鹿腸毒血癥的診斷

趙列平 黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院哈爾濱特產(chǎn)研究所150038 衛(wèi)喜明 黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所150038

韓歡勝 黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院哈爾濱特產(chǎn)研究所150038 張海燕 黑龍江省農(nóng)墾科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所150038

鹿腸毒血癥主要是由C 型、D 型魏氏梭菌毒素引起的以胃腸出血為特征的傳染病，常呈散發(fā)流行，在國內(nèi)養(yǎng)鹿場常有發(fā)生。

1 流行病學(xué)

該病的發(fā)生具有明顯的季節(jié)性和條件性，但以6～10月多發(fā)，呈散發(fā)流行，同群膘肥體壯、食量大的鹿先發(fā)，而弱鹿則少發(fā)或不發(fā)。

2 臨床癥狀

突然發(fā)病，一般10 小時(shí)內(nèi)死亡，很少見到明顯癥狀，個(gè)別病程2～3天。病鹿精神沉郁，離群獨(dú)臥一隅，鼻鏡干燥，反芻停止，腹圍增大，口流涎，呼吸困難，體溫升高至40～41℃。糞便帶血呈醬紅色，含大量黏液，有腥臭味，肛門及后肢常被血液污染。有明顯疝痛癥狀，常呈四肢叉開、腹部向下用力姿勢，個(gè)別鹿回頭望腹。死前運(yùn)動失調(diào)，后肢麻痹，口吐白沫，昏迷倒地死亡。

3 病理學(xué)診斷

剖檢發(fā)現(xiàn)主要病理變化在胃腸道。腹腔有多量紅黃色腹水流出，大網(wǎng)膜、腸系膜、胃腸漿膜明顯充血和出血，呈黑紅色。瘤胃充滿未消化的食物，瓣胃和網(wǎng)胃輕微出血。真胃變化明顯，胃底和幽門部黏膜脫落。小腸變化最為顯著，外觀呈“灌血腸樣”，剖開有大量紅紫色黏液流出，黏膜和肌層剝落。腎臟稍大，變軟。肝稍腫大，個(gè)別有出血點(diǎn)和灰白色壞死灶。胸腔有多量淡黃色胸水流出。心臟擴(kuò)張，冠狀溝膠樣浸潤。心房和心室有紫黑色血塊。心內(nèi)膜和外膜有點(diǎn)狀出血。肺充血和水腫。顯微鏡下可見胃腸黏膜層血管充血，上皮細(xì)胞脫落和淋巴細(xì)胞浸潤。最突出的變化是黏膜的腸腺中出現(xiàn)大量杯狀細(xì)胞。

4 病原學(xué)診斷

無菌條件下剪取肝病料或脾病料，用鉑金耳鉤入?yún)捬跞飧螠?，剪取碎病料小塊，用鉑金耳在葡萄糖血瓊脂培養(yǎng)皿上劃線接種。置37～38℃溫箱中培養(yǎng)。

魏氏梭菌在厭氧肉肝湯中，培養(yǎng)5～6 小時(shí)即呈現(xiàn)均勻渾濁，并產(chǎn)生大量氣體。在葡萄糖血瓊脂上，菌落多為圓形、光滑、隆起、淡灰色，直徑2～4mm，但也可形成圓盤形、邊緣呈鋸齒狀、表面有輻射狀條紋的“勛章”樣大菌落。菌落周圍有棕色溶血區(qū)，有時(shí)表現(xiàn)為雙環(huán)溶血，內(nèi)環(huán)透明、外環(huán)淡綠。魏氏梭菌可分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，能還原硝酸鹽，不產(chǎn)生靛基質(zhì)，可產(chǎn)生硫化氫，液化明膠，最突出的生化特性是對牛乳培養(yǎng)基的“暴烈發(fā)酵”。涂片可用鉑金耳鉤取該培養(yǎng)物，均勻涂于載玻片上，在酒精燈火焰上輕微干燥固定，用革蘭氏染色方法染色。在800～1000倍顯微鏡下觀察，可見粗大、兩端稍方的正直桿菌，有的單在，有的成雙排列，短鏈較少出現(xiàn)。

5 毒素檢驗(yàn)

取死亡鹿回腸10～17cm 的腸內(nèi)容物，用滅菌生理鹽水稀釋1～3 倍，充分混合后經(jīng)3000 轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，取上清液，通過除菌濾器過濾，用濾液對試驗(yàn)兔耳靜脈注射2～4mL。如毒素含量高，10 分鐘試驗(yàn)兔死亡；毒素含量低，試驗(yàn)兔30～60 分鐘臥倒，心跳、呼吸加快，60 分鐘以后恢復(fù)正常；若腸內(nèi)容物不含毒素，試驗(yàn)兔不出現(xiàn)反應(yīng)。

毒素中和試驗(yàn)。準(zhǔn)備腸內(nèi)容物濾液，小鼠6 只（分3 組），C 型、D 型抗毒素血清，滅菌生理鹽水，注射器，6 號針頭，試管3 支。取滅菌試管3 支，編為1、2、3 號，分別加入C 型、D 型毒素抗血清及生理鹽水各0.1mL，并各加入腸內(nèi)容物濾液0.5mL，混合均勻后在37℃下作用40 分鐘。肌肉注射小鼠，第一組注射C 型抗毒素血清與腸內(nèi)毒素的混合液；第二組注射D 型抗血清與腸內(nèi)毒素的混合液；第三組注射生理鹽水與腸內(nèi)毒素的混合液，以作對照。如果第一組的小鼠死亡，第二組的小鼠不死，說明腸內(nèi)毒素可被D 型毒素抗血清中和，不被C 型毒素抗血清中和，則為D 型魏氏梭菌毒素；如第一組的小鼠不死，第二組的小鼠死亡，說明腸內(nèi)毒素可被C 型抗毒素血清中和，不被D 型抗毒素血清中和，則為C 型魏氏梭菌毒素。第三組小鼠均應(yīng)死亡。