艾瑞德免疫分析儀C反應(yīng)蛋白檢測項(xiàng)目的性能評(píng)價(jià)

姜 華，吳軍錄，姚懿雯，戴 燕，萬海英

(同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海 200065)

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·論 著·

艾瑞德免疫分析儀C反應(yīng)蛋白檢測項(xiàng)目的性能評(píng)價(jià)

姜 華，吳軍錄，姚懿雯，戴 燕，萬海英

(同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海 200065)

目的 對(duì)檢測C反應(yīng)蛋白的艾瑞德干式免疫分析儀進(jìn)行性能驗(yàn)證，確保其結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。方法 參考美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的EP5-A2文件進(jìn)行精密度驗(yàn)證，參考EP15-A2文件進(jìn)行正確度的驗(yàn)證，參考EP6-A2文件進(jìn)行線性范圍的驗(yàn)證，參考CLSI C28-A2文件進(jìn)行參考區(qū)間的驗(yàn)證，參考常規(guī)檢測方法進(jìn)行攜帶污染率的驗(yàn)證。結(jié)果 全血高、低濃度批內(nèi)精密度分別為3.29%、3.68%，總精密度分別為4.91%、5.26%；參考區(qū)間為0～10 mg/L；線性回歸方程Y=1.070 2X+0.448 4，r=0.979；線性范圍為2.5～160.0 mg/L；攜帶污染率小于1%。結(jié)論 艾瑞德免疫分析儀具有良好的精密度、準(zhǔn)確度，較寬的線性范圍、較快的檢測速度等優(yōu)點(diǎn)，適用于臨床檢測。

C反應(yīng)蛋白； 性能驗(yàn)證； 應(yīng)用

C反應(yīng)蛋白(CRP)是一種經(jīng)典的急性時(shí)相蛋白，1930年由Tiettl 及Trannis首先在急性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)，此后其在臨床中的應(yīng)用越來越廣泛。目前，普遍認(rèn)為CRP有助于區(qū)分機(jī)體感染和非感染的急慢性炎癥，鑒別細(xì)菌和病毒感染、監(jiān)控創(chuàng)傷、術(shù)后感染、器官移植、抗菌藥物療效、區(qū)別不同臨床狀態(tài)等[1]。本研究為了解艾瑞德免疫分析儀的性能，從總精密度、批內(nèi)精密度、正確度、參考區(qū)間、線性范圍、攜帶污染率等幾個(gè)方面進(jìn)行驗(yàn)證來評(píng)價(jià)其在臨床應(yīng)用方面的可靠性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 采用艾瑞德免疫分析儀及配套試劑。比對(duì)前做好儀器維護(hù)及校準(zhǔn)，檢測期間做好室內(nèi)質(zhì)控。

1.2 標(biāo)本來源 所有標(biāo)本均來自2012年3月至2014年5月上海市同濟(jì)醫(yī)院的門、急診和住院患者。標(biāo)本均用乙二胺四乙胺二鉀(EDTA-K2)真空抗凝管采集。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.2 正確度參考CLSI EP15-A2[3]文件評(píng)價(jià)方案使用上海市臨床檢驗(yàn)中心的調(diào)查品驗(yàn)證：選擇5種水平的調(diào)查品，分別上機(jī)檢測2次，收集測定結(jié)果計(jì)算均值。均值落在相應(yīng)的靶值范圍內(nèi)為可接受。

1.3.3 線性范圍參考CLSI EP6-A2[4]文件選取一份高值(H)和一份低值(L)患者標(biāo)本(廠家標(biāo)定線性參數(shù)為2.5～160.0 mg/L)。標(biāo)本分別按L、9L+1H、8L+2H、7L+3H、6L+4H、5L+5H、4L+6H、3L+7H、2L+8H、L+9H、H的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測定3次，計(jì)算均值。將實(shí)測值與理論值作比較，計(jì)算Y=bX+a，驗(yàn)證線性范圍。結(jié)果判斷：斜率b值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975即線性符合要求。

1.3.4 參考區(qū)間參考CLSI C28-A2[5]文件搜集男女各20例體檢健康人標(biāo)本，上機(jī)檢測每份標(biāo)本測定2次取均值，若90%的檢測值在廠家所提供的參考區(qū)間內(nèi)(0～10 mg/L)，則認(rèn)為參考區(qū)間為可接受。

1.3.5 攜帶污染率采用常規(guī)檢測方法進(jìn)行攜帶污染率實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。收集低值樣本(L)和高值樣本(H)，二者的濃度盡可能相差10倍。將低值樣本(L)和高值樣本(H)按下列順序上機(jī)測定：L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6、H4、H5、H6、L7、L8、L9、H7、H8、H9、L10。攜帶污染率(K)小于1%，結(jié)果為可接受。計(jì)算公式：

2 結(jié) 果

2.1 批內(nèi)、總密度 檢測均值為30、100 mg/L中、高兩種水平的患者血清，根據(jù)CLSI EP5-A2評(píng)價(jià)方案的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行分析，如表1所示，批內(nèi)精密度、總精密度2個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)與廠家提供的性能要求比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，該精密度可接受。

表1 2個(gè)不同濃度水平患者血清批內(nèi)、批間精密度(%)

2.2 正確度 檢測5種水平的調(diào)查品，其結(jié)果均在相應(yīng)的靶值范圍內(nèi)，該儀器的正確度可接受。見表2。

表2 5種水平的調(diào)查品檢測結(jié)果(mg/L)

表3 高值(H)和低值(L)患者標(biāo)本進(jìn)行比例 稀釋檢測結(jié)果(mg/L)

圖1 標(biāo)本理論值與檢測值的回歸方程

2.3 線性范圍 選取一份高值和低值患者標(biāo)本進(jìn)行比例稀釋檢測，結(jié)果見表3。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示r=0.979，b=1.070 2，回歸方程Y=1.070 2X+0.448 4(Y為測定值,X為理論值)，斜率b值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r>0.975，在2.5～160 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。見圖1。

2.4 參考區(qū)間 CRP在健康人群中為左偏態(tài)分布,因此統(tǒng)計(jì)方法采用百分位數(shù)，用40例健康人標(biāo)本數(shù)據(jù)驗(yàn)證結(jié)果的中位數(shù)為4.8 mg/L，其最小值至最大值范圍為2.5～8.6 mg/L，所選標(biāo)本的檢測值100%落在0～10 mg/L參考區(qū)間范圍內(nèi)。

2.5 攜帶污染率 將低值標(biāo)本(L)和高值標(biāo)本(H)按下列順序L1、L2、L3、H1、H2、H3、L4、L5、L6、H4、H5、H6、L7、L8、L9、H7、H8、H9、L10上機(jī)檢測，計(jì)算出、攜帶污染率為K=0.88%，滿足K<1%的要求。

3 討 論

CRP對(duì)于疾病的診斷雖無特異性，但其濃度上升是炎癥和組織損傷的靈敏指標(biāo)[6-7]。CRP快速定量檢測能夠給臨床醫(yī)生及時(shí)提供定量結(jié)果,特別為是否使用抗菌藥物提供了依據(jù)[8]。艾瑞德干式免疫分析儀能夠在5 min內(nèi)獲得CRP定量結(jié)果,可以滿足臨床早期診斷和及時(shí)判斷療效的需要。

從試驗(yàn)結(jié)果來看，艾瑞德干式免疫分析儀具有良好精密度，批內(nèi)精密度低值CV為3.68%，高值CV為3.29%；總精密度低值CV為5.26%，高值CV為4.91%，均滿足實(shí)驗(yàn)要求；試劑盒的線性范圍是2.5～160.0 mg/L，測試結(jié)果在此范圍內(nèi)呈良好的線形關(guān)系，相關(guān)系數(shù)(r)>0.975，截距較小，標(biāo)本在本實(shí)驗(yàn)的高、低范圍內(nèi)線形理想。正確度參照上海市臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)質(zhì)控品進(jìn)行的比對(duì)實(shí)驗(yàn)顯示，正確度符合臨床要求；參考區(qū)間驗(yàn)證符合廠家說明；攜帶污染率小于1%。而且，該機(jī)器操作簡單，模式多樣化，適合多種類標(biāo)本的測定。

綜上所述，艾瑞德干式免疫分析儀主要分析性能驗(yàn)證結(jié)果符合質(zhì)量目標(biāo)，能夠滿足臨床的質(zhì)量要求。對(duì)檢測系統(tǒng)的性能進(jìn)行有效的評(píng)估，有助于提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

[1]阮晶華，王燕，宋克征．血清中CRP濃度測定的臨床價(jià)值[J]．中國醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2004，5(1)：62-64．

[2]NCCLS.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods[S].Wayne,PA，USA:NCCLS，2004.

[3]NCCLS.User demonstration of performance for prevision and accuracy[S] .Wayne,PA，USA:NCCLS,2004.

[4]NCCLS.Evaluation of the linearity of quantitative measurement proceduers[S].Wayne,PA，USA:NCCLS,2003.

[5]Clinical Laboratory Standards Institute.How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory[S].Wayne,PA，USA:NCCLS,2000.

[6]Charurnks N，Laoha jinda B，Ruji S，et al， Reference value for C-reactive protein and its distribution pattern in Thai adults[J].Cire J，2005，69(3):339-344.

[7]Young B，Gleeson M，Gripps AW.C-reactive protein:a critical review[J].Pathology，1991，23(3):118-124.

[8]柴舟，張佑貴.C反應(yīng)蛋白在兒科感染性疾病診斷中的應(yīng)用[J].咸寧學(xué)院學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2008，22(3):249.

Evaluate performance of i-READER immunity analyzer in C reactive protein detection

JIANGHua,WUJun-lu,YAOYi-wen,DAIYan,WANHai-ying

(DepartmentofClinicalLaboratory,TongjiHospitalofTongjiUniversity,Shanghai200065,China)

Objective To evaluate the performance of i-READER immunity analyzer in C reactive protein(CRP) detection.Methods The precision,accuracy,linearity and reference interval of CRP were validated according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) documents EP5-A2,EPl5-A2,EP6-A2 and C28-A2 respetively.Conventional detection method was used to measure carry pollution rate.Results The within-run precisions of high level and low level samples of CRP were 3.29% and 3.68% respectively.And the total precisions were 4.91% and 5.26% respectively.The reference interval of CRP was between 0 and 10 mg/L.Equation of linear regression wasY=1.070 2X+0.448 4 (r=0.979) and linearity range was from 2.5 to 160.0 mg/L.The carry pollution was less than 1%.Conclusion The i-reader immunity analyzer might be suitable for clinical testing with good precision,accuracy,wide linear range and faster detection speed.

C-reactive protein； performance evaluation; application

姜華，女，本科，初級(jí)檢驗(yàn)師，主要從事凝血相關(guān)研究工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.04.013

A

1672-9455(2015)04-0466-02

2014-07-17

2014-09-22)