2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝患者血清nesfatin－1水平的變化＊

盧東暉，張 帆，連曉芬

（北京大學(xué)深圳醫(yī)院內(nèi)分泌科，廣東深圳518036）

nesfatin－1是2006年日本學(xué)者在下丘腦和腦干中發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞因子，動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)其有抑制攝食、減輕體質(zhì)量、降低血糖（GLU）作用，推測(cè)其對(duì)機(jī)體攝食和能量代謝可能具有重要的調(diào)節(jié)作用［1］。目前關(guān)于nesfatin－1在2型糖尿?。═2DM）伴非酒精性脂肪肝（NAFLD）人群中的研究甚少，幾項(xiàng)在T2DM患者中的研究得到結(jié)論不一。本研究觀察T2DM伴NAFLD患者中血nesfatin－1水平的變化，旨在為闡明nesfatin－1在T2DM及NAFLD發(fā)生中的作用提供一定實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年1月至2013年10月本院內(nèi)分泌科住院T2DM患者211例（T2DM組），其中男136例，女75例，病程1～20年，按照B超是否存在NAFLD分成T2DM不伴NAFLD組（98例），T2DM伴NAFLD組（113例）。另選體檢中心體檢的健康志愿者75例作為對(duì)照組（NGT組），其中男42例，女33例。納入標(biāo)準(zhǔn)：T2DM組符合1999年WHO糖尿病診斷分型標(biāo)準(zhǔn)，即空腹血糖（FPG）≥7.0mmol/L，75g葡萄糖負(fù)荷后2h血糖（2hPG）≥11.1mmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：各種急性和慢性感染；合并酮癥酸中毒或高滲性昏迷；合并心力衰竭和嚴(yán)重心率失常；合并腦血管意外；合并嚴(yán)重肝、腎功能不良；合并精神疾病、結(jié)締組織病、腫瘤。患者均無(wú)飲酒史或飲酒量折含酒精男性小于40g/周，女性小于20g/周；無(wú)病毒性肝炎、藥物性肝炎、自身免疫性肝炎。

1.2 方法（1）人體參數(shù)測(cè)定：測(cè)定T2DM組和NGT組身高、體質(zhì)量、血壓，計(jì)算BMI。（2）生化指標(biāo)檢測(cè)：所有受試者于禁食至少8h后于次日晨采靜脈血。測(cè)肝腎功能、GLU、血脂（日立7070全自動(dòng)生化分析儀），糖化血紅蛋白（HbA1c，日本TOSOH公司HLC－723G7全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀），血清胰島素（INS，安徽科技大學(xué)中佳公司GC－1200全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光γ－免疫分析儀）。nesfatin－1測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA，德國(guó)RayBiotech公司試劑盒），批內(nèi)變異系數(shù)（CV）＜10%，批間CV＜15%。胰島素抵抗指數(shù)（HOMA－IR）＝空腹血胰島素（mIU/L）×FPG（mmol/L）/22.5。（3）脂肪肝檢測(cè)：由專(zhuān)業(yè)超聲醫(yī)生對(duì)所有受試對(duì)象進(jìn)行腹部彩超檢查（日本島津公司SDU－1200彩色超聲診斷儀），NAFLD的診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)（2010年1月修訂）［2］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0軟件處理，計(jì)量資料以±s表示，符合正態(tài)分布及方差齊性的資料兩組間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間的比較用方差分析（F檢驗(yàn)），多組間的兩兩比較用LSD－t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布資料的兩兩比較采用兩獨(dú)立樣本的Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，多組間的比較采用多個(gè)獨(dú)立樣本的秩和檢驗(yàn)，多組間的兩兩比較用Nemenyi法檢驗(yàn)。指標(biāo)間的關(guān)系判定用Pearson相關(guān)分析及Logistic回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 NGT組與T2DM兩亞組間生化指標(biāo)及血清nesfatin－1的比較 T2DM兩亞組分別與NGT組比較可見(jiàn)BMI、GLU、HbA1c、低密度脂蛋白膽固醇（LDL－C）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、INS、HOMA－IR差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。T2DM 伴NAFLD組BMI、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）、ALT、INS、HOMA－IR高于 T2DM 不伴 NAFLD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。T2DM兩亞組血清nesfatin－1水平均明顯高于NGT組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；T2DM組中伴NAFLD組血清nesfatin－1水平高于T2DM不伴NAFLD組（P＜0.05）。T2DM兩亞組間病程差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組一般資料比較（±s）

表1 3組一般資料比較（±s）

a：P＜0.05，與NGT組比較；b：P＜0.05，與T2DM 不伴 NAFLD組比較；－：無(wú)數(shù)據(jù)。

項(xiàng)目 NGT組（n＝75）T2DM不伴NAFLD組（n＝98）T2DM伴NAFLD組（n＝113）37年齡（歲） 52.59±10.71 53.67±13.45 52.66±12.30病程（年） － 6.99±3.45 6.27±3.32 BMI（kg/m2） 24.42±2.25 22.48±2.78a 26.62±3.68ab GLU（mmol/L） 5.09±0.66 8.54±3.26a 8.35±2.41a HbA1c（%） 5.43±0.39 8.86±2.60a 8.45±1.96a TG（mmol/L） 1.73±0.49 2.02±0.87 3.02±2.47ab TC（mmol/L） 4.65±0.56 4.89±1.40 4.97±1.38 HDL－C（mmol/L） 1.04±0.13 1.16±0.27a 1.04±0.28b LDL－C（mmol/L） 2.75±0.76 3.41±1.07a 3.66±2.17a ALT（mmol/L） 26.83±12.71 22.04±10.72a 31.90±17.45ab INS（mIU/L） 9.76±2.34 11.41±4.30a 14.19±6.40ab HOMA－IR 2.24±0.69 4.48±2.87a 5.18±2.65ab nesfatin－1（ng/mL） 4.79±1.28 6.88±2.97a 9.74±5.77性別（男/女） 42/33 60/38 76/ab

2.2 T2DM組nefastin－1與病程的相關(guān)性分析 T2DM兩亞組間nefastin－1及病程均為正態(tài)分布，行Pearson相關(guān)分析得出r＝－0.477，P＜0.05，有中度相關(guān)，即隨著病程的進(jìn)展nefastin－1的值可能會(huì)降低。

2.3 T2DM組脂肪肝回歸分析 T2DM組中以脂肪肝為因變量，BMI、TG、HDL－C、ALT、INS、HOMA－IR、nesfatin－1為自變量行Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)BMI、TG、nesfatin－1與脂肪肝關(guān)系密切，見(jiàn)表2。

表2 脂肪肝影響因素的回歸分析

3 討 論

攝食和能量消耗與肥胖、代謝綜合征、T2DM的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。機(jī)體攝食和能量消耗主要由下丘腦調(diào)控，nesfatin－1是2006年日本學(xué)者在下丘腦和腦干中發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞因子，是由核組蛋白2（NUCB2）氨基端水解產(chǎn)生的含82個(gè)氨基酸組成的多肽。動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)大鼠腦室內(nèi)注射nesfatin－1后攝食呈劑量依賴(lài)性減少，體質(zhì)量下降［3］，腦室注射nesfatin－1抗體后大鼠食欲增加［4］。給予大鼠腹腔注射大劑量nesfatin－1同樣能夠抑制攝食，減輕體質(zhì)量。靜脈注射nesfatin－1可持續(xù)降低高血糖db/db小鼠的血糖達(dá)6h［5］，從而推測(cè)nesfatin－1可能與胰島素抵抗（IR）和機(jī)體糖脂代謝關(guān)系密切。但nesfatin－1具體作用機(jī)制尚未完全闡明。有研究發(fā)現(xiàn)中樞nesfatin－1通過(guò)激 活I(lǐng)nsR/IRS－1/AMPK/Akt/mTOR/TORc2信號(hào)通路改善肥胖大鼠肝胰島素敏感性［6］，Atsuchi等［7］發(fā)現(xiàn)中樞注射nesfatin－1通過(guò)抑制大鼠胃腸動(dòng)力從而起到抑制攝食減輕體質(zhì)量作用。目前關(guān)于nesfatin－1在T2DM伴NAFLD人群發(fā)病中的作用及相關(guān)影響因素的研究甚少，外周血中檢測(cè)到的nesfatin－1是否參與了機(jī)體能量代謝，國(guó)內(nèi)外幾項(xiàng)小樣本研究得到結(jié)論不一。Basar等［8］發(fā)現(xiàn)NAFLD患者血nesfatin－1較正常對(duì)照組低，許麗萍等［9］研究發(fā)現(xiàn)T2DM患者nesfatin－1水平與正常對(duì)照組無(wú)差異。Li等［10］研究報(bào)道T2DM患者血nesfatin－1水平低于正常人。本研究與近期一些小樣本研究結(jié)果相符，T2DM 患者血nesfatin－1明顯高于正常人，nesfatin－1與T2DM發(fā)生可能有關(guān)，且與胰島素抵抗關(guān)系密切［11－14］。甚至有學(xué)者報(bào)導(dǎo)nesfatin－1在妊娠糖尿病的發(fā)病中亦起到一定作用［15］。

NAFLD是一種與IR、遺傳易感密切相關(guān)的代謝性肝損傷，其與肥胖、高血壓、高血糖、血脂紊亂有關(guān)，同時(shí)NAFLD反過(guò)來(lái)又加重IR，加重糖尿病患者GLU的惡化。本研究發(fā)現(xiàn)T2DM組中伴NAFLD組血清nesfatin－1水平高于T2DM不伴NAFLD組，經(jīng)Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)nesfatin－1是脂肪肝的獨(dú)立影響因素，進(jìn)一步說(shuō)明nesfatin－1在T2DM伴NAFLD的發(fā)生中有一定作用。本研究還需進(jìn)一步深入觀察改善GLU控制及脂肪肝狀況后nesfatin－1水平的變化。Foo等［16］發(fā)現(xiàn)nesfatin－1和胰島素共同表達(dá)于胰腺β細(xì)胞，當(dāng)受到高血糖刺激后，正常鼠胰島β細(xì)胞分泌nesfatin－1也增高，提示nesfatin－1可能伴隨胰島素釋放入血。高胰島素水平反過(guò)來(lái)又刺激下丘腦室旁核nesfatin－1神經(jīng)元，導(dǎo)致血nesfatin－1水平進(jìn)一步增加［17］。細(xì)胞學(xué)觀察到nesfatin－1通過(guò)促進(jìn)胰島細(xì)胞L型通道鈣內(nèi)流促進(jìn)胰島素分泌從而改善糖代謝［18］。

本研究亦發(fā)現(xiàn)，nesfatin－1與糖尿病病程呈負(fù)相關(guān)，可能在起病早期nesfatin－1對(duì)高血糖刺激有代償升高，nesfatin－1可能是機(jī)體在T2DM初期的一種代償性保護(hù)作用分子，通過(guò)與胰島素、胰高血糖素等激素的相互作用，抑制攝食，減輕體質(zhì)量等方式調(diào)控機(jī)體糖脂代謝紊亂。但nesfatin－1是否具有胰島素樣生物學(xué)作用，nesfatin－1是否像胰島β細(xì)胞分泌胰島素功能隨著病程延長(zhǎng)逐漸衰退，補(bǔ)充nesfatin－1是否對(duì)改善IR，控制GLU有益還有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。有研究發(fā)現(xiàn)T1DM及T2DM小鼠胰島細(xì)胞表達(dá)nesfatin－1有差異［19］，是否不同類(lèi)型糖尿病患者nesfatin－1表達(dá)存在差異也需進(jìn)一步研究證實(shí)。

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