沈加賢(福建省龍巖市永定區(qū)中醫(yī)院 檢驗(yàn)科,福建龍巖364100)
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食物過敏癥患者48例血清特異性IgE的檢測
沈加賢
(福建省龍巖市永定區(qū)中醫(yī)院檢驗(yàn)科,福建龍巖364100)
〔摘要〕目的:探討食物過敏癥患者48例血清中食物過敏原的特異性IgE水平。方法:采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測患者組48例,正常組30例血清中的特異性IgE,比較兩組檢測結(jié)果。結(jié)果:患者組血清過敏原特異性IgE有不同程度增高,陽性率依次為蝦37.5%、蟹20.8%、鱈魚10.5%、蘑菇10.5%、雞蛋8.3%、牛肉8.3%、花生6.2%、牛奶4.7%、大豆2.1%,雞肉、豬肉、大米均為0;正常組僅蝦、牛肉特異性IgE輕度增高,陽性率為6.7%、3.3%,其余陰性。結(jié)論:食物過敏癥患者血清食物過敏原特異性IgE升高明顯,采用ELISA陽性率高,提示對臨床確診與防治食物過敏癥有重要意義。
〔關(guān)鍵詞〕特異性IgE;食物過敏原;過敏性疾病
過敏性疾病對人類健康的危害日益嚴(yán)重,隨著環(huán)境污染加劇及轉(zhuǎn)基因食物的推廣與普及,食物過敏性疾病患者日益增多。目前臨床采用皮膚試驗(yàn)(皮試)診斷過敏性疾病,該法雖快速簡便,但造成患者痛苦,不安全及不易定量,且結(jié)果特異性和敏感性差,不利于臨床上變態(tài)反應(yīng)性疾病的及時(shí)確診和治療[1]。文獻(xiàn)報(bào)道過敏性疾病患者血清中特異性IgE水平升高[2],檢測血清中特異性IgE對過敏性疾病的診斷和治療都有實(shí)際意義,我們采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對48例食物過敏癥患者進(jìn)行血清特異性IgE檢測,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1一般資料
1.1.1分組?;颊呓M:從2008年1月至2012年2月我院明確食物過敏性疾病、且查出有一項(xiàng)以上食物變應(yīng)原皮試結(jié)果陽性(+)患者48例,男性29例,女性19例,平均年齡29±14歲。正常組:無過敏史正常人30例,男性18例,女性12例,平均年齡26±14歲。
1.1.2主要試劑與儀器。Allerqueant食物過敏原IgE抗體檢測試劑盒,海奧制劑公司提供。標(biāo)準(zhǔn)過敏原皮試診斷試劑盒。全自動酶標(biāo)儀(Thermo Multiskan MK3,UK)。
1.2方法
以ELISA對血清中過敏原特異性IgE進(jìn)行檢測:靜脈取血,分離血清,取待檢血清標(biāo)本在反應(yīng)管中室溫反應(yīng)100 min,漂洗后在反應(yīng)管中加入抗IgE尿素酶結(jié)合液,室溫孵育16 h,漂洗反應(yīng)管,并加入含溴甲酚紫和尿素的底物/指示劑,顯色90 min內(nèi)觀察反應(yīng)管顏色變化,黃色不變?yōu)殛幮?,顏色由黃色變?yōu)樽仙珵殛栃浴H坎僮骶鶉?yán)格按試劑盒操作規(guī)程進(jìn)行。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用χ2檢驗(yàn)作分析比較。
表1 48例食物過敏癥特異性IgE陽性率(%)
48例食物過敏癥患者行食物變應(yīng)原皮試呈一項(xiàng)以上皮試陽性,強(qiáng)度在+~++++,與臨床病史一致,測定血清過敏原特異性IgE均升高,總陽性率100%,與皮試結(jié)果相符。各種食物過敏原特異性IgE陽性率見表1。其中以血清蝦、蟹特異性IgE檢出率高。正常組中僅檢出2例蝦和1例雞蛋特異性IgE輕度升高,其余均為陰性。兩組比較有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。48例患者對一種過敏原特異性IgE陽性者19例,兩種以上過敏原呈陽性反應(yīng)22例,表明同時(shí)對多種過敏原產(chǎn)生過敏,見表2。
表2 多種過敏原特異性IgE的人數(shù)
過敏性疾病是一類常見變態(tài)反應(yīng)性疾病,由于其癥狀復(fù)雜,種類繁多,危害廣泛難以根治,成為長期以來醫(yī)學(xué)界的一大難題[3]。在過去的20年里,過敏性疾病發(fā)病率顯著上升,隨著工業(yè)發(fā)展加速以及基因食品的普及,食物過敏成為食品安全隱患之一。食品變應(yīng)原的安全問題亦已引起廣泛的關(guān)注,其潛在的過敏原性是急需研究的新課題。調(diào)查表明,全世界有25%以上的人受過敏性疾病困擾[4]。目前大約有160種食品含有變應(yīng)原。聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)(1995年)報(bào)告的8類常見過敏食物是牛奶、雞蛋、魚、甲殼類(蝦、蟹、鱉)、花生、大豆、堅(jiān)果類(板栗、杏、腰果等)及小麥等,約占所有過敏食物的90%[5]。在美國、日本和歐洲等國家,變應(yīng)原的檢測已相當(dāng)普遍,但在我國變應(yīng)原的檢測尚未得到應(yīng)有的重視。本試驗(yàn)檢測48例過敏性疾病患者變應(yīng)原以蝦、蟹等海產(chǎn)品居多,這與惠州地區(qū)的地理環(huán)境密切相關(guān),因?yàn)榛葜莸靥帍V東省東南部,為全省海洋大市之一,海域漁業(yè)資源豐富,海產(chǎn)品如蝦、螃蟹、各種海魚易得,為過敏體質(zhì)的患者發(fā)生變態(tài)反應(yīng)疾病提供了過敏原。
正常人的血清中IgE含量極低,而在過敏患者體內(nèi)特異性IgE含量異常增高。過敏原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性IgE、靶細(xì)胞致敏、過敏介質(zhì)產(chǎn)生和釋放、效應(yīng)器官的反應(yīng)共同構(gòu)成一個(gè)級聯(lián)反應(yīng)體系,其中IgE處于核心環(huán)節(jié)[1,2]。因此,IgE測定成為目前公認(rèn)的檢測I型病態(tài)反應(yīng)的最有效手段之一[6]。測定特異性IgE方法主要有:放射性變應(yīng)原特異性抗體進(jìn)行過敏性疾病的診斷和治療[7]。但僅檢測總IgE或針對少數(shù)常見變應(yīng)原的特異性IgE不能反映機(jī)體變應(yīng)原的特異性,只有檢測IgE與特定變應(yīng)原結(jié)合時(shí)才可以診斷變應(yīng)原。目前國內(nèi)一般采用皮內(nèi)點(diǎn)刺及劃痕試驗(yàn),盡管此法快速簡便直觀,但可出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果,且變應(yīng)原選擇數(shù)量有限,選擇過多的變應(yīng)原則依從性差,同時(shí)在試驗(yàn)過程中易發(fā)生過敏反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測皮試陽性患者血清變應(yīng)原的特異度IgE均明顯升高,特異度強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性好,可以更安全、快速、方便地為臨床過敏性疾病的診斷提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[參考文獻(xiàn)]
[1] Scheurer S, Son DY, Boehm M, et al. Cross-reactivity and epitope analysis of Pru a 1, the major chergen[J]. Mol Immunol, 1999,36 (3):155-167.
[2] Lehrer SB, Reish R, Fernandes J, et al. Enhancement of murine IgE antibody detection by IgG removal[J]. J Immunoe Methodes,2004, 284(1~2):1-6.
[3] 聶凌鴻. 食物過敏原研究進(jìn)展[J]. 生命的化學(xué),2002,22(5):474-477.
[4] Poulsen LK, In vivo and vitro techniques to determine the biological activity of food allergens[J]. J Chromatogr B Biomed Sci Appl,2001, 756(1-2):41-55.
[5] FAO Report of the FAO Technical Consultation on Food Allergies[R]. Food and Agriculture Organization, Rome, 1995.
[6] Plebani M. Clinical value and measument of specific IgE[J]. Clin Bi-ochem, 2003, 36(6):453-469.
[7] Vaenta R, Flicker S, Eibensteiner PB, et al. Recombinant allergen-specific antibody fragments:tools for diagnosis,prevention and therapy of type 1 allergy[J]. Biol Chem, 1997,378(8):745-749.
收稿日期:2015-04-15
〔中圖分類號〕R781.6+7
〔文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕B
〔文章編號〕1002-2376(2015)10-0081-02