魚(yú)腥草薄層鑒別方法研究及對(duì)照?qǐng)D譜的建立

王淑靜 呂響 倪玲玲 李凈

魚(yú)腥草薄層鑒別方法研究及對(duì)照?qǐng)D譜的建立

王淑靜 呂響 倪玲玲 李凈

為了建立魚(yú)腥草鑒別方法和對(duì)照?qǐng)D譜, 采用薄層色法對(duì)魚(yú)腥草的不同組分進(jìn)行鑒別, 并對(duì)影響色譜分離效果的主要因素(吸附劑、展開(kāi)劑等)進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)薄層鑒別方法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好,結(jié)果可靠, 可用于魚(yú)腥草的定性鑒別。

魚(yú)腥草；薄層鑒別；對(duì)照?qǐng)D譜

魚(yú)腥草別名側(cè)耳根、豬鼻孔等, 魚(yú)腥草入藥具有清熱、消炎、解毒、消癰排膿、利尿通淋的作用, 提高機(jī)體免疫力[1-3],在我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中具有較為廣泛的應(yīng)用?！吨袊?guó)藥典》2010版藥典一部該品種項(xiàng)下魚(yú)腥草鑒別有顯微鑒別、甲基正壬酮鑒別。為進(jìn)一步加強(qiáng)中藥材進(jìn)廠檢驗(yàn)的質(zhì)量控制, 本文對(duì)魚(yú)腥草的鑒別項(xiàng)進(jìn)行了研究, 增加魚(yú)腥草對(duì)照藥材的鑒別實(shí)驗(yàn),提高了該品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 儀器與試劑

CAMAG TLCVISUALIZER(瑞士卡瑪薄層成像系統(tǒng)), 超聲波清洗器KQ-500E(昆山市超聲儀器有限公司)。魚(yú)腥草對(duì)照藥材(批號(hào)121046-201105, 中國(guó)食品藥品檢定研究院), 魚(yú)腥草[4](為本公司進(jìn)廠原藥材, 經(jīng)鑒別均為產(chǎn)地為湖北、四川、安徽等地)自制硅膠G板(薄層層析硅膠：青島海洋化工有限公司), 預(yù)制硅膠G板(青島海洋化工廠有限公司), 默克板鋁板(DC-Fertigfolien ALUGRAM?Xtra SIL G( Precoated TLC-sheets ALUGRAM?Xtra SIL G/Plaques finies CCM ALUGRAM?Xtra SIL G, Made in Germany, LOT: 006153)；試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 魚(yú)腥草的薄層鑒別 取干魚(yú)腥草粉末1.0 g, 加乙醇10 ml,超聲處理[7]10 min, 靜置, 取上清液作為供試品溶液；取魚(yú)腥草對(duì)照藥材0.5 g, 加甲醇5 ml, 超聲處理20 min, 濾過(guò), 濾液作為對(duì)照藥材溶液。

2.2 薄層色譜法試驗(yàn) 參照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗(yàn)[5], 分別取上述兩種溶液各5～10 μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上, 以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(4∶1∶0.1)為展開(kāi)劑, 上行展開(kāi)18 cm左右, 取出, 晾干, 在紫外光(365 nm)下檢視, 供試品色譜中, 在與魚(yú)腥草對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 至少顯三個(gè)相同顏色的熒光主斑點(diǎn)。

3 討論

3.1 展開(kāi)劑的選擇 文獻(xiàn)報(bào)道所用的展開(kāi)系統(tǒng)有甲苯系統(tǒng)、三氯甲烷系統(tǒng)、氨水系統(tǒng)等, 通過(guò)對(duì)比試驗(yàn), 結(jié)果以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(4：1：0.1)為展開(kāi)劑, 展開(kāi)后, 在紫外光(365 nm)下檢視, 分離效果較好。

3.2 薄層板的選擇 分別用手鋪板、預(yù)制板、默克板三種薄層板進(jìn)行魚(yú)腥草對(duì)照藥材的鑒別實(shí)驗(yàn), 上行展開(kāi)10 cm, 默克板展開(kāi)的效果最好, 主斑點(diǎn)的Rf 值最大。

3.3 展距的影響 選用默克板(10 cm×20 cm), 在相同的色譜條件下, 考察不同展距對(duì)薄層分離效果的影響。實(shí)驗(yàn)表明,展距在16～18 cm, 色譜主斑點(diǎn)Rf增大, 在原點(diǎn)附近的主斑點(diǎn)也被很好的分離, 分離效果更好, 且專(zhuān)屬性強(qiáng)。在與魚(yú)腥草對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上, 至少顯三個(gè)相同顏色的藍(lán)色熒光主斑點(diǎn)。見(jiàn)圖1。

圖1 魚(yú)腥草薄層色譜圖

3.4 通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)條件的選擇, 采用默克板, 上行展開(kāi)16～18 cm結(jié)果的重復(fù)性較好, 此方法為提高魚(yú)腥草藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù), 并作為本公司藥材進(jìn)廠驗(yàn)收的內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn), 加強(qiáng)了該品種進(jìn)廠檢驗(yàn)的質(zhì)量控制, 保證了提取物和制劑(連花清瘟系列藥物等)的產(chǎn)品質(zhì)量[6-9]。

[1]和殿峰. 魚(yú)腥草的藥理研究進(jìn)展與臨床應(yīng)用.中國(guó)誤診學(xué)雜志, 2008, 8(22):5520-5522.

[2]胡汝曉, 肖冰梅, 譚周進(jìn), 等. 魚(yú)腥草的化學(xué)成分及其藥理作用. 中國(guó)藥業(yè), 2008, 17(8):23-24.

[3]姚森, 周玖瑤. 魚(yú)腥草的藥理與臨床應(yīng)用. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2008, 19(1):237-239.

[4]張順辰. 魚(yú)腥草與其混淆品的鑒別. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2007, 18(1): 168.

[5]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典. 北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2010:34-35.

[6]孫艷杰, 王皓, 肖楠. 魚(yú)腥草鑒別方法的改進(jìn). 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥, 2009, 4(3):229-230.

[7]黃鎖義, 萬(wàn)承俊, 鄒永芳, 等. 超聲波提取魚(yú)腥草總黃酮及鑒別.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2006, 17(11):2261-2262.

[8]羅璇, 李小芩, 楊岳, 等. 復(fù)方魚(yú)腹草軟膠囊的鑒別和含量測(cè)定方法研究. 中國(guó)中藥雜志, 2004, 29(7):702-704.

[9]車(chē)曉彥, 賀亞玲, 尹靖先, 等. 復(fù)方魚(yú)腥草片的鑒別和含量測(cè)定.華西藥學(xué)雜志, 2005, 20(1):66-67.

Research of thin-layer chromatography method for houttuynia cordata and establishment of control TLC fingerprint

WANG Shu-jing, LYU Xiang, NI Ling-ling, et al. Shijiazhuang Yiling pharmaceutical co., LTD, Shijiazhuang 050035, China

In order to establish identification method and control TLC fingerprint for houttuynia cordata, thin-layer chromatography was applied for identification in different classification of houttuyniacordata. Optimization was made on main influencing factors (adsorbing material, developing solvent, etc) of chromatographic separation effect. The results showed that thin-layer chromatography contained convenience and good repeatability. This method also provided creditable results, and it could be applied in qualitative identification for houttuynia cordata.

Houttuynia cordata; Thin-layer chromatography; Control TLC fingerprint

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.20.222

2015-05-18]

050035 石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司