糖類抗原-125與人附睪蛋白4聯(lián)合檢測女性卵巢及子宮疾病的研究

黃茂華，王樹英，伍克儉，夏慶宇，靳志棟，舒成鳳

(重慶市璧山區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 402760)

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·論 著·

糖類抗原-125與人附睪蛋白4聯(lián)合檢測女性卵巢及子宮疾病的研究

黃茂華，王樹英，伍克儉，夏慶宇，靳志棟，舒成鳳

(重慶市璧山區(qū)人民醫(yī)院檢驗科 402760)

目的 探討糖類抗原-125(CA125)與人附睪蛋白4(HE4)聯(lián)合檢測女性卵巢及子宮疾病的價值。方法 選擇2010年10月至2013年12月在該院就診的52例惡性卵巢腫瘤和118例良性卵巢腫瘤患者，檢測患者的血清CA125與HE4水平。另選同期在該院進(jìn)行健康體檢的健康女性100例作為健康對照組，并繪制ROC曲線，計算AUC值，比較聯(lián)合檢測與單項檢測的評價指標(biāo)。結(jié)果 良性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而惡性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125水平較健康對照組明顯升高；惡性卵巢腫瘤組HE4檢測陽性率(80.8%)明顯高于CA125的陽性率(76.9%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；良性卵巢腫瘤組HE4檢測陽性率與CA125差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；HE4檢測的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均明顯高于CA125，聯(lián)合檢測的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值高于單項檢測，與HE4比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與CA125比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，聯(lián)合檢測的靈敏度、AUC明顯高于單項檢測。結(jié)論 CA125與HE4聯(lián)合檢測女性卵巢及子宮疾病可提高檢測的靈敏度，適用于女性健康體檢的評估。

糖類抗原125； 血清人附睪分泌蛋白4； 卵巢及子宮疾病

卵巢和子宮疾病是女性最常見的生殖器官疾病，其發(fā)病率和復(fù)發(fā)率均較高，且呈逐年上升趨勢，嚴(yán)重影響女性的身體健康和生活質(zhì)量。其中卵巢癌、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫是對女性健康危害最嚴(yán)重的幾種疾病。目前卵巢和子宮疾病篩查及評估預(yù)后中最常使用的血清學(xué)標(biāo)記物是糖類抗原-125(CA125)，但其敏感性和特異性均較低[1]。英國的一項試驗結(jié)果顯示，陰道超聲聯(lián)合CA125靈敏度可達(dá)到89.5%，但陽性預(yù)測值僅為40%[2]。為了提高對卵巢癌的檢出率，研究人員都在試圖探尋能與CA125相互補的腫瘤標(biāo)記物。今年來有研究發(fā)現(xiàn)人附睪蛋白4(HE4)在子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌中表達(dá)上調(diào)，可以成為子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌篩查的血清標(biāo)志物[3-4]。本研究通過檢測血清HE4和CA125卵巢癌、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫女性中的水平，探討CA125與HE4聯(lián)合檢測女性卵巢及子宮疾病的靈敏度和特異性，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年10月至2013年12月在本院確診為惡性卵巢腫瘤的女性患者52例(設(shè)為惡性卵巢腫瘤組)，平均年齡55歲。其中，漿液性癌18例，黏液性癌15例、子宮內(nèi)膜癌10例、宮頸癌7例、絨毛膜癌2例；良性卵巢腫瘤患者118例(設(shè)為良性卵巢腫瘤組)，平均年齡52歲。卵巢良性腫瘤65例、子宮內(nèi)膜異位癥29例、子宮肌瘤24例；另選在本院健康體檢的健康女性100例(設(shè)為健康對照組)，平均年齡50歲。三組研究對象年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究均獲得患者的知情同意。

1.2 試劑與儀器 HE4檢測試劑盒(瑞典康乃格CanAg Diagnostics AB公司)；StatFax2200孵化振蕩器(美國Awareness公司)、BIO-RAD model 680酶標(biāo)儀(美國Bio-Rad公司)、iWO-960全自動洗板機(鄭州安圖生物工程有限公司)、KDC．2046立式低速離心機(科大創(chuàng)新有限公司)、ROCHE E170電化學(xué)發(fā)光免疫全自動分析儀(美國Bio-Rad公司)。

1.3 方法 (1)樣本采集：采取空腹靜脈血3～5 mL，靜置30 min，3 000 r/min離心5 min，分離血清，零下80 ℃冰箱保存待測。(2)HE4測定：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測HE4，嚴(yán)格按說明書要求操作，使用酶標(biāo)儀在405 nm波長進(jìn)行比色，并通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算測定值。(3)CA125測定：采用電化學(xué)發(fā)光法測定CA125。HE4>150 μmol/L為陽性，CA125>35 U/mL為陽性。靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%，特異性=真陰性/(假陽性+真陰性)×100%，陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%，陰性預(yù)測值=真陰性/(假陰性+真陰性)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 三組HE4和CA125表達(dá)水平比較 良性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而惡性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125水平較健康對照組明顯升高(P<0.01)，見表1。

表1 兩組HE4和CA125表達(dá)水平比較

2.2 兩種腫瘤標(biāo)志物陽性率的比較 惡性卵巢腫瘤組HE4檢測陽性率(80.8%)明顯高于CA125的陽性率(76.9%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；良性卵巢腫瘤組HE4檢測陽性率與CA125差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 兩種腫瘤標(biāo)志物陽性率的比較[n(%)]

2.3 單項檢測與聯(lián)合檢測結(jié)果比較 HE4檢測的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值均明顯高于CA125，聯(lián)合檢測的靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值高于單項檢測，與HE4比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，與CA125比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，提示聯(lián)合檢測優(yōu)于任一標(biāo)志物單項檢測，見表3。

表3 HE4和CA125單獨檢測與聯(lián)合檢測結(jié)果比較(%)

注：與聯(lián)合檢測比較，*P<0.05。

2.4 血清CA125、HE4與聯(lián)合診斷的ROC曲線評價 應(yīng)用MedCale12.7.6軟件構(gòu)建單項檢測和聯(lián)合檢測的ROC曲線，計算單項檢測和聯(lián)合檢測的AUC值分別是0.713、0.576、0.851，聯(lián)合檢測明顯高于單項檢測(P<0.05)，見表4。

表4 血清CA125、HE4與聯(lián)合診斷的ROC曲線評價

注：與聯(lián)合檢測比較，*P<0.05。

3 討 論

卵巢癌、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫是婦科對女性健康危害最嚴(yán)重的疾病，且發(fā)病多比較隱匿，發(fā)現(xiàn)時已是中晚期。如果早期發(fā)現(xiàn)及時治療其5年生存率可以提高到90%，所以卵巢和子宮疾病的早期診斷對提高患者生存率意義重大。目前臨床卵巢和子宮疾病的檢查方法主要有婦科檢查、腫瘤標(biāo)志物檢查和影像學(xué)檢查等。其中婦科檢查具有較高的特異性但是靈敏度低，且受檢查醫(yī)師臨床經(jīng)驗限制[5]。CA125作為卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物其臨床應(yīng)用已經(jīng)非常廣泛，但其對早期的卵巢癌患者檢查靈敏度較低，這一直是制約CA125作為卵巢癌一線篩查方法的重要因素，Skates等[6]研究發(fā)現(xiàn)，血清CA125水平有不斷升高的趨勢，即使目前CA125水平在正常范圍，也不能排除患卵巢癌的風(fēng)險。為了提高對卵巢癌的檢出率，研究人員都在試圖探尋能與CA125檢測聯(lián)合的檢測方法,以提高卵巢及子宮疾病的早期篩查的靈敏度。Stirling等[7]采用CA125聯(lián)合陰道超聲,對1 100例高危婦女進(jìn)行了篩查,篩查結(jié)果顯示，這兩種方法并不能增加早期卵巢癌的檢出率及改善預(yù)后。近年來有研究發(fā)現(xiàn)HE4在子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌中表達(dá)上調(diào)，可以成為子宮內(nèi)膜癌和卵巢癌篩查的血清標(biāo)志物[8]。HE4是一種在卵巢上皮性癌中表達(dá)的糖蛋白，為一種小分子蛋白，含有WAP結(jié)構(gòu)域，與蛋白酶抑制劑有較高的同源性。大多數(shù)卵巢癌患者中血清HE4水平明顯提高，而在健康者及卵巢良性腫瘤患者血清中水平很低。HE4表達(dá)與卵巢癌的臨床分期密切相關(guān)，早期卵巢癌患者HE4和CA125表達(dá)水平明顯高于非惡性者，而晚期又明顯高于早期。本研究結(jié)果顯示，良性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，而惡性卵巢腫瘤組血清HE4和CA125水平較健康對照組明顯升高(P<0.01)。HE4用于卵巢癌的檢查特異性高于CA125，Drapkin等[9]研究發(fā)現(xiàn)，HE4在100%的卵巢子宮內(nèi)膜樣癌及93%的卵巢漿液性囊腺癌中表達(dá)。此外，Montagnana 等[10]研究證實，血清HE4的水平在早期卵巢癌中明顯高于CA125水平，其在早期卵巢癌診斷中的靈敏度為71.7%，明顯高于血清CA125的45.9%。本研究中單項檢測CA125、HE4靈敏度分別為43.8%、63.5%，特異性為82.2%、91.5%，與上述研究結(jié)果一致，故HE4可以作為卵巢及子宮疾病篩查的指標(biāo)。但研究發(fā)現(xiàn)，HE4在用于女性疾病診斷時，女性經(jīng)期對其影響比較大，而且兩種方法單獨用于卵巢和女性子宮疾病的檢查都存在較高的假陽性。為克服假陽性較高的缺點，本研究對HE4和CA125聯(lián)合檢測，結(jié)果表明，與單項檢測相比，聯(lián)合檢測的AUC值明顯高于單項檢測，靈敏度明顯提高。

綜上所述，HE4和CA125聯(lián)合檢測用于女性卵巢和子宮疾病，可明顯提高靈敏度，在卵巢及子宮疾病早期診斷和治療中效果較好，適用于女性健康體檢的評估。

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Study on combined detection of HE4 and CA125 assay in female ovary and uterine diseases

HUANGMao-hua,WANGShu-ying,WUKe-jian,XIAQing-yu,JINZhi-dong,SHUCheng-feng

(DepartmentofClinicalLaboratory,BishanCountyPeople′sHospital,Chongqing402760,China)

Objective To study the value of the combined detection of HE4 and CA125 in female ovary and uterine diseases.Methods 52 cases of malignant ovarian tumors and 118 cases of benign ovarian tumors in our hospital from October 2010 to December 2013 were selected and detected the serum levels of CA125 and HE4.Contemporaneous 100 females of healthy physical examination were selected as the healthy control group.The ROC curve was drawn and AUC value was calculated.The values of the joint detection and single indicator detection were evaluated.Results The serum HE4 and CA125 levels had no statistically significant difference between the benign ovarian tumor group and the healthy control group (P>0.05);the serum HE4 and levels in the malignant ovarian tumor group were significantly higher than those in the healthy control group;the positive detection rate of HE4 in the malignant ovarian tumor group was significantly higher than that of CA125,the difference was statistically significant(80.8%vs.76.9%,P<0.05);the positive detection rate in the benign ovarian tumor group had no statistical difference between CA125 and HE4(P>0.05);the sensitivity,specificity,positive predictive value and negative predictive value of the HE4 detection were significantly higher than those of CA125,which of the combined detection were higher than those of the single detection,but which had no statistical difference compared with HE4(P>0.05) and had statistical difference compared with HE4(P<0.05).Conclusion The combined detection of HE4 and CA125 can increase the detection sensitivity in female ovarian and uterine diseases and is suitable for the evaluation of women′s health check-up.

carbohydrate antigen 125; serum human epididymis secretory protein 4; ovary and uterus disease

黃茂華，女，大專，主管檢驗師，主要從事免疫學(xué)檢驗工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.13.037

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1672-9455(2015)13-1904-03

2015-01-20

2015-03-20)