淺談NY-Ⅳ型農(nóng)藥殘毒速測儀在水果農(nóng)藥殘毒檢測中的應(yīng)用

張立新，王　頔，胥繼東

（唐山市林業(yè)局，河北 唐山 063000）

淺談NY-Ⅳ型農(nóng)藥殘毒速測儀在水果農(nóng)藥殘毒檢測中的應(yīng)用

張立新，王頔，胥繼東

（唐山市林業(yè)局，河北 唐山 063000）

利用北京強(qiáng)盛儀器廠生產(chǎn)的NY-Ⅳ型農(nóng)殘速測儀對水果有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性檢測。該文簡單敘述了儀器的工作原理和檢測方法，分析了結(jié)果誤差，為其應(yīng)用推廣提供依據(jù)。

農(nóng)藥殘毒；速測儀；應(yīng)用

隨著生活水平的逐步提高，百姓餐桌上已經(jīng)離不開各類新鮮水果，人們對水果食用安全的要求越來越高。加強(qiáng)果品質(zhì)量監(jiān)控，尤其是加強(qiáng)水果農(nóng)藥殘毒檢測，對提高果品質(zhì)量安全水平，保障百姓“舌尖上的安全”具有重要意義。2013年，唐山市林業(yè)局檢測中心購置北京強(qiáng)盛儀器廠生產(chǎn)的NY-Ⅳ型農(nóng)殘速測儀2臺，用于水果有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥定性檢測。

1　NY-Ⅳ型農(nóng)藥殘毒速測儀工作原理

有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中乙酰膽堿酶的活性，造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導(dǎo)，使昆蟲中毒死亡。如果水果的提取液中不含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥或殘留量較低，酶的活性不被抑制，試驗中加入的底物就被酶水解，水解產(chǎn)物與加入的顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化。反之，如果水果的提取液中含有一定量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，酶的活性就被抑制或部分被抑制，試驗中加入的底物就不能被酶水解或少部分被水解，從而不顯色或顏色變化很小。用分光光度計測定吸光值隨時間的變化情況計算出抑制率，就可以判斷水果中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況。

2　NY-Ⅳ型農(nóng)藥殘毒速測儀使用方法

NY-Ⅳ型農(nóng)藥殘毒速測儀檢測水果農(nóng)藥殘毒需要專用農(nóng)藥殘毒速測試劑。每套農(nóng)藥殘毒試劑包括提取液試劑1袋、底物1瓶、顯色劑1瓶和酶試劑1瓶。

2.1試劑配制與保存：

（1）提取液。將提取液試劑袋中的試劑溶于510mL蒸餾水中，溶解、混勻，配成提取液備用。

（2）底物。向底物試劑瓶中加入3.1mL蒸餾水，溶解、混勻，備用。配制好的底物溶液在0～4℃環(huán)境保存，可使用5d。

（3）顯色劑。向顯色劑試劑瓶中加入32mL已經(jīng)配制好的提取液，溶解、混勻，備用。避光冷藏保存。

（4）酶試劑。向酶試劑瓶中加入3.1mL提取液，溶解、混勻，備用。配制好的底物溶液在0～4℃環(huán)境保存，可使用5d。

（5）未經(jīng)配制的酶、底物粉劑必須放置在冰箱0℃以下冷凍室保存，有效期為1a。

2.2操作步驟

（1）準(zhǔn)備工作。開機(jī)預(yù)熱10min，按確定鍵進(jìn)行儀器自檢。隨機(jī)抽取水果樣本，每個樣本取0.5～1.0kg，樣品必須具有代表性。

（2）樣品提取。從水果表皮至果肉0.5～1cm處取樣，用天平稱取1g水果表皮樣品放入燒杯中，用移液管加入5mL提取液，常溫下靜置10min，每3min晃動一下燒杯，以使水果中農(nóng)藥充分溶解，或振蕩提取2min，然后過濾，濾液即為待檢測液。

（3）對照測試。對照測試應(yīng)比樣本測試提前4min進(jìn)行。取提取液2.5mL、酶0.1mL和0.1mL顯色劑，加入燒杯中，混勻靜置15min（秒表計時，常溫25～35℃）后，立即加入底物0.1mL。倒置2次混勻后（切勿震蕩產(chǎn)生氣泡），立即轉(zhuǎn)移到比色皿中，快速放入儀器比色池內(nèi)，蓋好蓋板，按對照測試鍵執(zhí)行對照制作程序。對照值在30以上為有效值，反之重做對照測試。測試完畢，立刻將對照液從比色池內(nèi)取出。

（4）樣品測試。取待檢測液2.5mL加入燒杯中，加入酶液0.1mL和顯色劑液0.1mL，混勻靜置15min（秒表計時，常溫25～35℃）后，馬上加入底物0.1mL，倒置2次后（切勿震蕩產(chǎn)生氣泡），立即轉(zhuǎn)移到比色皿中，快速放入儀器比色池，蓋好蓋板，按樣品測試鍵執(zhí)行樣品檢測程序。

（5）測試結(jié)果的判讀。若測試樣品的酶抑制率達(dá)到50%以上，則表明被測樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn)，建議復(fù)檢一次或通過氣相色譜等儀器檢測進(jìn)一步確認(rèn)。

（6）容器清洗。所附各種瓶、燒杯、移液管等容器在使用前用自來水洗5遍，再用蒸餾水沖2遍，烘干后再使用。

3　檢測結(jié)果誤差分析

3.1取皮厚度帶來的誤差

所取果皮的厚度，對檢測結(jié)果有非常重要的影響。果皮越薄，接觸農(nóng)藥的面積越大，檢測結(jié)果為不合格的概率就越大。果皮越厚，所含的果汁和色素就越多，對檢測結(jié)果造成的誤差就越大。應(yīng)按照要求進(jìn)行取樣。

3.2操作速度帶來的誤差

提取液與樣品混合時間越長，越有利于農(nóng)殘溶解，檢測結(jié)果為不合格的概率就越大。加入酶后放置的時間越長，越有利于使酶被充分破壞，檢測結(jié)果為不合格的概率就越大。應(yīng)提高操作熟練程度，按照要求時間進(jìn)行操作。

3.3溫度變化帶來的誤差

實驗室溫度的變化，可能造成測試溫度與對照溫度的不一致，從而降低吸光值變化曲線的吻合度，導(dǎo)致抑制率的升高，增加檢測結(jié)果不合格的概率。同時，溫度對溶解速度、酶的活性都有影響。應(yīng)在實驗室安裝空調(diào)，按照儀器要求調(diào)整好溫度。

3.4水果果汁帶來的誤差

果汁中含有的酸（堿）性物質(zhì)對酶的活性、提取液的溶解度、顯色劑的靈敏度等都會造成影響，從而降低檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。取樣過程中應(yīng)盡量采用較鋒利的刀具，減少擠出的果汁量。

3.5水果色素帶來的誤差

儀器通過測定吸光值隨時間的變化情況來進(jìn)行檢測。部分水果中含有的色素會影響儀器對吸光值的判斷。對于色素顏色較深的水果品種，應(yīng)采用更為精密的儀器進(jìn)行檢測。

3.6水質(zhì)帶來的誤差

不同水的成分差別較大。水中含有的礦物質(zhì)成分、酸性物質(zhì)、堿性物質(zhì)，都會對檢測的結(jié)果產(chǎn)生影響。實驗過程中應(yīng)采用蒸餾水，如條件有限，可用瓶裝純凈水代替。

3.7各種試劑帶來的誤差

提取液量多可以稀釋農(nóng)殘，酶量多可以提高分解底物的速度，顯色劑量多可以增加顯色的程度，底物量多可以提高酶的利用效率，以上這些因素都能增加檢測結(jié)果合格的可能性。檢測過程中的試劑使用量是經(jīng)過科學(xué)計算的，應(yīng)嚴(yán)格遵守。

3.8顯示時間帶來的誤差

同時檢測多個樣品時，倒計時顯示的時間每次都有差別，誤認(rèn)為是儀器出現(xiàn)了問題。每次放入比色皿并按下檢測鍵的時候，內(nèi)部計時器都開始180s倒計時。8個通道的180s倒計時不是同時開始的，他們之間的時間差即為操作時間。所以最后顯示的時間因操作的快慢有所不同，屬于正?，F(xiàn)象，可以放心操作。

3.9比色皿帶來的誤差

比色皿分為透光面和磨光面。在檢測的過程中，透光面表面有水痕、手痕、污跡等都會影響儀器對折光率的判斷，造成檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。檢測前應(yīng)將比色皿清洗干凈，操作過程中保持透光面無污物接觸。

3.10揭遮光蓋時帶來的誤差

每次放入待檢測的比色皿都需要掀起儀器的遮光蓋，自然光都會投射進(jìn)正在檢測的比色皿，影響折光率的判斷，進(jìn)而影響檢測結(jié)果。操作過程中，要盡可能快速的完成比色皿的放置，減少遮光蓋打開的時間。

3.11移液操作帶來的誤差

實驗過程中，很多試劑都是通過移液槍進(jìn)行添加的。如果按下移液槍后，松手過快會導(dǎo)致所吸的液體中含有很多空氣，造成所加試劑量減少，影響檢測結(jié)果。操作過程中，在所剩試劑比較少的情況下，應(yīng)慢松移液槍按鈕，確保吸入試劑足量。

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1002-3356（2015）05-0095-02

2015-05-14