S100A7蛋白對(duì)局部復(fù)發(fā)性鼻咽癌患者挽救術(shù)治療前放療效應(yīng)的預(yù)測價(jià)值

陳國富，陳秋蓉

（1.江蘇省泰州職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院 225300；2.江蘇省泰州市人民醫(yī)院五官科 225300）

伴隨我國社會(huì)經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展，鼻咽癌（NC）患者的發(fā)病率不斷增高。由于NC具有一定的特異性，一經(jīng)確診通常已進(jìn)入中晚期，患者的預(yù)后不佳，即使通過一定療程的治療，部分患者仍容易產(chǎn)生局部復(fù)發(fā)［1］。針對(duì)局部復(fù)發(fā)性NC患者而言，通常是放療后再實(shí)施挽救術(shù)治療，從而盡可能好地改善患者預(yù)后，這就使得通過某種指標(biāo)對(duì)放療效應(yīng)進(jìn)行預(yù)測，再針對(duì)性地給予治療成為了難題［2］。鑒于此，為探索針對(duì)術(shù)前放療效應(yīng)較為敏感的標(biāo)志性指標(biāo)，本文通過分析S100A7蛋白對(duì)局部復(fù)發(fā)性NC患者接受挽救術(shù)治療前的放療效應(yīng)實(shí)施預(yù)測的價(jià)值，以期為臨床治療NC作出相應(yīng)理論及數(shù)據(jù)支持，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年2月至2013年2月在泰州市人民醫(yī)院接受治療的局部復(fù)發(fā)性NC患者35例作為研究對(duì)象。其中，男21例，女14例，年齡52～68歲，平均（62.5±3.8）歲。根據(jù)關(guān)于鼻咽癌的1992年福州分期標(biāo)準(zhǔn)分成rT2 5例，rT3 12例，rT4 18例；N0 26例，N1 5例，N2 4例。根據(jù)癌癥臨床分期分成Ⅱ期5例，Ⅲ期14例，Ⅳ期16例。納入標(biāo)準(zhǔn)［3］：（1）癥狀均符合WHO關(guān)于局部復(fù)發(fā)性NC的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并均經(jīng)CT、磁共振成像（MRI）等影像學(xué)手段，以及病理檢查確診；（2）年齡大于50歲；（3）復(fù)發(fā)時(shí)間為治療后2年內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn)［4］：（1）有其他類惡性腫瘤；（2）嚴(yán)重的心、肝、腎等器官功能性不全；（3）無挽救手術(shù)的適應(yīng)證；（4）不接受手術(shù)者。另選同期于醫(yī)院接受治療的慢性鼻咽炎患者40例作為對(duì)照。其中，男20例，女20例，年齡53～65歲，平均（61.9±4.3）歲。局部復(fù)發(fā)性NC患者與慢性鼻咽炎患者的性別和年齡等資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 檢測過程中使用的兔抗人S100A7多克隆抗體產(chǎn)于Abcam公司。免疫組織化學(xué)SP試劑盒與DAB底物顯色劑產(chǎn)于北京的中杉金橋公司。兩組患者的檢測標(biāo)本常規(guī)進(jìn)行脫蠟至水，將pH6.0的檸檬酸緩沖液在高溫、高壓下實(shí)施抗原修復(fù)，滴入過氧化物酶的阻斷液，在37℃下封閉約10 min。其中第一抗體S100A7的稀釋度是1∶300，置于4℃下冰箱內(nèi)過夜。而后在37℃下孵育約30min，利用DAB顯色，經(jīng)蘇木素復(fù)染，再脫水透明，利用中性樹脂進(jìn)行封固。通過磷酸鹽緩沖溶液（PBS）代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 效果評(píng)價(jià)［5］S100A7以在細(xì)胞質(zhì)或者細(xì)胞核內(nèi)發(fā)現(xiàn)黃色顆粒作為陽性細(xì)胞，經(jīng)2名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師通過雙盲法讀片，于顯微鏡（×400）下隨機(jī)地選取5個(gè)視野，對(duì)各視野內(nèi)200個(gè)癌細(xì)胞內(nèi)陽性細(xì)胞比例實(shí)施計(jì)數(shù)，而后取5個(gè)視野平均百分?jǐn)?shù)。依照陽性細(xì)胞的百分率實(shí)施計(jì)分，其中陽性細(xì)胞小于10%為0分，10%～50%為1分，＞50%為2分。依照染色強(qiáng)弱實(shí)施計(jì)分，其中無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將兩項(xiàng)相加：0～1分是陰性（－），2～4分是陽性（＋），5分是強(qiáng)陽性（＋＋）。

1.2.3 觀察指標(biāo) 對(duì)比S100A7在不同病變組織中的表達(dá)，局部復(fù)發(fā)性NC患者不同放療效應(yīng)的S100A7表達(dá)，分析S100A7蛋白表達(dá)預(yù)測局部復(fù)發(fā)性NC放療效應(yīng)的敏感性、特異度、準(zhǔn)確度。其中敏感性＝真陽性者/（真陽性者＋假陰性者）；特異度＝真陰性者/（假陽性者＋真陰性者）；準(zhǔn)確度＝（真陽性者＋真陰性者）/總病例。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 S100A7在不同病變組織中的表達(dá)對(duì)比 局部復(fù)發(fā)性NC的S100A7表達(dá)陽性率顯著高于慢性鼻咽炎患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 S100A7在不同病理分型和臨床分期中的表達(dá)情況對(duì)比 不同病理分期和臨床分型中低檔S100A7的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

2.3 局部復(fù)發(fā)性NC不同放療效應(yīng)的S100A7表達(dá)對(duì)比 放射抵抗的局部復(fù)發(fā)性NC S100A7陽性和陰性表達(dá)率顯著高于放射敏感，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表1 S100A7在不同病變組織中的表達(dá)對(duì)比［n（%）］

2.4 S100A7蛋白表達(dá)預(yù)測局部復(fù)發(fā)性NC放療效應(yīng)的敏感性、特異度、準(zhǔn)確度分析 S100A7蛋白的陽性表達(dá)對(duì)局部復(fù)發(fā)性NC在挽救術(shù)治療前放療效應(yīng)的預(yù)測價(jià)值中，敏感性、特異度及準(zhǔn)確度為56.43%、68.82%、58.94%，S100A7蛋白在慢性鼻咽炎組織和局部復(fù)發(fā)性NC組織中的表達(dá)情況見圖1。

表2 S100A7在不同病理分型和臨床分期中的表達(dá)情況對(duì)比

表3 局部復(fù)發(fā)性NC不同放療效應(yīng)的S100A7表達(dá)對(duì)比［n（%）］

圖1 S100A7蛋白表達(dá)情況分析

3 討 論

由于腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)均為復(fù)雜進(jìn)展過程，主要包含癌細(xì)胞相關(guān)接觸抑制喪失和運(yùn)動(dòng)性增大，以及細(xì)胞外基質(zhì)降解。而國外Li等［6］報(bào)道稱，上述進(jìn)展過程及生理化學(xué)改變可能和S100A7表達(dá)具有緊密聯(lián)系。S100蛋白作為分子量相對(duì)較小的Ca結(jié)合性蛋白家族，在與鈣離子結(jié)合之后，其蛋白構(gòu)象產(chǎn)生變化，并和靶蛋白結(jié)合，而后形成生物學(xué)效應(yīng)［7］。人類機(jī)體S100中的α基因通常在染色體1q21區(qū)域定位，在腫瘤組織內(nèi)基因常會(huì)進(jìn)行頻繁重組，進(jìn)而導(dǎo)致S100基因出現(xiàn)表達(dá)失控，影響正常細(xì)胞功能及代謝，最終致使腫瘤產(chǎn)生和發(fā)展［8］。所以在腫瘤晚期或癌癥轉(zhuǎn)移時(shí)均可發(fā)現(xiàn)S100蛋白異常表達(dá)。S100A7蛋白即為S100蛋白家族成員中的一種，有報(bào)道證實(shí)［9］，S100A7蛋白具有調(diào)節(jié)細(xì)胞的支架結(jié)構(gòu)及存活增殖等功能，且其與癌癥復(fù)發(fā)有著較為緊密的聯(lián)系。

本文研究發(fā)現(xiàn)，局部復(fù)發(fā)性NC的S100A7表達(dá)陽性率為85.71%，顯著高于慢性鼻咽炎的5.00%，表明惡性腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)S100A7水平明顯上升，與良性病變組織存在明顯的陽性表達(dá)差異，符合Qin等［10］的報(bào)道結(jié)果。同時(shí)，本文研究顯示，放射抵抗的局部復(fù)發(fā)性局部復(fù)發(fā)性NC組織S100A7陽性表達(dá)率為70.00%，顯著高于放射敏感的33.33%，表明檢測S100A7蛋白陽性表達(dá)可較好地判斷是否會(huì)發(fā)生放射抵抗。進(jìn)一步研究表明，S100A7蛋白的陽性表達(dá)對(duì)局部復(fù)發(fā)性NC在挽救術(shù)治療前放療效應(yīng)的預(yù)測價(jià)值中，敏感性、特異度及準(zhǔn)確度均大于50%，這再次提示對(duì)于S100A7蛋白的表達(dá)情況實(shí)施測定，具有較好的預(yù)測價(jià)值。究其原因，作者認(rèn)為這可能是因?yàn)镾100A7蛋白出現(xiàn)的異常表達(dá)通過基質(zhì)金屬蛋白酶－2或基質(zhì)金屬蛋白酶－9的上調(diào)進(jìn)一步促進(jìn)了NC的病情進(jìn)展［11］。對(duì)于復(fù)發(fā)性NC患者而言，由于其鼻咽部的淋巴組織比較豐富，而毛細(xì)淋巴管的有關(guān)結(jié)構(gòu)又異于毛細(xì)血管，往往管壁較薄，由單層的內(nèi)皮細(xì)胞及極薄結(jié)締組織組成，其管壁缺少完整的基底膜，在內(nèi)皮外含一層篩狀的基質(zhì)，此基質(zhì)則含有Ⅳ型膠原蛋白。在組織癌變或者復(fù)發(fā)時(shí)，機(jī)體局部的基質(zhì)金屬蛋白酶－2或基質(zhì)金屬蛋白酶－9通過表達(dá)增高來降解相應(yīng)的內(nèi)皮外基質(zhì)，腫瘤細(xì)胞因黏附于內(nèi)皮外裸露的粘連蛋白而更易浸潤與轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響S100A7蛋白的表達(dá)［12］。針對(duì)放射抵抗的局部復(fù)發(fā)性NC組織S100A7陽性表達(dá)率更高，原因可能在于存在放射抵抗的癌瘤組織轉(zhuǎn)移能力相對(duì)更強(qiáng)，而引發(fā)轉(zhuǎn)移的酶類物質(zhì)活性更高，進(jìn)而使得S100A7呈現(xiàn)高表達(dá)。國內(nèi)外研究也證實(shí)，S100A7蛋白和多類腫瘤的轉(zhuǎn)移聯(lián)系緊密，且S100A7蛋白表達(dá)可用作乳腺癌化療后預(yù)測療效的指標(biāo)［13－15］。這與本文的報(bào)道基本一致。需要指出的是，由于樣本容量有限等因素的影響，本文也存在著未能深入研究S100A7陽性表達(dá)與基質(zhì)金屬蛋白酶－2或基質(zhì)金屬蛋白酶－9表達(dá)之間的聯(lián)系等問題，這值得后續(xù)研究工作的進(jìn)一步關(guān)注及開展。

綜上所述，S100A7蛋白對(duì)于局部復(fù)發(fā)性NC患者接受挽救術(shù)治療前的放療效應(yīng)具有較好的預(yù)測價(jià)值，臨床診斷及治療時(shí)，應(yīng)對(duì)其加以重視，對(duì)S100A7實(shí)施監(jiān)測分析，輔助治療判斷，從而使患者獲得更佳預(yù)后。

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