五味子酚對血管性癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

鄧之榮++周世月++譚琳++王立++楊宏艷

摘 要：目的：研究五味子酚對血管性癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法：小鼠隨機分為假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg，ip）。采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法建立血管性癡呆模型，給藥2周后用Morris水迷宮測試小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果：五味子酚能明顯縮短癡呆小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程。結(jié)論：五味子酚可改善血管性癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

關(guān)鍵詞：五味子酚 血管性癡呆 學(xué)習(xí)記憶

中圖分類號：R749.16 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1674-098X（2015）01（a）-0026-01

血管性癡呆（vascular dementia，VD）是腦部機能減退而導(dǎo)致的一種認(rèn)知功能缺損的綜合征，主要與缺血性腦血管疾病有關(guān)。迄今為止，人類還未找到治療血管性癡呆癥的有效方法，且防治手段十分有限。雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎能很好的模擬腦缺血過程，是制備血管性癡呆癥的常用模型。本實驗通過行為學(xué)實驗觀察五味子酚對癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶的改善作用，觀察五味子酚對血管性癡呆的療效。

1 材料與方法

1.1 血管性癡呆模型復(fù)制方法

按文獻(xiàn)方法，將小鼠用水合氯醛（350 mg/kg，ip）麻醉，消毒，頸正中切口，分離雙側(cè)頸總動脈，各穿一絲線備用。用小鼠動脈夾夾住頸總動脈，阻斷血流15 min，并同時在距尾尖1 cm處剪斷放血約0.3 mL，熱凝止血。松開動脈夾灌注5 min后，再次阻斷血流，重復(fù)上述步驟2次，縫合皮膚，術(shù)后每日肌注青霉素0.2萬單位，連續(xù)3 d。假手術(shù)組只分離頸總動脈，穿絲線，但不阻斷血流，尾部不放血，觀察時間等與模型組相同。

1.2 動物分組與給藥

健康昆明小鼠，體重20～30 g，由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。隨機分為4組：假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg），每組15只動物。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2天，小鼠連續(xù)腹腔注射五味子酚7天后，開始造模。模型組（造模后腹腔注射生理鹽水，連續(xù)14 d）、五味子酚組（造模后五味子酚30 mg/（kg·d），100 mg/（kg·d），連續(xù)14 d）。造模2周后通過Morris水迷宮試驗對小鼠進行學(xué)習(xí)和記憶成績測試，觀察其行為學(xué)改變。

1.3 Morris水迷宮實驗

Morris水迷宮分兩部分，前五天進行定位航行試驗，第六天進行空間探索實驗。平臺放置于第二象限的中心，水面高出平臺1.0 cm。每只小鼠每天接受2次訓(xùn)練，分別從兩個不同的入水點開始，兩次訓(xùn)練間隔1 min，記錄小鼠找到平臺的時間（逃避潛伏期）和找到平臺的所經(jīng)路程。如果小鼠在120 s內(nèi)未找到平臺，則潛伏期以120 s計算?？臻g探索實驗中，移去平臺，將小鼠從平臺對角象限放入水中，自由游泳120 s，記錄小鼠在平臺所處象限停留的時間，用于測試小鼠對平臺空間位置的記憶能力。

2 結(jié)果

水迷宮實驗結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎的小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程明顯延長，兩組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001），表明小鼠學(xué)習(xí)記憶功能明顯損傷。而五味子酚在100 mg·kg-1劑量時，可顯著縮短小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程（P<0.01，P<0.05），表明五味子酚具有改善小鼠學(xué)習(xí)記憶的作用。見圖1，A圖是五味子酚對小鼠到達(dá)平臺時間（s）的影響；B圖是五味子酚對小鼠到達(dá)平臺游泳路程（cm）的影響。模型組與對照組相比，###P<0.001；五味子酚藥物組與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

血管性癡呆是發(fā)展中國家的人得癡呆癥的首要原因，慢性腦缺血是研究血管性癡呆發(fā)病機理的重要組成部分，可導(dǎo)致持久性認(rèn)知損傷。學(xué)習(xí)記憶障礙是人類血管性癡呆早發(fā)癥狀之一，Morris水迷宮是檢測實驗動物學(xué)習(xí)記憶能力的重要指標(biāo)。本實驗應(yīng)用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎制備血管性癡呆的動物模型，用Morris水迷宮觀察了五味子酚對癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。實驗結(jié)果表明：與空白組相比，模型組動物找到平臺的潛伏期和游泳路程明顯延長，出現(xiàn)明顯的空間學(xué)習(xí)記憶障礙，提示模型制備成功。與模型組相比，五味子酚可明顯縮短小鼠找到平臺的潛伏期和游泳路程，顯著改善癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

五味子酚是從中藥五味子中提取的木脂素類成分之一。文獻(xiàn)報道五味子酚具有顯著的抗氧化活性，對氧化低密度脂蛋白（ox- LDL）引起的神經(jīng)細(xì)胞損傷具有明顯的保護作用[1]。其機制包括維持細(xì)胞內(nèi)抗氧化成分谷胱甘肽水平、清除氧自由基、抑制凋亡信號通路的重要信號分子細(xì)胞色素C的釋放。五味子酚對血管性癡呆的治療作用可能與其抗氧化、清除氧自由基、減輕神經(jīng)元的氧化應(yīng)激損傷和凋亡有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

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