乙型肝炎前S1、S2抗原與HBV-DNA的相關(guān)性分析

黃艷萍，祝 峰，王新元，鄒皓琳，許 諾

乙型肝炎前S1、S2抗原與HBV-DNA的相關(guān)性分析

黃艷萍，祝 峰，王新元，鄒皓琳，許 諾

目的 對(duì)比分析乙型肝炎(乙肝)前S1、S2抗原和HBV-DNA的相關(guān)性，探討乙肝前S1、S2抗原的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 隨機(jī)選取乙肝患者420例，采用ELISA法對(duì)前S1、前S2抗原進(jìn)行檢測(cè)，采用熒光定量PCR對(duì)HBV-DNA進(jìn)行檢測(cè)，從血清學(xué)標(biāo)志類型、HBV-DNA載量和HBV感染類型角度對(duì)HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 乙肝大三陽(yáng)患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽(yáng)性率分別為98.48%、95.45%、100.0%；小三陽(yáng)患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽(yáng)性率分別為53.25% 、45.45% 、46.75%。HBsAg(+)HBcAb(+)患者乙肝前S1、S2抗原和HBV-DNA陽(yáng)性率分別為53.75%、43.28%、44.78%。在高HBV-DNA載量組中乙肝前S1、S2抗原檢出率較高。結(jié)論 乙肝前S1、S2抗原與HBV-DNA有較好的相關(guān)性，可作為反映病毒感染與復(fù)制的指標(biāo)。

前S1抗原；前S2抗原；HBV-DNA

病毒性肝炎是由多種病毒引起的以肝臟損害為主的一組全身性傳染病[1,2]，全球約3/4的肝細(xì)胞癌和1/3的肝硬化與乙肝病毒(HBV)感染有關(guān)[3]。文獻(xiàn)[4]報(bào)道，慢性HBV感染是肝細(xì)胞癌最重要的病因，其先進(jìn)展為肝硬化、肝壞死，最終發(fā)展為肝癌。肝炎是嚴(yán)重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種疾病，有1.2億人為慢性HBV攜帶者[5]。故早診斷、早治療成為研究熱點(diǎn)。HBV-DNA常作為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)HBV感染最敏感、最特異的指標(biāo)，但文獻(xiàn)[6]報(bào)道，在阿瓦士、伊朗等國(guó)家，HBV感染者血清HBsAg檢測(cè)為陰性，這成為HBV在整個(gè)社會(huì)傳播的潛在危險(xiǎn)因素。前S1抗原和前S2抗原均是HBV復(fù)制的指標(biāo)，本研究旨在探討前S1、S2抗原蛋白與HBV-DNA的關(guān)系及其聯(lián)合檢測(cè)的臨床價(jià)值，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 收集本院2013-09至2014-09門診及住院乙肝患者420例，年齡18～65歲，男283例，女137例。

1.2 試劑與方法 乙肝五項(xiàng)定性、乙肝前S1抗原和前S2抗原用ELISA方法檢測(cè)，試劑分別采用上?？迫A生物試劑盒和北京貝爾生物試劑盒。HBV-DNA用熒光定量PCR法檢測(cè)，分別用RT-6500酶標(biāo)儀和美國(guó)PE57700熒光PCR檢測(cè)儀進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)方法均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。結(jié)果分析采用定性方式(拷貝數(shù)<103/ml為陰性，>103/ml為陽(yáng)性)，根據(jù)乙肝感染的不同模式，不同HBV-DNA載量，不同HBV感染類型分別分組，比較各組前S1、S2抗原和HBV DNA陽(yáng)性率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各組檢測(cè)指標(biāo)的陽(yáng)性率比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 乙肝感染不同模式比較 乙肝感染不同模式下，HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

表1 乙肝感染者不同模式下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果 (n；%)

2.2 不同HBV-DNA載量比較 隨HBV-DNA載量的增高，乙肝前S1、S2抗原陽(yáng)性率也逐漸提高。其中，高HBV-DNA載量(>107和105～107)組乙肝前S1、S2抗原單獨(dú)檢測(cè)的陽(yáng)性率，與兩者同時(shí)陽(yáng)性的概率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。低HBV-DNA載量(103～105和<103)組，乙肝前S1、S2抗原的陽(yáng)性率與其兩者同時(shí)陽(yáng)性的概率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。

表2 乙肝感染者不同HBV-DNA載量下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果 (n；%)

2.3 不同疾病種類比較 急、慢性肝炎和HBsAg攜帶者中乙肝前S1、S2抗原陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；肝硬化乙肝前S1、S2抗原陽(yáng)性率與HBsAg攜帶者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，表3)。

表3 乙肝感染者不同HBV感染類型前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果 (n；%)

3 討 論

前S1抗原是急性病毒性肝炎早期感染的標(biāo)志，前S蛋白參與HBV的組裝、分泌和侵入肝細(xì)胞的過(guò)程。文獻(xiàn)[7]報(bào)道，病毒附著于肝細(xì)胞上，最主要的介導(dǎo)部位是乙肝前S1蛋白的氨基酸(AA)21～47片段，變異的病毒只要保留此區(qū)段就具有傳染性。前S1蛋白也是急性肝炎預(yù)后的判斷指標(biāo)，越早轉(zhuǎn)陰，預(yù)后越好[8]。研究表明，前S2抗原測(cè)定有助于急性肝炎的早期診斷，而且通過(guò)對(duì)患者急性期前S2蛋白進(jìn)行連續(xù)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，可早期了解急性乙肝的轉(zhuǎn)歸和預(yù)后[9]。

本研究表明，乙肝感染者不同模式下HBV-DNA和前S1、S2抗原檢測(cè)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但大三陽(yáng)患者陽(yáng)性檢出率明顯大于后兩組，而后兩組為HBeAg陰性，但仍能檢出部分前S1、前S2抗原陽(yáng)性，這可能是因?yàn)镠BV前C區(qū)1896發(fā)生G-A突變產(chǎn)生1個(gè)終止密碼子阻止了HBeAg的合成[10]，因此測(cè)定血清中HBeAg陰性，導(dǎo)致此抗原漏檢，將其陰轉(zhuǎn)作為疾病好轉(zhuǎn)不是太準(zhǔn)確；而前S1、前S2抗原可以彌補(bǔ)這種缺陷，將其作為病毒復(fù)制的標(biāo)志優(yōu)于HBeAg[11]。但它們的特異性稍差，故將其聯(lián)合檢測(cè)可以更好地反映病毒復(fù)制情況。故當(dāng)血清中HBeAg陰性時(shí)不能片面地認(rèn)為未感染HBV，要結(jié)合前S1、S2抗原綜合分析，考慮是否存在漏檢的可能。

不同HBV-DNA載量的比較結(jié)果，體現(xiàn)了乙肝前S1、S2抗原能較好地表達(dá)HBV的感染和復(fù)制情況。在HBV-DNA陰性標(biāo)本中依然有乙肝前S1、S2抗原陽(yáng)性，其陽(yáng)性率分別為18.75%、12.50%，主要原因是乙肝感染者血清中存在三種顆粒：完整的病毒顆粒Dane顆粒、球形顆粒和管型顆粒，只有Dane顆粒有傳染性。而前S1、S2抗原不僅存在于病毒顆粒表面，還存在于不具有傳染性的管形顆粒表面，所以在患者病情好轉(zhuǎn)時(shí)，雖然HBV-DNA濃度很低但仍能檢出前S1、S2抗原陽(yáng)性。所以臨床上檢測(cè)出HBV-DNA低表達(dá)，血清前S1、S2抗原陽(yáng)性時(shí)，提示該患者體內(nèi)HBV處于低感染甚至不具備傳染性。僅通過(guò)血清前S1、S2抗原定性來(lái)判斷病毒的復(fù)制情況，這是誤區(qū)。不同HBV感染類型比較結(jié)果顯示，肝硬化中乙肝前S1、S2抗原陽(yáng)性率與HBsAg攜帶者相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，說(shuō)明前S1、S2抗原陽(yáng)性在肝硬化患者中的檢出率高，并隨病情的嚴(yán)重程度而增高。

綜上所述，作為HBV外膜蛋白的前S1、S2抗原在感染宿主細(xì)胞過(guò)程中起重要作用，與HBV-DNA有良好的相關(guān)性，可作為HBV感染和復(fù)制的重要依據(jù)，且比HBeAg更能較好地反映病毒的復(fù)制情況。定量HBV表面抗原(qHBsAg)也可用于監(jiān)測(cè)慢性HBV感染者體內(nèi)病毒復(fù)制和治療的情況，但是qHBsAg水平在判斷慢性HBV感染診斷和預(yù)后時(shí)要考慮出現(xiàn)pre-S缺失突變體[12]。故采用前S1、S2抗原可完善和補(bǔ)充其他血清學(xué)檢測(cè)指標(biāo)。

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(2014-09-23收稿 2015-01-21修回)

(責(zé)任編輯 尤偉杰)

Relationship between hepatitis B virus former S1 antigen,former S2 antigen, and HBV-DNA, and their clinical significance

HUANG Yanping, ZHU Feng, WANG Xinyuan,ZOU Haolin, and XU Nuo.

Department of Clinical Laboratory, Jiangsu Provincial Corps Hospital,Chinese People’s Armed Police Forces, Yangzhou 225003, China

Objective To study the relationship between HBV Pre-S1 antigen,HBV Pre-S2 antigen and HBV-DNA and investigate the clinical significance of the hepatitis B virus (HBV). Methods The markers Pre-S1 antigen, Pre-S2 antigen were determined by ELISA and HBV-DNA by the fluorescence quantitative PCR in 420 patients with HBV collected from September 2013 to May 2014. HBV, Pre-S1 antigen and Pre-S2 antigen results were analysed in different aspects, such as serum indices, HBV-DNA amounts and HBV-DNA infection types. Results In “big sanyang” patients the positive rates of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 98.48%, 95.45%, 100%,respectively.In “small Sanyang” patients, the positive rates of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 53.25%, 45.45%, 46.75%,respectively.In HBsAg+ HBcAb+ patients the positive rate of Pre-S1, S2 antigen and HBV-DNA were 53.75%, 43.28%, 44.78%,respectively.And the detection rates of HBV Pre-S1 antigen, HBV Pre-S2 antigen were higher in patients infected with high level of HBV-DNA. Conclusions There is a good correlation between HBV Pre-S1 antigen, HBV Pre-S2 antigen and HBV-DNA, which can reflect virus infection and replication.

Pre-S1Ag；Pre-S2Ag；HBV-DNA

醫(yī)學(xué)期刊常用字詞正誤對(duì)照表

黃艷萍，本科學(xué)歷，主管技師，E-mail:765511283@qq.com

225003 揚(yáng)州，武警江蘇總隊(duì)醫(yī)院檢驗(yàn)科

祝 峰，E-mail:zfwjjszd@163.com

R512.62