兩種乙型肝炎病毒前S1抗原試劑盒檢測結(jié)果的可比性

諶曉燕，張銀輝

（襄陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，湖北 441000）

兩種乙型肝炎病毒前S1抗原試劑盒檢測結(jié)果的可比性

諶曉燕，張銀輝

（襄陽市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，湖北 441000）

目的評價兩種乙型肝炎病毒（HBV）前S1抗原試劑盒檢測結(jié)果的可比性。方法對860例襄陽市中醫(yī)醫(yī)院住院、門診患者HBsAg陽性者同時用兩個公司的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒進行前S1抗原的檢測，用另一公司的熒光定量PCR試劑盒檢測HBV－DNA。結(jié)果在860例確認HBsAg陽性患者中，復星長征試劑盒檢測的陽性例數(shù)為357例，陽性率為41.5%；英科新創(chuàng)試劑盒檢測的陽性例數(shù)為787例，陽性率為91.5%；HBV－DNA檢測的陽性例數(shù)為323例，陽性率為38.0%。若以HBV－DNA作為參考方法，復星長征試劑盒假陽性數(shù)為52例，假陽性率為3.5%；英科新創(chuàng)試劑盒假陽性數(shù)為464例，假陽性率為53.5%。結(jié)論兩種HBV前S1抗原試劑盒檢測結(jié)果的可比性較差，在臨床檢驗中選用試劑盒需慎重。

乙型肝炎病毒前S1抗原； 酶聯(lián)免疫吸附測定； 試劑盒； 可比性

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹鳎且环N由于肝細胞大量凋亡和壞死而出現(xiàn)肝功能嚴重損害的臨床綜合征，并可引起多器官損害的一種疾病。乙型肝炎是我國當前流行最為廣泛，危害性最嚴重的一種傳染性疾病。我國是HBV感染人數(shù)最多的國家之一，約10%的人口感染HBV，每年約有1%的乙型肝炎患者發(fā)生重癥肝炎［1］。乙型病毒性肝炎無一定的流行期，一年四季均可發(fā)病，但多屬散發(fā)，乙型肝炎的傳染性就跟乙肝患者體內(nèi)的病毒復制情況有很大的關(guān)系。乙型肝炎前S1抗原可以反映HBV在體內(nèi)復制情況以及傳染性的強弱，是乙型肝炎患者診斷、治療和預后評估的一個重要標志［2］，是一項較為方便、經(jīng)濟的檢測指標。為了進一步探討HBV前S1抗原在臨床中的檢驗中的準確性，筆者對兩種HBV前S1抗原試劑盒進行了比較。

1 資料與方法

1.1 一般資料 860例HBsAg陽性患者均為湖北省襄陽市中醫(yī)醫(yī)院2013年1月至2013年6月的門診、住院患者，標本均為患者空腹抽取的4～6mL靜脈血。

1.2 方法 所有檢測者均空腹抽靜脈血5mL，分離血清，血清標本如在24h內(nèi)檢測則置于4℃冰箱，否則置于－30℃冰箱內(nèi)保存待檢測，避免反復凍融。對所有標本分別用復星長征醫(yī)學科學有限公司和英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司的酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒檢測前S1抗原；HBV－DNA檢測采用實時熒光定量PCR檢測，試劑盒為廣州達安公司產(chǎn)品。各項檢測均嚴格按照試劑盒及儀器使用說明書進行操作。使用的檢測儀器為深圳愛康電子有限公司生產(chǎn)的Uranus AE－100全自動酶免分析儀和羅氏公司生產(chǎn)的實時熒光定量PCR檢測儀Lightcycler 480。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析，陽性率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

在860例確認HBsAg陽性患者中，上海復星長征醫(yī)學科學有限公司試劑盒檢測前S1抗原其陽性數(shù)為357例，陽性率為41.5%；英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司試劑盒檢測前S1抗原陽性數(shù)為787例，陽性率為91.5%；HBV－DNA陽性數(shù)為323例，陽性率為38.0%；英科新創(chuàng)試劑盒陽性率高于復興長征試劑盒，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

3 討 論

HBV蛋白的編碼區(qū)分：s區(qū)、c區(qū)、P區(qū)、x區(qū)，其中HBV的衣殼蛋白包括S蛋白和前S蛋白，后者又分為前Sl蛋白和前S2蛋白，前S1蛋白是HBV外膜蛋白，在病毒侵入肝細胞過程中起重要作用，含有肝細胞膜受體，最重要的介導部位是前S1蛋白的氨基酸（AA）21～47片段，變異的病毒只要這一區(qū)段完好就有傳染性。含有前S1的蛋白主要存在于Dane顆粒和管型顆粒上［3］，在HBV感染肝細胞和機體免疫應(yīng)答的過程中起重要作用［4－5］，提示機體內(nèi)含有HBV就有前S1抗原，可見前S1抗原在臨床上是多么重要的。前S1抗原在HBV血清標志物中越來越受到臨床醫(yī)生的重視，因為它對乙型肝炎患者診斷、治療和預后評估有著非常重要的價值。

復星長征試劑盒采用ELISA雙抗體夾心一步法檢測樣本的HBV前S1蛋白；英科新創(chuàng)試劑盒采用夾心法原理，在微孔板預包被抗HBV前S1蛋白單克隆抗體，與血清中HBV前S1抗原反應(yīng)，再加入辣跟過氧化酶標記的 HBV表面抗體（抗HBs－HRP抗體），形成免疫復合物檢測樣本的HBV前S1蛋白，原理基本一樣。英科新創(chuàng)試劑盒陽性率明顯高于復星長征試劑盒。HBV血清標志物全陰性的健康人血清前S1抗原均陰性，說明前S1抗原的假陽性率不高。有報道血清中的病毒已經(jīng)測不到了，而肝細胞內(nèi)仍有病毒存在時，檢測前S1抗原陽性［7－8］。有研究報道前Sl抗原與HBA－DNA檢測陽性高度吻合［6－7，9］。若以HBV－DNA陽性作為參照的話，復星長征試劑盒假陽性率為3.5%；英科新創(chuàng)試劑盒假陽性率為53.5%。可見英科新創(chuàng)試劑盒是不符合在臨床中使用的，它的陽性率高達91.5%，與乙型肝炎表面抗原陽性率100.0%相差無幾。

因此可以看出兩種HBV前S1抗原試劑盒檢測結(jié)果的可比性較差，說明目前市場上的一些試劑在檢測性能（敏感度、特異性和精密度等）方面還存在一些不足，以至于在各個廠家試劑中陽性率參差不齊，同一標本之間不存在可比性，應(yīng)加以改進和提高。臨床實驗室選用試劑盒需慎重。

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10.3969/j.issn.1673－4130.2015.03.048

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2014－09－18）