反相高效液相色譜法測定冠心生脈丸中芍藥苷含量

張傳平，呂紫璇，李洪斌，陳 健

（重慶市涪陵食品藥品檢驗所，重慶 408000）

反相高效液相色譜法測定冠心生脈丸中芍藥苷含量

張傳平1，呂紫璇2，李洪斌2，陳 健2

（重慶市涪陵食品藥品檢驗所，重慶 408000）

目的 建立測定冠心生脈丸中芍藥苷含量的反相高效液相色譜法。方法 色譜柱為C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流動相為乙腈－0.05 mol／L磷酸二氫鉀溶液（14∶86），檢測波長為230 nm，柱溫為30℃。結(jié)果 芍藥苷進樣量在0.1060～1.6953 μg（r＝0.9994）范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系，平均回收率為98.06%，RSD為0.93%（n＝6）。結(jié)論 該方法操作簡便、快速、準確，可用于冠心生脈丸的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞：冠心生脈丸；芍藥苷；含量；反相高效液相色譜法

冠心生脈丸由人參、丹參、赤芍等中藥組方，具有益氣生津、活血通脈的功效，用于治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ê喎Q冠心病）、心絞痛等疾病。為有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，筆者采用反相高效液相色譜法（RP－HPLC）測定冠心生脈丸中芍藥苷的含量［1］，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1260型高效液相色譜儀（Agilent公司）；Sartorius－ME215S型電子天平（德國賽多利斯儀器有限公司）。芍藥苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為110736－201035，含量為96.5%）；冠心生脈丸（市售品，批號分別為20130102，20130508，20130615）；水為超純水，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈－0.05 mol／L磷酸二氫鉀溶液（14∶86）；流速：1.0 mL／min；檢測波長：230 nm；柱溫：30℃，進樣量：10 μL。理論板數(shù)按芍藥苷峰計算大于10 000。

2.2 溶液制備

精密稱取芍藥苷對照品適量，加稀乙醇制成每1 mL含0.106 0 mg的溶液，作為對照品溶液。取本品3袋，研細，精密稱取4.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率33 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用稀乙醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按冠心生脈丸制備工藝，制備缺赤芍的陰性樣品，照供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

陰性干擾試驗：取2.2項下3種溶液，按擬訂色譜條件進行測定。結(jié)果陰性對照品溶液色譜中，在芍藥苷峰相應位置上未見干擾峰，見圖1。

線性關(guān)系考察：精密吸取對照品溶液1，2，4，8，16 μL，按擬訂色譜條件測定峰面積，以進樣量（X）對峰面積（Y）進行線性回歸，得回歸方程 Y＝1 394.7 X＋21.078，r＝0.999 4（n＝6）。結(jié)果表明，芍藥進樣量在0.106 0～1.695 3 μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液10 μL，按擬訂色譜條件重復進樣6次。結(jié)果的 RSD為0.2%（n＝6），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：精密取同一批（批號為20130102）樣品，依法制備供試品溶液6份并進樣測定。結(jié)果芍藥苷平均含量為4.84 mg／g，RSD為0.35%（n＝6），表明方法重復性良好。

穩(wěn)定性試驗：取同一供試品溶液，分別于0，2，4，8，12，24 h時進樣10 μL，依法測定。結(jié)果芍藥苷峰面積的 RSD為0.6%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品（批號為20130102）6份，精密加入芍藥苷對照品適量，按供試品溶液制備方法制備溶液并測定其芍藥苷含量，計算回收率。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

圖1 高效液相色譜圖

表1 芍藥苷加樣回收試驗結(jié)果（n＝6）

取樣品3批，按擬訂色譜條件操作，測定含量。結(jié)果批號為20130102，20130508，20130615的3批樣品中芍藥苷的含量分別為4.84，4.93，4.71 mg／g。

3 討論

參照2010年版《中國藥典（一部）》［1］復方黃連素片白芍項下的含量測定方法，選用稀乙醇超聲提取，為保證被測成分提取完全，試驗中考察了超聲20，30，40，60 min不同提取時間對提取效率的影響。結(jié)果表明，超聲30 min供試品中芍藥苷的含量基本穩(wěn)定，故將提取時間定為超聲30 min。該方法簡便易行，快速準確，分離效果好，專屬性強，重復性好，可用于冠心生脈丸的質(zhì)量控制。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：923.

Determination of Paeoniflorin Content in Guanxin Shengmai Pills by RP－HPLC

Zhang Chuanping1，Lv Zixuan2，Li Hongbin2，Chen Jian2
（Fuling District Institute for Food and Drug Control，Chongqing，China 408000）

ObjectiveTo establish a RP－HPLC method for determining the content of paeoniflorin in Guanxin Shengmai Pills.MethodsThe RP－HPLC method was adopted and the C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was used.The mobile phase was acetonitrile－0.05 mol／L potassium dihydrogen phosphate（14∶86）.The detection wavelength was 230 nm.The column temperature was 30℃.ResultsThe sample size of paeoniflorin in the range 0.106 0－1.695 3 μg（r＝0.999 4）showed the good linear relation with the peak area.The average recovery rate was 98.06%，RSD＝0.93%（n＝6）.ConclusionThis method is simple，rapid and accurate，which can be used for the quality control of Guanxin Shengmai Pills.

Guanxin Shengmai Pills；paeoniflorin；content；RP－HPLC

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0050－02

張傳平（1986－），男，大學本科，中藥師，主要從事藥品檢驗工作，（電話）023－72229012（電子信箱）83033048＠qq.com。

2014－08－20）