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    肥豬散發(fā)酵制劑的藥效學(xué)研究

    2015-03-11 02:36:22郭芳茹張遂平苑青艷楊慧敏吳勝耀
    中國(guó)獸藥雜志 2015年11期
    關(guān)鍵詞:肥豬家兔胃酸

    郭芳茹,張遂平,苑青艷,楊慧敏,吳勝耀

    (1.河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥業(yè)有限公司,鄭州 450008;2.河南省鄭州種畜場(chǎng),鄭州 450008)

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    肥豬散發(fā)酵制劑的藥效學(xué)研究

    郭芳茹1,張遂平1,苑青艷1,楊慧敏1,吳勝耀2

    (1.河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥業(yè)有限公司,鄭州 450008;2.河南省鄭州種畜場(chǎng),鄭州 450008)

    利用人工制造消化不良病理模型考察肥豬散發(fā)酵制劑對(duì)消化不良家兔的體重、進(jìn)食、胃酸和胃蛋白酶的影響以及小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)考察肥豬散發(fā)酵制劑對(duì)正常小鼠的小腸推進(jìn)速度的影響。結(jié)果顯示:肥豬散發(fā)酵制劑增加消化不良家兔模型的體重、進(jìn)食量,調(diào)整胃酸量和胃蛋白酶的活性,加快小鼠的小腸推進(jìn)速度,中劑量組的藥效可達(dá)到普通散劑的2倍。肥豬散發(fā)酵制劑促進(jìn)了肥豬散消食開(kāi)胃的作用,本實(shí)驗(yàn)為肥豬散發(fā)酵制劑的藥效學(xué)研究提供了參考。

    肥豬散發(fā)酵制劑;藥效學(xué);胃蛋白酶;小腸推進(jìn)試驗(yàn)

    肥豬散是由黃豆、麥芽、綿馬貫眾和何首烏四味中藥組成的復(fù)方散劑,具有開(kāi)胃、驅(qū)蟲(chóng)、補(bǔ)養(yǎng)和催肥的作用,主治畜禽食少、瘦弱、生長(zhǎng)遲緩[1]。肥豬散發(fā)酵制劑是利用納豆芽孢桿菌作為發(fā)酵菌種,采用適當(dāng)?shù)墓に噷?duì)肥豬散進(jìn)行發(fā)酵炮制而制得的一種集中草藥、酶制劑和益生素于一體的新產(chǎn)品。本文通過(guò)人工制造消化不良病理模型和小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)考察對(duì)肥豬散及肥豬散發(fā)酵制劑的促消化和助生長(zhǎng)效果進(jìn)行了藥效學(xué)研究。

    1 儀器和材料

    1.1 儀器 800型離心沉淀器,鄭州第三醫(yī)療器械廠;CX-400A型高速多功能粉碎機(jī),上海市晟喜制藥機(jī)械有限公司;DZKW-4型電子恒溫水浴鍋,黃華市渤海電器廠;AL204電子天平,梅特勒-托利多儀器上海有限公司;TU-1810PC紫外分光光度計(jì),北京普析通用儀器責(zé)任有限公司。

    1.2 試藥 發(fā)酵肥豬散,河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號(hào)201305201;肥豬散,河南亞衛(wèi)動(dòng)物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品,批號(hào)2013011;胃蛋白酶測(cè)定試劑盒,浙江愛(ài)康生物科技有限公司;氫氧化鈉,天津市博迪化工有限公司;乙醚,天津市富宇精細(xì)化工有限公司;酚酞,天津市博迪化工有限公司;活性炭,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 日本大白兔30只,體重(1.8±0.2)kg,昆明種小鼠50只,體重(20±2)g,雌雄各半,潔凈級(jí)別為CL級(jí),由上海奧陸生物科技有限公司提供;兔糧及小鼠標(biāo)準(zhǔn)日糧,按照美國(guó)NTP2000標(biāo)準(zhǔn)自制。

    1.4 特殊飼料 消化不良模型造模期間采用高糖高脂飲食[2]:4%膽固醇,1%膽酸鹽、10%蔗糖、10%豬油、75%基礎(chǔ)飼料(玉米面、胡蘿卜、白菜、豆渣、土豆等)。

    2 方法

    2.1 對(duì)消化不良家兔的藥效試驗(yàn) 取大白兔30只,隨機(jī)分為6組,其中5組采用特殊飼料和方法喂養(yǎng)造模[2],1組采用常規(guī)飼料喂養(yǎng)作為空白對(duì)照,飼喂3周。造模成功的標(biāo)準(zhǔn)為攝食飲水減少、毛發(fā)不順、出現(xiàn)便秘或腹瀉。第3周造模成功后,除模型組外其余4組開(kāi)始按表1所示的劑量口服給藥,各藥物的劑量按照文獻(xiàn)提供的方法換算得到[3]。稱取藥物加水10 mL配制成混懸液灌胃給藥,每天1次,連用2周,試驗(yàn)期間,每3 d稱重1次,并記錄每日的進(jìn)食量。在試驗(yàn)結(jié)束前1 d,各組動(dòng)物禁食24 h,結(jié)束時(shí),用乙醚麻醉動(dòng)物,剖腹結(jié)扎幽門(mén)和十二指腸結(jié)合處,由十二指腸給藥或生理鹽水,創(chuàng)口縫合后靜養(yǎng)5 h,禁食禁水,隨后麻醉處死動(dòng)物,取出胃,收集胃液,3500 r/min離心15 min,吸取上清液測(cè)量胃液量,采用胃蛋白酶測(cè)定試劑盒測(cè)定胃蛋白酶活性,以酸堿中和法測(cè)定胃酸的量[4]。

    2.2 小腸推進(jìn)試驗(yàn) 取體重20 g左右的小鼠50只,隨機(jī)分為空白組,發(fā)酵肥豬散高、中、低劑量組,肥豬散組,各藥物的劑量按照文獻(xiàn)提供的方法換算得到,按表4所示劑量稱取藥物加水0.5 mL配制成混懸液,每天灌胃給藥1次,空白組給予等劑量的蒸餾水,給藥3 d后,禁食12 h,于最后一次給藥1 h后按10 mL/kg體重給各組動(dòng)物灌胃10%活性炭混懸液,25 min后將動(dòng)物處死,取出胃腸道放在玻璃平板上,測(cè)定幽門(mén)至回盲部全長(zhǎng)及幽門(mén)到炭末前沿的距離[5],計(jì)算炭末推進(jìn)百分率,公式為:炭末推進(jìn)百分率(%)=(炭末混懸液移動(dòng)的距離/小腸的總長(zhǎng)度)×100%。

    3 結(jié)果與分析

    3.1 對(duì)消化不良家兔的藥效試驗(yàn)結(jié)果 以SPSS2.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn),比較各給藥組與模型組之間是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,結(jié)果見(jiàn)表1~表3。

    表1 發(fā)酵肥豬散對(duì)消化不良家兔模型體重增長(zhǎng)的影響(n=5)

    與空白組相比,“△”表示P<0.05,“△△”表示P<0.01,與模型組相比,“*”表示P<0.05,“**”表示P<0.01

    表2 發(fā)酵肥豬散對(duì)消化不良家兔進(jìn)食量的影響(n=5)

    與空白組相比,“△”表示P<0.05,“△△”表示P<0.01,與模型組相比,“*”表示P<0.05,“**”表示P<0.01

    表3 發(fā)酵肥豬散對(duì)消化不良家兔胃酸、胃蛋白酶分泌的影響(n=5)

    與空白組相比,“△”表示P<0.05,“△△”表示P<0.01,與模型組相比,“*”表示P<0.05,“**”表示P<0.01

    由表1和表2中的進(jìn)食量數(shù)據(jù)可以看出,模型組和給藥組動(dòng)物在造模后第3周的進(jìn)食量和體重均低于空白對(duì)照組,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),提示造模成功,從第7天開(kāi)始各給藥組家兔的進(jìn)食量和體重明顯增加,其中發(fā)酵肥豬散低劑量組在給藥后第7天到第13天體重和進(jìn)食量增加較為緩慢,與模型組相比沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其余各給藥組家兔的體重和進(jìn)食量明顯增加,與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01)。表3中胃酸和胃蛋白酶的測(cè)定結(jié)果表明,模型組胃酸含量明顯高于空白組,胃蛋白酶含量明顯低于空白組,數(shù)據(jù)比較具有統(tǒng)計(jì)數(shù)意義(P<0.01)。發(fā)酵肥豬散高劑量和中劑量給藥組以及肥豬散給藥組均可使消化不良家兔模型的胃酸含量降低,胃蛋白酶含量增加,與模型組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,P<0.05),與空白組相比差異不顯著(P>0.05)。發(fā)酵肥豬散低劑量組也可使胃酸量降低,胃蛋白酶含量增高,但與模型組相比差異不顯著(P>0.05)。

    3.2 小腸推進(jìn)試驗(yàn)結(jié)果 對(duì)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)比較各組數(shù)據(jù)的差異,結(jié)果見(jiàn)表4。

    表4 小腸推進(jìn)試驗(yàn)結(jié)果(n=10)

    與空白組相比,“△”表示P<0.05,“△△”表示P<0.01

    小腸推進(jìn)試驗(yàn)結(jié)果表明,發(fā)酵肥豬散低、中、高劑量組均可促進(jìn)小鼠小腸碳末推進(jìn)距離,中、高劑量組推進(jìn)百分率大,與空白組相比差異顯著(P<0.05,P<0.01),因此發(fā)酵肥豬散具有促進(jìn)小腸蠕動(dòng)的功能。發(fā)酵肥豬散中劑量組與普通散劑組藥效相近,但用藥量?jī)H為后者的1/2,說(shuō)明發(fā)酵過(guò)程使肥豬散的藥效加倍。

    4 討論與小結(jié)

    肥豬散中的大豆主要活性成分為大豆異黃酮,其生物活性豐富,結(jié)合型的異黃酮在腸道內(nèi)不能直接吸收,不具備生物活性,經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理后,游離苷元型大豆異黃酮的含量迅速增加[6],發(fā)酵黃豆的藥用價(jià)值得到大幅度提高,使其能夠更好的提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能和免疫功能以及增強(qiáng)動(dòng)物的抗氧化功能[7]。麥芽含有多種酶類和B族維生素,具有行氣消食、健脾開(kāi)胃的功效,發(fā)酵過(guò)程可破壞根須有毒生物堿,使麥芽的藥效得到充分發(fā)揮[8]。何首烏經(jīng)過(guò)微生物發(fā)酵處理后,蒽醌類化合物的含量大幅度降低,同時(shí)又能夠最大程度地保留了其中的有效成分二苯乙烯苷,提高了何首烏的藥用價(jià)值[9]。

    本試驗(yàn)通過(guò)人造家兔消化不良的病理模型和小腸推進(jìn)試驗(yàn)考察發(fā)酵肥豬散對(duì)體重、進(jìn)食,胃酸和胃蛋白酶以及小腸推進(jìn)速度的影響,結(jié)果顯示,肥豬散組和肥豬散發(fā)酵制劑中、高劑量組均能夠增加消化不良家兔的體重、進(jìn)食量,調(diào)整胃酸量和胃蛋白酶的活性、促進(jìn)腸蠕動(dòng),肥豬散組和肥豬散發(fā)酵制劑中劑量組藥效相近,證明發(fā)酵過(guò)程增強(qiáng)了肥豬散的藥效。這與安勝英[10]等和劉春輝[11]對(duì)中藥發(fā)酵組的效果優(yōu)于中藥組研究的結(jié)果是一致的。

    [1] 中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典(2010)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2011.

    [2] 涂征艷,張桂霞,李玉梅.關(guān)于制作家兔消化不良模型方法的探討[J].中外健康文摘,2008,5(4):51-52.

    [3] 黃繼漢,黃曉暉,陳志揚(yáng),等.藥理試驗(yàn)中動(dòng)物間和動(dòng)物與人體間的等效劑量換算[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2004,9(9):1069-1072.

    [4] 汪受傳,張?jiān)缕?,陶勇,?特制私聊喂養(yǎng)幼齡大鼠建立小兒厭食癥模型[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),1999,15(3):148-150.

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    [6] 索化夷,騫宇,盧露,等.永川豆豉傳統(tǒng)發(fā)酵過(guò)程中的大豆異黃酮變化[J].食品科學(xué), 2012,33(8):270-273.

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    [9] 石聰,張?zhí)m春,趙榮華,等.發(fā)酵何首烏的化學(xué)成分研究與鑒定[J].昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2011,10:45-47.

    [10]安勝英,馬學(xué)會(huì),劉觀忠.發(fā)酵中藥添加劑對(duì)肉仔雞免疫機(jī)能和抗氧化機(jī)能的影響[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào),2015,(5):863-867.

    [11]劉春輝.固態(tài)發(fā)酵復(fù)方中藥防治奶牛乳房炎的效果及對(duì)生產(chǎn)性能的影響[J].中國(guó)奶業(yè),2013,(11):27-30.

    (編輯:侯向輝)

    Study on Pharmacodynamics of Feizhusan Fermentation Preparation

    GUO Fang-ru1,ZHANG Sui-ping1,YUAN Qing-yan1,YANG Hui-min1,WU Sheng-yao2

    (1.HenanYaweiVeterinaryPharmaceutcalCo.,Ltd,Zhengzhou450008,China; 2.ZhengzhouLivestockFarmofHenanProvince,Zhengzhou450008,China)

    To evaluate the pharmacodynamic effects of feizhusan fermentation preparation on appetite and digestion,the effection on body weight, feeding, gastric acid and pepsase of rabbits was inspected by inducing pathological model of dyspepsia on healthy animals and the effection on intestinal peristalsis of mice was observed by intestinal movement experiment.Results indicated that feizhusan fermentation preparation could increase the body weight and food intake of dyspepsia rabbits, regulate the gastric acid and the pepsase, promote the movement of small intestine.The fermentation process doubled the pharmacodynamic effects of ordinary powder.feizhusan fermentation preparation has more effect on stimulating appetite and digestion to feizhusan.

    feizhusan fermentation preparation;pharmacodynamics;pepsase;intestinal movement experiment

    郭芳茹,碩士,從事獸藥新產(chǎn)品和新劑型研發(fā)。E-mail : 460294979@qq.com

    2015-09-16

    A

    1002-1280 (2015) 11-0030-04

    S859.79

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