物質(zhì)與能量添加劑在中藥分離中的應(yīng)用

王俊超 潘佳偉 韓 偉

（華東理工大學(xué)中藥現(xiàn)代化工程中心，上海200237）

0 引言

眾所周知，自然界的自發(fā)現(xiàn)象，比如鹽粒溶于水，是一個(gè)熵增過程。反之，要把鹽水分為純凈的鹽和水就必須采用容器（設(shè)備）加熱使水分蒸發(fā)，水蒸氣冷凝為純水，鹽在變濃的溶液中結(jié)晶成純鹽，這樣就完成了熵值減小的分離過程，即外界必須對(duì)系統(tǒng)做功。做功的分離劑分為2大類：一類為能量添加劑，諸如熱、壓力、電、磁、離心、輻射等；另一類為物質(zhì)添加劑，諸如過濾介質(zhì)、吸收劑、表面活性劑、吸附劑、液膜及固膜材料等。分離劑在中藥分離中的應(yīng)用如圖1所示。

圖1 分離劑在中藥分離中的應(yīng)用

我國作為中醫(yī)藥的發(fā)源地，擁有上千年的中醫(yī)藥發(fā)展史和豐富的中藥資源。然而，傳統(tǒng)的中藥提純分離方法，如熱水浸提法（煎煮法）、乙醇浸提法、滲濾法、回流法等，普遍存在有效成分收率低、純度低、工序多、周期長和能耗高等缺點(diǎn)，添加分離劑（物質(zhì)或能量添加劑）既可顯著提高中藥的提取效率，又可降低提取成本，省時(shí)、高效、節(jié)能。

本文將對(duì)常用分離劑（物質(zhì)或能量添加劑）在中藥提取分離方面的應(yīng)用進(jìn)行綜述。

1 常用物質(zhì)添加劑在中藥提取方面的應(yīng)用

在中藥提取過程中，常用的物質(zhì)添加劑主要有酸、堿、酶、表面活性劑、固膜材料等。

1.1 加酸、堿輔助提取

溶劑中使用酸的目的主要是促進(jìn)生物堿與酸生成可溶性生物堿類，以利于提取，而且適當(dāng)?shù)乃岫冗€可以對(duì)一些生物堿產(chǎn)生穩(wěn)定作用，并能沉淀某些雜質(zhì)。若所提取的成分是有機(jī)酸時(shí)，加入一定量的酸可以使有機(jī)酸游離，再用有機(jī)溶劑將有機(jī)酸提取，這樣可取得良好的提取效果。

中藥中常用的堿主要為氨水，是一種揮發(fā)性弱堿，對(duì)有效成分的破壞作用小，也容易控制其質(zhì)量。在溶劑中加入微量的氨溶液能防止其酸性皂苷緩慢水解而產(chǎn)生渾濁或沉淀。在干草提取過程中加入適量的氨溶液以保證甘氨酸能提取完全[1]。

1.2 生物酶解提取

在中藥提取過程中，細(xì)胞原生質(zhì)體中的有效成分向提取介質(zhì)擴(kuò)散時(shí)，必須克服細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)間質(zhì)的雙重阻力。通過選用一些恰當(dāng)?shù)拿割悾ɡw維素酶、半纖維素酶、果膠酶等）作用于藥用植物細(xì)胞，可以破壞細(xì)胞壁的致密結(jié)構(gòu)，引起細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)間質(zhì)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生局部疏松、膨脹、崩潰等，有利于有效成分的溶出。

生物酶解法所具有的獨(dú)特優(yōu)勢，使其在中藥提取領(lǐng)域中占有重要的地位，應(yīng)用非常廣泛，并取得了一定的進(jìn)展。

禹華娟[2]等用果膠酶和纖維素酶對(duì)蓮房組織進(jìn)行酶解，采用四因素三水平正交實(shí)驗(yàn)獲得最佳工藝：纖維素酶添加量為0.7%、果膠酶添加量0.1%、酶解溫度55℃、酶解時(shí)間2.5 h。優(yōu)化后的提取工藝與直接醇提法相比，能將蓮房原花青素的提取率提高約48%。在上述研究基礎(chǔ)上采用DPPH法進(jìn)行了抗氧化性的對(duì)比，結(jié)果表明，酶輔助提取和醇提法提取的原花青素有著相同的抗氧化性。

劉靜波[3]等采用胰蛋白酶提取黑木耳中的膠原蛋白，將酶提取法、酸提取法、堿提取法、熱水提取法進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，以膠原蛋白得率為衡量指標(biāo)，相對(duì)于酸提取法和堿提取法，酶提取法的提取優(yōu)點(diǎn)不僅在于得率最高，而且對(duì)膠原蛋白的破壞性較小，最后對(duì)工藝進(jìn)行了優(yōu)化：采用胰蛋白酶，酶解pH值為8.0、液料比為52.5:1（mL/g）、酶添加量為8%、酶解時(shí)間為2 h，在此條件下從黑木耳中提取膠原蛋白的得率達(dá)到1.091%。

Shengnan Wang[4]等采用水酶法，用堿性蛋白酶對(duì)松子進(jìn)行了酶解，采用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面分析法確定了最佳工藝：酶添加量為1.9%、酶解溫度55℃、酶解時(shí)間2.2 h、固液比為1:5、酶解pH值為8.8，總提取率可達(dá)到87.92%。

汪志慧[5]等采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化雙酶法提取蓮房原花青素，確定最佳工藝參數(shù)：酶解溫度53 ℃、酶解時(shí)間1.6 h、pH 4.8、果膠酶:纖維素酶=1:1.1，在上述工藝參數(shù)下原花青素的提取率為5.20%，相對(duì)于單一乙醇提取法提取率的3.84%，優(yōu)化后的工藝提取率有明顯的提高。采用DPPH法進(jìn)行抗氧化性的對(duì)比，結(jié)果顯示，雙酶法提取的蓮房原花青素比單一醇法提取的原花青素的清除DPPH自由基的能力強(qiáng)。

1.3 固膜材料輔助提取

固膜分離技術(shù)是指含有2個(gè)或2個(gè)以上組分的流體（真溶液、乳濁液、懸浮液等）在容器中通過一固體膜，憑借該膜的選擇性以及膜兩側(cè)的能量差（如靜壓差、濃度差、電位差等）將某種成分或一組分子大小相接近的成分與流體中其他組分（溶劑）分離，以達(dá)濃縮溶質(zhì)或凈化溶劑的技術(shù)。在中藥輔助提取和濃縮中的主要應(yīng)用有反滲透、超濾、納濾、微濾等。

陳瑩和萬端極[6]將麻黃草進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵水提取合并濾液，第一級(jí)膜為納濾膜，其作用是除雜，麻黃堿透過率高達(dá)98%，雜質(zhì)截留率達(dá)25%，納濾膜濾液過二級(jí)膜（反滲透膜）濃縮分離，麻黃堿被完全截留，濾液無顏色，電導(dǎo)接近生活用水，可循環(huán)利用于水提部分，膜設(shè)備操作簡單、易于清洗，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、連續(xù)化生產(chǎn)。

魏學(xué)軍[7]等利用無機(jī)陶瓷膜超濾技術(shù)對(duì)蓮花清瘟膠囊顆粒精制工藝進(jìn)行了研究，實(shí)驗(yàn)以蓮花清瘟水提液為研究對(duì)象，測定了0.2 nm、50 nm、30 nm的3種不同孔徑膜及提取溫度、操作壓差、超濾時(shí)間、膜面流速等不同操作參數(shù)下的膜通量及有效成分含量的變化。實(shí)驗(yàn)證明，陶瓷膜超濾精制蓮花清瘟水提液工藝是可行的，且雜質(zhì)去除比較徹底，料液處理簡單，產(chǎn)品質(zhì)量得到保證，膜清洗方便，可反復(fù)再生。

楊麗平[8]等采用兩級(jí)超濾和一級(jí)納濾對(duì)銀黃煎液進(jìn)行分離、濃縮，用HPLC法檢測黃芩苷和綠原酸含量，蒽酮試劑比色法檢測多糖含量，探討膜分離技術(shù)用于銀黃復(fù)方有效部位提取的可能性，發(fā)現(xiàn)糖含量為3.41 mg/mL，黃芩苷和綠原酸從原液的轉(zhuǎn)移率分別為77.4%、79.02%，表明膜分離方法用于銀黃水煎有效部位的分離，保留了包括多糖在內(nèi)的多種活性成分，方法簡單。

歐陽勇[9]用陶瓷微濾膜分離女貞子水煎液藥效部位，取膜分離所得過濾液作受試液，上清液作陽性對(duì)照，研究膜分離提取物對(duì)小鼠免疫作用的影響，發(fā)現(xiàn)女貞子膜分離所得的微濾液有提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫功能的作用，其提高免疫功能作用優(yōu)于陽性對(duì)照上清液組。

1.4 表面活性劑輔助提取

由于很多中藥提取的有效成分（如黃酮類物質(zhì)、生物堿及揮發(fā)油等）不溶于水或者不易溶于水，而表面活性劑可以通過在其表面或界面的吸附作用或在溶液中形成的分子聚合體而改變這些成分在水溶液中的溶解性，提高中藥的提取效率，降低提取成本，具有省時(shí)、高效、節(jié)能等優(yōu)點(diǎn)，因此表面活性劑在輔助中藥提取技術(shù)方面發(fā)揮著重要的作用。

董樹國[10]等采用表面活性劑輔助提取桑葉總黃酮，在單因素考察的基礎(chǔ)上，利用正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳提取工藝條件：Tween 80的濃度為1.5%、料液比1:40（g/mL）、提取時(shí)間120 min、提取溫度80 ℃、提取2次。在上述條件下，總黃酮平均提取率為1.742%，比用水為提取劑提取總黃酮的提取率高36.81%，降低了成本，提高了提取率，且方法簡單、高效。

從實(shí)際應(yīng)用的角度來講，由于表面活性劑輔助提取具有一定的局限性，單純的運(yùn)用表面活性劑促進(jìn)中藥提取的技術(shù)較少，更多的是采用表面活性劑與其他技術(shù)協(xié)同提取的方法，在后面將加以介紹。

2 常用能量添加劑在中藥提取方面的應(yīng)用

在中藥提取過程中，常用的能量添加劑主要有超聲波、微波、高壓脈沖電場等。

2.1 超聲波強(qiáng)化提取

超聲波萃取技術(shù)[11]利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)、高加速度，空化中產(chǎn)生的巨大壓力會(huì)造成生物體細(xì)胞壁破裂，且整個(gè)破裂過程在瞬間完成，從而增大分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，加速藥物有效成分進(jìn)入溶劑。同時(shí)，超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)作用加強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)物的釋放、擴(kuò)散及溶解，從而提高提取效率。

超聲波作為近年來發(fā)展的新技術(shù)，具有快速、價(jià)廉、高效等優(yōu)點(diǎn)，在提取中藥有效成分方面，可強(qiáng)化傳質(zhì)過程，縮短生產(chǎn)時(shí)間，減少能耗及廢物的產(chǎn)生，因此具有良好的應(yīng)用前景。目前，超聲波輔助萃取技術(shù)在強(qiáng)化中藥有效成分的提取方面也取得了一定的進(jìn)展。

翟旭鋒[12]等采用響應(yīng)曲面分析法對(duì)超聲波提取靈芝多糖的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化，優(yōu)化后的工藝為：超聲功率320 W、提取溫度70℃、提取時(shí)間34 min，其多糖得率為2.78%，氧自由基吸收能力（ORAC值）為1956μmol Trolox/g，與理論預(yù)測值無顯著性差異，制備的靈芝多糖分子量組成為18 150 Da（20.07%）和6 484 Da（79.93%），大大低于傳統(tǒng)水提靈芝多糖的分子量。

周志娥[13]等探索了超聲波提取黃花菜中多酚類物質(zhì)的最佳工藝條件：超聲功率120 W、料液比1:20、乙醇濃度90%、超聲時(shí)間40 min，得到黃花菜多酚類物質(zhì)提取得率為2.975%。

Kimbaris[14]等采用超聲提取法、水蒸餾提取法和微波法提取大蒜中的揮發(fā)油，研究發(fā)現(xiàn)超聲法相比其他2種方法，不僅降低了對(duì)熱敏性物質(zhì)的破壞，而且易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

2.2 微波輔助提取

微波輔助提取是微波和傳統(tǒng)的溶劑萃取法相結(jié)合后形成的一種新方法。它具有微波時(shí)間短、溶劑用量少、提取率高、產(chǎn)品質(zhì)量好、成本低、投資少、容積回收率高等優(yōu)點(diǎn)，尤其有利于熱敏性物質(zhì)的萃取。自其問世以來，逐漸受到科研人員的重視，它在中藥提取方面的獨(dú)特優(yōu)勢也日益顯著。

原增艷[15]等以響應(yīng)面分析法確定了微波輔助提取懷地黃多糖的最佳工藝：微波處理功率720 W、微波處理時(shí)間210 s、料水比1:6，懷地黃多糖提取率可達(dá)到61.9%，并且該工藝有很好的重現(xiàn)性。

孫曉海[16]等以去離子水為溶劑，提取墨旱蓮中的總黃酮，液固比（V/m）=25 mL/g、微波提取時(shí)間210 s、提取2次，此時(shí)墨旱蓮總黃酮得率為1.42%，而常規(guī)水提取的時(shí)間為60 min，得率1.24%，提取時(shí)間明顯縮短，且提取率增加。

Dahmoune[17]等利用微波輔助提取技術(shù)提取香桃木中的多酚物質(zhì)，得到最佳工藝：42%的乙醇溶液、液固比為32 mL/g、微波處理功率500 W、微波處理時(shí)間62 s，收率接近預(yù)期估計(jì)，且其抗氧化性比用超生波提取法和傳統(tǒng)的溶劑提取法更高。

Setyaningsih[18]等用微波輔助提取技術(shù)提取米粒中的多酚類物質(zhì)，得到最佳工藝：提取溫度185℃、微波處理功率1 000 W、提取時(shí)間20 min、甲醇濃度100%、溶劑物料比10:1，且采用微波輔助提取技術(shù)具有很高的精密度和很好的重復(fù)性。

2.3 高壓脈沖電場輔助提取

高壓脈沖電場（high-voltagepulsed electric field，HPEF）是一種新興的提取方法，其作用機(jī)理是利用細(xì)胞膜電穿孔原理在瞬間使細(xì)胞破壁，造成細(xì)胞膜電位混亂，細(xì)胞壁和細(xì)胞膜發(fā)生可逆或不可逆的破壞，細(xì)胞組分流出，其區(qū)別于傳統(tǒng)的破壁原理[19]。

白永智[20]等采用高壓脈沖電場法快速提取黃花烏頭中的關(guān)附甲素，得到最佳提取工藝條件：以90%乙醇為提取溶劑、電場強(qiáng)度20 kV/cm、脈沖數(shù)為10、料液比1:14，影響因素由大到小依次為電場強(qiáng)度、料液比、脈沖數(shù)。該法提取黃花烏頭中的關(guān)附甲素提取率達(dá)到0.391%、浸膏得率39.92%。與滲漉法、乙醇加熱回流法和超聲法相比較，高壓脈沖電場法提取時(shí)間短，無需加熱高溫，關(guān)附甲素提取率最高，浸膏得率也較高。

Guidan He[21]等采用高壓脈沖電場從魚骨中提取硫酸軟骨素，其工藝參數(shù)：料液比1:15、電場強(qiáng)度16.88 kV/cm、脈沖數(shù)為9、NaOH濃度為3.24%，最高產(chǎn)率可達(dá)6.92 g/L，且硫酸軟骨素的純度高、效率高、污染少。

趙景輝[22]等用高壓脈沖電場法快速提取鹿茸提取物，最佳提取工藝的影響因素由大到小依次為電場強(qiáng)度、料液比、脈沖數(shù)，若想得到大量提取物，其工藝參數(shù)：電場強(qiáng)度22 kV/cm、脈沖數(shù)為10、料液比1:12。如果以鹿茸蛋白質(zhì)為目標(biāo)物，則以電場強(qiáng)度22 kV/cm、脈沖數(shù)為8、料液比1:12的參數(shù)進(jìn)行提取。

3 物質(zhì)添加劑和能量添加劑的聯(lián)合提取技術(shù)

通過將物質(zhì)添加劑和能量添加劑聯(lián)合，可利用不同提取方法的優(yōu)點(diǎn)，從而提高有效成分的提取率，受到越來越多的科研人員的重視。這里就目前運(yùn)用較多的幾個(gè)聯(lián)合技術(shù)加以簡單介紹。

3.1 酶—超聲波聯(lián)合提取技術(shù)

超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)、高加速度，可明顯增大分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，加速藥物有效成分進(jìn)入溶劑，同時(shí)超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)作用加強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)物的釋放、擴(kuò)散及溶解。選用恰當(dāng)?shù)拿割惪梢云茐募?xì)胞壁的致密結(jié)構(gòu)，引起細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)間質(zhì)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生局部疏松、膨脹、崩潰等，有利于有效成分的溶出，因此比傳統(tǒng)方法和單純利用一種技術(shù)具有明顯的優(yōu)勢。

張慢[23]等采用酶—超聲波輔助同步對(duì)紫薯花青素的提取效果進(jìn)行研究。通過Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析確定酶—超聲波輔助提取最佳工藝條件：體積分?jǐn)?shù)0.1%的HCl-C2H5OH為溶劑（酸醇比為50:50）、纖維素酶提取溫度51℃、料液比1:20、酶添加量54U/mL、超聲功率100W、提取時(shí)間33min，此條件下花青素得率可達(dá)到3.581%±0.016%。與傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑浸提法相比，該提取方法縮短了提取時(shí)間，花青素得率提高了2.73倍；與微波法、超聲波法相比，其花青素得率分別提高了32.4%和17.8%。

Ningbo Liao[24]等采用超聲波輔助—酶提取法從河蜆中提取多糖，采用響應(yīng)面分析法優(yōu)化得到最佳工藝參數(shù)：木瓜蛋白酶用量150 PU/mg、提取時(shí)間32 min、超聲波功率300 W、提取溫度62℃、水料比35:1（mL/g）。將其與酶輔助提取法進(jìn)行比較，采用超聲波輔助—酶提取法提取32 min得到的多糖產(chǎn)量明顯高于酶輔助提取法，且此法得到的多糖與酶輔助提取得到的多糖相比，具有更低的分子量、更高的硫酸鹽含量、更高的超氧化物自由基清除活性。

3.2 超聲波—表面活性劑聯(lián)合提取技術(shù)

超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、機(jī)械振動(dòng)、高加速度，可明顯增大分子運(yùn)動(dòng)頻率和速度，增加溶劑穿透力，加速藥物有效成分進(jìn)入溶劑，超聲波產(chǎn)生的振動(dòng)作用加強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)物的釋放、擴(kuò)散及溶解。同時(shí)，表面活性劑對(duì)提取成分起增溶作用，可提高它的溶解能力，增加浸出效能和提取率。

劉樹興[25]等采用超聲波—表面活性劑協(xié)同提取盾葉薯蕷總皂苷，通過正交試驗(yàn)優(yōu)化，得到最佳工藝條件：乙醇體積分?jǐn)?shù)30%、超聲波頻率25.8 kHz、超聲時(shí)間40 min、黃姜:乙醇=1:10、十二烷基硫酸鈉（SDS）用量17.408×10-3mol/L。該工藝不但能顯著提高得率，且省時(shí)、節(jié)能、污染少。

翟文豐[26]等采用超聲—表面活性劑法提取黃柏中的生物堿成分，采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，得到最佳工藝參數(shù)：提取溫度60℃、乙醇濃度80%、活性劑Tween 60、料液比30:1、超聲30 min，提取率達(dá)到7.24%，高于文獻(xiàn)值6.37%。

3.3 酶—微波聯(lián)合提取技術(shù)

選用恰當(dāng)?shù)拿割惪梢云茐募?xì)胞壁的致密結(jié)構(gòu)，引起細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)間質(zhì)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生局部疏松、膨脹、崩潰等，有利于有效成分的溶出。此時(shí)，加上微波技術(shù)協(xié)同提取，細(xì)胞內(nèi)溶液吸收微波，在短時(shí)間內(nèi)能量快速上升，細(xì)胞內(nèi)部壓力提高，促使細(xì)胞膜快速破裂，有效成分的流出比僅采用酶輔助提取法和微波輔助提取法更加迅速，既可減少能耗，又可增加有效成分的溶出量。

Guowen Zhang[27]等采用微波輔助酶提取花生皮中的多酚類物質(zhì)，采用Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)和響應(yīng)面分析法優(yōu)化，得到最佳工藝條件：微波輻射時(shí)間2.6 min、纖維素酶添加量0.81 U/mL、pH5.5、在66℃下保溫2.0 h。

在此條件下多酚類物質(zhì)產(chǎn)量達(dá)1.75%±0.06%，比用回流提取法、超聲波輔助提取法、酶輔助提取法所得到的多酚產(chǎn)量都高。

Yu-Chun Yang[28]等采用微波輔助酶提取天竺葵中的鞣云實(shí)素和牛兒鞣素，通過響應(yīng)面分析法優(yōu)化得到最佳的工藝參數(shù)：微波功率500 W、液料比40:1（mL/g）、微波輻射溫度33 ℃、pH5.2、纖維素含量3 600 U/g、微波照射9 min，用該方法得到鞣云實(shí)素和牛兒鞣素含量分別為6.79%和19.82%，比傳統(tǒng)方法分別提高了64.01%和72.95%。

3.4 微波—表面活性劑聯(lián)合提取技術(shù)

表面活性劑具有特定的親水-親油雙親結(jié)構(gòu)，可降低細(xì)胞膜與水溶液間的界面張力，增大細(xì)胞內(nèi)外濃度差，提高細(xì)胞內(nèi)部系統(tǒng)含水量。

當(dāng)采用微波技術(shù)協(xié)同提取時(shí)，細(xì)胞內(nèi)溶液吸收微波后，在短時(shí)間內(nèi)能量快速上升，細(xì)胞內(nèi)部壓力提高，促使細(xì)胞膜快速破裂，被提取的成分比僅用微波提取更容易流出。同時(shí)，表面活性劑對(duì)提取成分起增溶作用，可提高它的溶解能力，提高浸出效能和提取率。

曲曉蘭[29]等采用微波—表面活性劑協(xié)同提取梔子黃色素，通過正交試驗(yàn)確定最佳協(xié)同提取條件：微波功率420 W、提取時(shí)間90 s、十二醇硫酸酯鈉溶液質(zhì)量濃度0.05%、提取料液比1:20（g/mL），并將其與單純采用微波法提取進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)采用該法提取梔子黃色素的提取率比僅用微波法提高10.2%。

3.5 多種方法聯(lián)合提取技術(shù)

由于單純使用一種方法存在局限性或者提取效率過低，采用兩種方法聯(lián)合提取仍然達(dá)不到預(yù)期的效果，這時(shí)候可以考慮使用多種方法進(jìn)行聯(lián)合提取?？紤]到成本增加等因素，且工業(yè)化難度較大，目前常采用酶—表面活性劑—超聲波（微波）聯(lián)合提取，并取得了一定的進(jìn)展。

陳惠丹[30]等將酶法與微波提取相結(jié)合，利用適當(dāng)?shù)拿钢苿ɡw維素酶）破壞細(xì)胞壁的致密結(jié)構(gòu)，利用表面活性劑吐溫60降低固-液相界面張力，增加大分子有機(jī)物質(zhì)溶解滲出能力，提取墨旱蓮中的總黃酮，在最優(yōu)條件下總黃酮得率達(dá)到1.38%，并將其與酶法—微波提取、微波提取、酶法提取、水煎煮法提取進(jìn)行比較，采用吐溫60強(qiáng)化酶法—微波節(jié)能高效。

董樹國[31]等采用酶解—超聲波—表面活性劑協(xié)同提取桑葉中的總黃酮，總黃酮得率為1.30%，比未用纖維素酶酶解時(shí)的得率（1.03%）明顯提高。

4 展望

分離劑（物質(zhì)、能量添加劑）的加入能促進(jìn)中藥的分離提取，且?guī)缀醪粨p害中藥有效成分的活性，不但提高了中藥的提取效率，而且降低了提取成本，省時(shí)、高效、節(jié)能。但是，由于分離劑自身的局限性，微小條件的變化就有可能造成嚴(yán)重的不良后果，因此對(duì)工藝的優(yōu)化成為科研工作者不懈努力的方向。

單一的分離劑有時(shí)很難達(dá)到預(yù)期的實(shí)驗(yàn)效果，將物質(zhì)添加劑（酶、表面活性劑等）和能量添加劑（超聲波、微波、高壓脈沖場等）聯(lián)合，取得了良好的進(jìn)展，但大部分聯(lián)合方法仍然只停留在小規(guī)模實(shí)驗(yàn)室上，怎樣實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化是目前科技工作者工作的重中之重。相信隨著科技的發(fā)展，這些問題都將得到完美的解決，中藥產(chǎn)業(yè)必將重新屹立于世界醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)之林。

［1］鄧修.中藥制藥工程與技術(shù)［M］.上海：華東理工大學(xué)出版社，2008.

［2］禹華娟，孫智達(dá)，謝筆鈞.酶輔助提取蓮房原花青素工藝及其抗氧化活性研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2010（1）.

［3］劉靜波，趙頌寧，林松毅，等.酶解法提取黑木耳中膠原蛋白的工藝優(yōu)化［J］.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2012（13）.

［4］ Wang S,Jiang L,Li Y,et al.Opt imizat ion on aqueous enzymatic ext ract ion conditions of pine seed pr ot ein by r esponse sur f ace met hod［J］.Procedia Engineering,2011，15（5）.

［5］汪志慧，孫智達(dá)，謝筆鈞.響應(yīng)曲面法優(yōu)化雙酶法提取蓮房原花青素［J］.食品科學(xué)，2011（4）.

［6］陳瑩，萬端極.麻黃堿膜提取的方法研究［J］.應(yīng)用化工，2008，37（8）.

［7］魏學(xué)君，陳占立，孫長榮，等.無機(jī)陶瓷膜超濾精制連花清瘟顆粒的工藝研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2010，21（1）.

［8］楊麗平，孔煥宇，朱嘉，等.膜分離法用于銀黃復(fù)方有效部位分離的研究［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2008，15（12）.

［9］歐陽勇.女貞子膜分離提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫功能影響研究［J］.數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2008，21（6）.

［10］董樹國，陸釗，曹宏梅.表面活性劑輔助提取桑葉總黃酮的工藝研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（32）.

［11］郭孝武.超聲提取分離［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2008.

［12］翟旭峰，胡明華，馮夢瑩，等.超聲提取靈芝多糖的工藝研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2012（12）.

［13］周志娥，杜華英，林麗萍，等.超聲波輔助提取黃花菜中多酚類物質(zhì)工藝的優(yōu)化［J］.食品工業(yè)科技，2014（18）.

［14］Kimbaris A C,Siatis NG,Daf erer a DJ,et al.Compar ison of dist il l at ion and ul t r asoundassist ed ext r act ion met hods f or t he isol at ion of sensit ive ar oma compounds f r om gar l ic（Al l ium sat ivum）［J］.Ul t r asonics Sonochemistry,2006，13（1）.

［15］原增艷，劉紅記，劉新育，等.響應(yīng)面分析法優(yōu)化懷地黃多糖的微波提取工藝［J］.中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2010（9）.

［16］孫曉海，鄭媛虹，胡雪，等.微波輔助提取墨旱蓮總黃酮的工藝優(yōu)化［J］.南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011（2）.

［17］Dahmoune F,Nayak B,Moussi K,et al.Optimization of micr owave-assisted extract ion of pol yphenol s f r om Myr t us communis L.l eaves［J］.Food Chemist r y,2015，166（1）.

［18］Set yaningsih W,Saput r o I E,Pal ma M,et al.Optimisation and val idation of the microwaveassisted extract ion of phenol ic compounds f rom rice grains［J］.Food Chemistry,2015，169（1）.

［19］魏殿文，莊澤帥，徐海軍.高壓脈沖電場法提取天然產(chǎn)物的研究進(jìn)展［J］.國土與自然資源研究，2009（3）.

［20］白永智，李昌禹，趙景輝，等.高壓脈沖電場法快速提取黃花烏頭中關(guān)附甲素的工藝研究［J］.中草藥，2013（10）.

［21］ He G,Yin Y,Yan X,et al.Opt imisat ion ext r act ion of chondr oit in sul f at e f r om f ish bone by high int ensit y pul sed el ect r ic f iel ds［J］.Food Chemist r y,2014，164（6）.

［22］趙景輝，王再幸，趙偉剛，等.高壓脈沖電場法快速提取鹿茸提取物工藝研究［J］.中國現(xiàn)代中藥，2011（2）.

［23］張慢，潘麗軍，姜紹通，等.響應(yīng)面法優(yōu)化酶-超聲波輔助同步提取紫薯花青素工藝［J］.食品科學(xué)，2014，35（10）.

［24］ Liao N,Zhong J,Ye X,et al.Ul t r asonicassist ed enzymat ic ext r act ion of pol ysacchar ide f r om Cor bicul a f l uminea:Char act er izat ion and ant ioxidant act ivit y［J］.LWT Food Science and Technol ogy,2015，60（2）.

［25］劉樹興，侯屹，李祥.超聲波—表面活性劑協(xié)同提取盾葉薯蕷總皂苷［J］.精細(xì)化工，2010（6）.

［26］翟文豐，童勝強(qiáng)，馬旭，等.超聲—表面活性劑法提取黃柏生物堿工藝研究［J］.云南中醫(yī)中藥雜志，2011（8）.

［27］Zhang G,Hu M,He L,et al.Optimizat ion of microwave-assist ed enzymatic extraction of pol yphenol s f r om wast e peanut shel l s and eval uat ion of it s ant ioxidant and antibacter ial activities in vitro［J］.Food and Bioproducts Processing,2013，91（2）.

［28］Yang Y-C,Li J,Zu Y-G,et al.Opt imisat ion of micr owave-assist ed enzymat ic ext r act ion of cor il agin and ger aniin f rom Ger anium sibiricum Linne and eval uat ion of ant ioxidant act ivit y［J］.Food Chemist r y,2010，122（1）.

［29］曲曉蘭，劉希欣，高紅莉，等.微波—表面活性劑協(xié)同提取梔子黃色素的工藝［J］.食品研究與開發(fā)，2010，31（8）.

［30］陳惠丹，金凌潔，劉然，等.吐溫60強(qiáng)化酶法—微波提取墨旱蓮總黃酮［J］.南京工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011（4）.

［31］董樹國，陸釗.酶解—超聲波—表面活性劑協(xié)同提取桑葉總黃酮工藝研究［J］.中國釀造，2013，32（8）.