母豬卵泡閉鎖和凋亡的調(diào)節(jié)

(黑龍江省訥河市通南鎮(zhèn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)技術(shù)服務(wù)中心 161333)

呂落彬

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母豬卵泡閉鎖和凋亡的調(diào)節(jié)

(黑龍江省訥河市通南鎮(zhèn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)技術(shù)服務(wù)中心 161333)

呂落彬

摘要：人們對(duì)母豬卵泡閉鎖和凋亡的生化特點(diǎn)進(jìn)行了深入的研究，以期能夠發(fā)現(xiàn)其原因和找到標(biāo)志，以便在閉鎖的早期階段就能鑒別這些卵泡。本文探討了卵巢產(chǎn)生的各種因子，例如甾體激素、轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子家族、IGF-1，IGF-BP及抑制素等可能在卵泡的閉鎖和凋亡中發(fā)揮重要作用。

關(guān)鍵詞：母豬；卵泡；閉鎖和凋亡；甾體激素；轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子；抑制素

1甾體激素

含有10%以上凋亡粒細(xì)胞的卵泡，其卵泡液中雌二醇的濃度很低[1]。沒有閉鎖的卵泡，在卵泡期的初期及在周期的第6天，雌二醇濃度與粒細(xì)胞的凋亡率直接相關(guān)。因此有人認(rèn)為，卵泡液中雌二醇濃度低是卵泡閉鎖最早的指征。粒細(xì)胞中的芳香化酶和酶蛋白的丟失也是卵泡閉鎖的重要表現(xiàn)，其調(diào)節(jié)可能是在轉(zhuǎn)錄水平。

閉鎖卵泡中孕酮和雄烯二酮的濃度在周期的第6～7天與未閉鎖的卵泡相當(dāng)或略高。隨著卵泡的閉鎖，粒細(xì)胞的凋亡增加，因此連續(xù)產(chǎn)生孕酮和雄烯二酮。這些研究結(jié)果表明，培養(yǎng)中閉鎖的豬卵泡也能產(chǎn)生同樣或略高于正常卵泡的孕酮和雄烯二酮。閉鎖卵泡之所以能夠持續(xù)產(chǎn)生雄激素和孕酮，主要可能與閉鎖后期，壁細(xì)胞仍然能夠和LH發(fā)生特異性結(jié)合，并且能產(chǎn)生甾體激素，而粒細(xì)胞上結(jié)合FSH的能力則在閉鎖的早期就已經(jīng)喪失。閉鎖卵泡FSH結(jié)合能力的喪失也可能在某種程度上說明芳香化酶活性的喪失。同樣，閉鎖的豬卵泡不能再對(duì)外源性促性腺激素發(fā)生反應(yīng)而釋放cAMP。在小卵泡，LH受體和FSH受體轉(zhuǎn)錄的表達(dá)主要分別局限于壁內(nèi)層和粒細(xì)胞。在閉鎖的卵泡，LH受體在壁細(xì)胞有少量表達(dá)，而FSH受體則在粒細(xì)胞上無表達(dá)。

2抑制素和激活素

抑制素除了作為垂體功能的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)因子，激活素除了作為垂體FSH分泌的刺激因子外，抑制素、激活素和抑制素-激活素α和β亞單位的二聚體，都可以作為卵巢內(nèi)的旁分泌調(diào)節(jié)因子，調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育。抑制素-激活素亞單位表達(dá)的增加與豬發(fā)情周期早期的卵泡增長(zhǎng)有關(guān)。卵泡期和黃體期閉鎖及未閉鎖的卵泡液中都可以檢測(cè)到多種抑制素-激活素的亞單位。α和β亞單位mRNA的表達(dá)以及細(xì)胞色素P450芳香化酶蛋白在未閉鎖卵泡從1～2 mm增長(zhǎng)到3～5 mm時(shí)均明顯增加。相反，隨著卵泡閉鎖的增加，從閉鎖早期到閉鎖晚期，α和β亞單位mRNAs、細(xì)胞色素P450芳香化酶蛋白及細(xì)胞分化相關(guān)核抗原Ki-67蛋白的表達(dá)均明顯減少。這些研究結(jié)果說明，粒細(xì)胞的分化和卵泡的增長(zhǎng)與抑制素-激活素亞單位的表達(dá)具有密切關(guān)系，而閉鎖與粒細(xì)胞生物合成能力的降低有關(guān)。

3FSH和生長(zhǎng)因子

促性腺激素、EGF、TGFα、FGF和IGF-1是卵泡的生存因子或者抗凋亡因子。對(duì)分離的豬粒細(xì)胞DNA進(jìn)行測(cè)定表明，在新鮮分離的卵泡，粒細(xì)胞凋亡為4.5%，培養(yǎng)24 h后增加到68%。如果加入FSH，則凋亡減少一半，F(xiàn)SH濃度達(dá)到4～20 mU/mL時(shí)達(dá)到平衡。據(jù)孔令發(fā)等[2]報(bào)告，卵泡雌激素受體的合成可使卵泡增長(zhǎng)到超過1 mm大小，但卵泡發(fā)育越來越依賴于FSH的濃度。在直徑小于1 mm的卵泡中，閉鎖發(fā)生率比較低。在24 h的培養(yǎng)中，IGF-1也具有抗凋亡作用，如果培養(yǎng)液中IGF-1濃度達(dá)50～250 ng/L，則凋亡比沒有加入IGF-1減少50%。

卵泡的選擇和生長(zhǎng)同時(shí)伴隨血液FSH濃度降低60%～70%，同時(shí)未排卵卵泡的閉鎖數(shù)也減少。排卵后3～5 mm大小卵泡的再次生長(zhǎng)與血液中FSH濃度的增加有關(guān)。在排卵卵泡成熟所必需的分化階段，F(xiàn)SH的作用可能不很重要，因?yàn)檫@些變化可以發(fā)生在血液FSH濃度降低和粒細(xì)胞沒有FSH受體的情況下。排卵前，卵泡生長(zhǎng)的關(guān)鍵因子可能是排卵前卵泡對(duì)LH要有較大的反應(yīng)性，主要表現(xiàn)在粒細(xì)胞和壁細(xì)胞LH受體表達(dá)增加，LH結(jié)合增加及粒細(xì)胞LH敏感性腺苷酸環(huán)化酶活性增加。因此可以認(rèn)為，F(xiàn)SH在小到中等大小卵泡的生長(zhǎng)和生存中發(fā)揮重要作用，這些作用主要是刺激粒細(xì)胞分化和消弱粒細(xì)胞凋亡。

4卵泡IGF和IGFBP

雖然卵泡的閉鎖可能是血循環(huán)中FSH濃度降低和卵泡上FSH受體減少的結(jié)果，但粒細(xì)胞中IGFBP的增加可能在中和IGF-1的生物學(xué)作用，從而也在引起卵泡閉鎖上發(fā)揮作用。對(duì)排卵前成熟卵泡及黃體期早期分離的卵泡液分析表明，閉鎖卵泡IGFBP-2比未閉鎖卵泡高3倍。IGFBP-2的量與凋亡粒細(xì)胞的百分比呈現(xiàn)正相關(guān)，因此卵泡中IGFBP-2的產(chǎn)生或集聚可能在卵泡閉鎖和粒細(xì)胞凋亡中發(fā)揮重要作用。卵泡細(xì)胞的分化及閉鎖可能受粒細(xì)胞、壁內(nèi)層細(xì)胞和在此體循環(huán)的各種因子綜合作用的調(diào)節(jié)。

參考文獻(xiàn)5

[1]趙興緒.豬的繁殖調(diào)控[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2007：73-74.

[2]孔令法，李君榮，石放雄.母豬卵巢卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)節(jié)機(jī)制[J].養(yǎng)豬，2013，(2)：35.

作者簡(jiǎn)介：呂落彬(1978-)，男，本科，畜牧師，主要從事畜牧防疫工作。

收稿日期：2015-01-28

中圖分類號(hào)：S828.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1005-2739(2015)03-0015-02