肝臟致使其發(fā)生反復(fù)炎癥損傷，最終肝臟功能下降[26-28]。陳捷等[29]采用酶聯(lián)免疫吸附法，檢測慢性HBV感染者血清中的IL-17、IL-23、TGF-β及IL-10水平，結(jié)果慢性乙型肝炎組與健康對照組相比，IL-17、IL-23、TGF-β無明顯差異，而IL-10顯著增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），并且高病毒載量組（HBV-DNA＞1×105）和高轉(zhuǎn)氨酶（ALT、AST＞40U/L）組的IL-10分別顯著高于低病毒載量組（HBV-DNA＜1×105)和低轉(zhuǎn)氨酶（ALT、AST≤40U/L）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），IL-10水平與HBV-DNA、AST、ALT和CCT均成正相關(guān)，說明在乙肝患者長期慢性感染中 IL-17和 IL-23 等細(xì)胞因子并沒有起主要作用，而IL-10這類負(fù)性的信號調(diào)節(jié)分子，在乙肝慢性化以及疾病進(jìn)展中起著關(guān)鍵作用。

3 其他相關(guān)因素

GLT25D1是以可溶性蛋白的形式定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的人類膠原β(1-O)半乳糖基轉(zhuǎn)移酶，最早由Schegg等通過親和層析和串聯(lián)質(zhì)譜法鑒定出的糖基轉(zhuǎn)移酶GT25家庭的成員之一，張仁雯等通過以GLT25D1為抗原進(jìn)行ELISA雙抗體夾心檢測其在 HBV 感染患者不同階段的表達(dá)差異，發(fā)現(xiàn)在HBV感染的肝病的進(jìn)展過程中，血清中GLT25D1的表達(dá)量與正常人相比有著顯著的變化（P＜0.0001），并且隨著肝纖維化程度的加重，血清GLT25D1的表達(dá)量亦隨之增加(P=0.0434)，它催化細(xì)胞外膠原的糖基化修飾該基因編碼蛋白的血清學(xué)水平與慢性HBV感染過程中纖維化程度有一定的相關(guān)性[30-32]。此外，邱秀芹等[33]采用放射免疫法及比色法探討慢性乙型肝炎致肝纖維化進(jìn)程中血清抗氧化水平的變化情況，結(jié)果肝硬化患者血清肝纖維化指標(biāo)均顯著高于正常健康人（P＜0.05），其中HA、LN、CⅣ也顯著高于慢性乙肝患者（P＜0.05）。肝病患者血清 GSH-Px、SOD、MDA、VE、VC 與健康人比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；肝硬化組血清 GSH-Px、SOD、MDA、VE與慢性乙肝組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這在一定程度上說明了肝病患者發(fā)生肝損傷及肝纖維化與其體內(nèi)氧化與抗氧化劑的平衡失調(diào)有關(guān)。

4 小結(jié)與展望

綜上所述，乙肝相關(guān)性的肝纖維化是肝臟在HBV刺激下發(fā)生炎癥損傷-修復(fù)反應(yīng)，肝星狀細(xì)胞激活后導(dǎo)致炎癥細(xì)胞的聚集以及多種細(xì)胞因子的分泌最終導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)過多沉積，進(jìn)而形成肝纖維化或肝硬化。目前認(rèn)為肝纖維化是可以逆轉(zhuǎn)的，而預(yù)防和延緩乙肝患者發(fā)展為肝纖維化甚至肝硬化除了積極抗病毒病因治療之外，進(jìn)一步深入探討HBV直接或間接激活肝星狀細(xì)胞以及相關(guān)的細(xì)胞因子的分子機(jī)制，可以為開發(fā)多位點(diǎn)靶向治療肝纖維化指明方向。

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New progress in the pathogenesis of hepatitis B related liver fibrosis

Liver fibrosis is a chronic liver disease progression to cirrhosis of the early pathological changes, early detection and active intervention of liver fibrosis is essential. Infection of hepatitis B virus and many kinds of cytokines play an important role in the pathogenesis of hepatic fibrosis and cirrhosis.

Hepatitis B; liver fibrosis; pathogenesis; summary

R512.6

A

1008-1151(2015)10-0078-03

2015-09-12

梁真（1989－），女（壯族），廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生，研究方向?yàn)楦尾》乐巍?/p>

劉旭東，供職于廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院。