乳腺癌組織中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表達(dá)情況及與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系

原慶會(huì)，何　偉，王安群，楊永紅

(綿陽(yáng)市中心醫(yī)院病理科，四川 綿陽(yáng) 621000)

乳腺癌組織中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表達(dá)情況及與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系

原慶會(huì)，何偉※，王安群，楊永紅

(綿陽(yáng)市中心醫(yī)院病理科，四川 綿陽(yáng) 621000)

摘要：目的研究乳腺癌組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER-2)、乳腺癌易感基因1(BRCA-1)的表達(dá)情況及與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系。方法將2004年1月至2008年9月在綿陽(yáng)市中心醫(yī)院普外科接受乳腺癌根治術(shù)的350例患者納入研究，通過(guò)免疫組織化學(xué)法檢測(cè)乳腺癌組織中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表達(dá)情況，隨訪患者的復(fù)發(fā)情況和存活情況。結(jié)果 ①ER、PR、HER-1、BRCA-1的陽(yáng)性率分別為58.0%、54.6%、45.1%、53.7%；②ER、PR、BRCA-1陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間、3年存活率、5年存活率均高于陰性患者(P<0.01)；HER-2陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間、3年存活率、5年存活率均低于陰性患者P<0.01；③ER、PR、BRCA-1高表達(dá)是遠(yuǎn)期生存情況的危險(xiǎn)因素，HER-2高表達(dá)是遠(yuǎn)期生存情況的保護(hù)因素。結(jié)論ER、PR、HER-2和BRCA-1的表達(dá)情況可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后情況的可靠指標(biāo)，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可對(duì)患者的病情進(jìn)行全面判斷，并針對(duì)性的制訂綜合治療方案。

關(guān)鍵詞：乳腺癌；雌激素受體；孕激素受體；人表皮生長(zhǎng)因子受體；乳腺癌易患基因

乳腺癌是女性發(fā)病率極高的惡性腫瘤，原癌基因激活、抑癌基因失活、雌孕激素過(guò)度刺激等因素均參與疾病的發(fā)生過(guò)程。雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)的表達(dá)與雌孕激素的作用密切相關(guān)，人表皮生長(zhǎng)因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是一類原癌基因，乳腺癌易患基因1(breast cancer type 1 susceptibility gene，BRCA-1)是一類抑癌基因，在乳腺癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)中發(fā)揮重要作用。本研究聯(lián)合檢測(cè)了乳腺癌組織中ER、PR、HER-2、BRCA-1的表達(dá)情況，并分析了其與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系。

1資料與方法

1.1一般資料收集2004年1月至2008年9月在綿陽(yáng)市中心醫(yī)院普外科接受乳腺癌根治術(shù)的350例患者納入研究，納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確的乳腺癌診斷；②接受乳腺癌根治術(shù)；③術(shù)前未接受放化療；④取得患者知情同意?；颊吣挲g38～65歲，平均(48±7)歲；TNM分期：Ⅱ期174例、Ⅲ期142例、Ⅳ期34例。

1.2試驗(yàn)材料免疫組織化學(xué)試劑盒和常規(guī)試劑購(gòu)買于碧云天公司，抗體購(gòu)買于santa cruz公司。

1.3免疫組織化學(xué)法乳腺癌組織固定于4%多聚甲醛，常規(guī)石蠟包埋后以蠟塊形式保存。檢測(cè)時(shí)，連續(xù)切片后制作石蠟切片，微波加熱進(jìn)行抗原修復(fù)，逐步脫蠟至水，滴加1∶300的ER、PR、HER-2、BRCA-1第一抗體，4 ℃濕盒孵育過(guò)夜，而后滴加Envision第二抗體，37 ℃濕盒孵育30 min。最后顯色、沖洗、復(fù)染、封片，鏡下觀察。

1.4免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷陽(yáng)性染色細(xì)胞呈棕褐色或棕黃色，ER、PR陽(yáng)性染色位于細(xì)胞核，HER-2陽(yáng)性染色位于細(xì)胞膜，BRCA-1陽(yáng)性染色位于細(xì)胞質(zhì)。參照Omranipour等[1]的研究對(duì)免疫組織化學(xué)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為“-”,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)<25%為“+”,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)25%～50%為“++”,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)>50%為“+++”。“-”“+”判斷為基因表達(dá)陰性，“++”“+++”判斷為基因表達(dá)陽(yáng)性。

1.5隨訪方法隨訪開(kāi)始時(shí)間為乳腺癌根治術(shù)出院當(dāng)日，隨訪截止時(shí)間為2013年5月。隨訪形式：門診隨訪、電話隨訪、家庭訪視。隨訪內(nèi)容包括腫瘤復(fù)發(fā)情況、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況和存活情況。無(wú)瘤生存時(shí)間按首次發(fā)現(xiàn)原發(fā)病灶出現(xiàn)病理性質(zhì)完全相同的腫瘤計(jì)算。

2結(jié)果

2.1乳腺癌組織中ER、PR、HER-2及BRCA-1的表達(dá)情況350例乳腺癌組織樣本中，ER陽(yáng)性203例、陽(yáng)性率為58.0%；PR陽(yáng)性191例、陽(yáng)性率54.6%；HER-2陽(yáng)性158例、陽(yáng)性率45.1%；BRCA-1陽(yáng)性188例、陽(yáng)性率53.7%。

2.2遠(yuǎn)期預(yù)后情況的單因素分析ER、PR、BRCA-1陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間、3年存活率、5年存活率均高于陰性患者(P<0.01)；HER-2陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間、3年存活率、5年存活率均低于陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

2.33年生存率的多因素Logistic回歸分析對(duì)3年生存情況進(jìn)行Logistic回歸分析，采用向后篩選法，ER、PR、HER-2、BRCA-1均納入方程，ER、PR和BRCA-1是3年生存情況的危險(xiǎn)因素(OR=1.875，2.421，3.293)，HER-2是3年生存情況的保護(hù)因素(OR=0.342)。見(jiàn)表2。

表1　乳腺癌根治術(shù)患者遠(yuǎn)期預(yù)后情況的單因素分析結(jié)果

ER：雌激素受體；PR：?jiǎn)渭に厥荏w；HER-2：人表皮生長(zhǎng)因子受體2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

表2　乳腺癌根治術(shù)患者3年生存率的多因素Logistic回歸分析

ER：雌激素受體；PR：?jiǎn)渭に厥荏w；HER-2：人表皮生長(zhǎng)因子受體2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

2.45年生存率的多因素Logistic回歸分析對(duì)5年生存情況進(jìn)行Logistic回歸分析，采用向后篩選法，ER、PR、HER-2、BRCA-1均納入方程，ER、PR和BRCA-1是5年生存情況的危險(xiǎn)因素(OR=1.875,2.421,3.293)，HER-2是5年生存情況的保護(hù)因素(OR=0.342)。見(jiàn)表3。

表3　乳腺癌根治術(shù)患者5年生存率的多因素Logistic回歸分析

ER：雌激素受體；PR：?jiǎn)渭に厥荏w；HER-2：人表皮生長(zhǎng)因子受體2；BRCA-1:乳腺癌易患基因1

3討論

乳腺癌是女性最為常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)生的分子機(jī)制復(fù)雜，包括雌孕激素、原癌基因、抑癌基因、細(xì)胞周期蛋白等都參與其中。乳腺癌的發(fā)生與ER、PR的過(guò)度激活密切相關(guān)，

雌孕激素的持續(xù)所用可刺激乳腺導(dǎo)管，增加癌變風(fēng)險(xiǎn)[2]。相關(guān)的病理學(xué)研究顯示，乳腺癌患者的ER、PR的陽(yáng)性率分別為60%～70%和50%～65%[3]。目前，ER和PR可以作為預(yù)測(cè)乳腺癌患者預(yù)后的重要因素，并且ER和PR可作為生物靶向治療和綜合化療的靶點(diǎn)[4]。Itoh等[5]的研究認(rèn)為，ER陽(yáng)性和PR陽(yáng)性乳腺癌患者的遠(yuǎn)期存活情況遠(yuǎn)優(yōu)于陰性患者。本研究通過(guò)單因素分析也發(fā)現(xiàn)了一致的結(jié)果，ER、PR陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間和遠(yuǎn)期存活率均高于陰性患者，遠(yuǎn)期預(yù)后情況更好。

HER-2是一類原癌基因，其基因序列與HER十分相似[6]。HER-2的表達(dá)產(chǎn)物是一種具有膜外位點(diǎn)的跨膜癌基因蛋白，其過(guò)表達(dá)一般僅存在于腫瘤細(xì)胞[7]。Slamon等[8]在1987年的研究首次發(fā)現(xiàn)，HER-2過(guò)度表達(dá)的乳腺癌患者的平均生存時(shí)間僅為3年，遠(yuǎn)低于HER-2陰性的乳腺癌患者。隨后，國(guó)內(nèi)很多學(xué)者的研究均發(fā)現(xiàn)了乳腺癌組織中HER-2的表達(dá)與患者遠(yuǎn)期預(yù)后的密切關(guān)系[9-11]。本研究單因素分析結(jié)果提示，HER-2陰性患者的預(yù)后更為理想，其無(wú)瘤生存時(shí)間和遠(yuǎn)期存活率均高于陽(yáng)性患者。

BRCA-1是一類抑癌基因，具有正常生理功能的BRCA-1蛋白參與DNA損傷的修復(fù)，BRCA-1在正常乳腺細(xì)胞核內(nèi)起重要的調(diào)控作用，參與細(xì)胞周期的調(diào)控，抑制細(xì)胞分裂，促進(jìn)終末分化，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，為一個(gè)重要的細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控子[12]。BRCA-1突變則導(dǎo)致BRCA-1編碼的蛋白質(zhì)從細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)中，從而喪失與DNA結(jié)合的功能，導(dǎo)致上述細(xì)胞凋亡功能喪失，從而最終導(dǎo)致細(xì)胞惡變[13]。Huszno等[14]通過(guò)回顧性研究發(fā)現(xiàn)，BRCA-1是決定乳腺癌患者遠(yuǎn)期預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，BRCA-1低表達(dá)可導(dǎo)致乳腺癌細(xì)胞過(guò)度增殖，增加乳腺癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)和死亡的風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果也顯示，BRCA-1陽(yáng)性患者的無(wú)瘤生存時(shí)間和遠(yuǎn)期存活率均高于陰性患者。

在以上單因素分析的基礎(chǔ)上，本研究還通過(guò)Logistic回歸的方法對(duì)ER、PR、HER-2、BRCA-1表達(dá)情況在乳腺癌患者遠(yuǎn)期預(yù)后中的影響作用進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示，ER、PR和BRCA-1高表達(dá)是遠(yuǎn)期生存情況的危險(xiǎn)因素，HER-2高表達(dá)是遠(yuǎn)期生存情況的保護(hù)因素。

綜上所述，ER、PR、HER-2和BRCA-1的表達(dá)情況可作為判斷乳腺癌患者預(yù)后情況的可靠指標(biāo)，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可對(duì)患者的病情進(jìn)行全面判斷，并針對(duì)性地制訂綜合治療方案。

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Expression of ER,PR,HER-2,BRCA-1 in Breast Cancer Tissues and Its Relation with Long-term Prognosis

YUANQing-hui，HEWei，WANGAn-qun，YANGYong-hong.

(DepartmentofPathology,MianyangCentralHospital,Mianyang621000,China)

Abstract:ObjectiveTo study the expression of estrogen receptor(ER),progesterone receptor(PR),human epidermal growth factor receptor 2(HER-2),breast cancer type 1 susceptibility gene(BRCA-1) in breast cancer tissues and its relation with long-term prognosis.MethodsA total of 350 patients with breast cancer who received radical operation in General Surgery Department of Mianyang Central Hospital from Jan.2004 to Sep.2008 were enrolled and the expression of ER,PR,HER-2,BRCA-1 were detected by immunohistochemistry.Then recurrence and survival condition were followed up.Results ①The positive rate of ER,PR,HER-1,BRCA-1 were respectively 58.0%,54.6%,45.1%,53.7%.②Tumor free survival time,three year survival rate,five years survival rate of ER,PR,BRCA-1 positive patients were higher than those of negative patients(P<0.01);tumor free survival time,three year survival rate,five years survival rate of HER-2 positive patients were lower than negative patients(P<0.01).③High expression of ER,PR,BRCA-1 were risk factors of long-term survival; high expression of HER-2 was protective factor of long-term survival.ConclusionExpression of ER,PR,HER-2 and BRCA-1 can be used as reliable index to judge the prognosis of patients with breast cancer,and the combined detection can provide comprehensive judgment on the condition of the patient to make targeted therapy.

Key words:Breast cancer; Estrogen receptor; Progesterone receptor; Human epidermal growth factor receptor; Breast cancer susceptibility gene

收稿日期：2014-02-17修回日期：2014-07-15編輯：伊姍

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.04.056

中圖分類號(hào)：R737

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)04-0722-03