GC法同時測定復(fù)方苯海拉明搽劑中樟腦和薄荷腦的含量

茍林宏，安寶文，王俊麗，劉 肸（.蘭州軍區(qū)聯(lián)勤部藥品儀器檢驗(yàn)所，蘭州 730050；.蘭州大學(xué)藥學(xué)院，蘭州 730000）

復(fù)方苯海拉明搽劑收載于《中國人民解放軍醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑規(guī)范》，各大部隊醫(yī)院中均有生產(chǎn)。該藥現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對樟腦、薄荷腦僅采用化學(xué)鑒別，專屬性不強(qiáng)，且無含量測定規(guī)范，不能全面、準(zhǔn)確地評價制劑的質(zhì)量。為此，筆者參考相關(guān)研究[1-4]，采用氣相色譜（GC）法同時測定復(fù)方苯海拉明搽劑中樟腦和薄荷腦的含量，以為完善其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

Agilent 6890N型GC儀，包括氫火焰離子化檢測器（FID）、7683B 自動進(jìn)樣器、Chemstation 工作站（美國Agilent 公司）；AE200型電子分析天平（瑞士Mettler-Toledo公司）。

1.2 藥品與試劑

復(fù)方苯海拉明搽劑（解放軍第210 醫(yī)院，批號：20140401、20140429、20140430，規(guī)格：100 ml/支）。樟腦對照品（批號：110747-201008，純度：100%）、薄荷腦對照品（批號：110728-200506，純度：100%）均購于中國食品藥品檢定研究院；無水乙醇為分析純。

2 方法

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent 19095N-123 INNOWAX 毛細(xì)管柱（30 m×0.53 mm，1 μm）；檢測器：FID；檢測器溫度：260 ℃；柱溫：120 ℃；進(jìn)樣口溫度：220 ℃；載氣：氮?dú)?；氮?dú)饬魉伲?0 ml/min；柱流速：6.0 ml/min；空氣流速：450 ml/min；分流比：20∶1；進(jìn)樣量：1μl。按上述色譜條件進(jìn)樣測定，理論板數(shù)按樟腦峰計≥1 500，各成分的分離度均＞1.5，詳見圖1。

圖1 氣相色譜圖Fig 1 GC chromatograms

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液 取樟腦和薄荷腦對照品各適量，加無水乙醇制成質(zhì)量濃度分別為3.06、2.96 mg/ml的溶液，即得。

2.2.2 供試品溶液 精密量取復(fù)方苯海拉明搽劑1 ml，置于5 ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.3 陰性對照溶液 取缺樟腦和薄荷腦的其余成分各適量，按照復(fù)方苯海拉明搽劑制備工藝制成陰性樣品，再按“2.2.2”項下方法制成陰性對照溶液。

2.3 線性關(guān)系考察

精密吸取“2.2.1”項下對照品溶液適量，用無水乙醇稀釋，制成樟腦的質(zhì)量濃度分別為0.612、1.22、1.84、3.06、6.12 mg/ml，薄荷腦的質(zhì)量濃度分別為0.593、1.19、1.77、2.96、5.93 mg/ml的系列溶液，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定。以質(zhì)量濃度（x，mg/ml）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得樟腦、薄荷腦的回歸方程分別為y＝747.5x－7.7（r＝0.999 9）、y＝770.7x－38.7（r＝0.999 9）。結(jié)果表明，樟腦、薄荷腦的檢測質(zhì)量濃度線性范圍分別為0.612～6.12、0.593～5.93 mg/ml。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密量取“2.2.1”項下對照品溶液1 μl，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定，連續(xù)操作5 次。結(jié)果，樟腦和薄荷腦峰面積的RSD分別為0.5%、0.9%（n＝5），表明儀器精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密量取同一供試品溶液（批號：20140401）適量，分別于室溫下放置0、2、4、8、12、24 h 時按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果，樟腦和薄荷腦峰面積的RSD 分別為1.3%、1.7%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密量取樣品（批號：20140401）適量，按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，共6份，再按“2.1”項下色譜條件分別進(jìn)樣測定。結(jié)果，樟腦和薄荷腦的含量分別為14.7、15.1 mg/ml，RSD分別為1.9%、1.4%（n＝6），表明本方法重復(fù)性良好。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

精密量取已知含量的復(fù)方苯海拉明搽劑（批號：20140401）6份，每份1 ml，分別置于10 ml量瓶中，精密加入“2.2.1”項下對照品溶液1 ml，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定并計算加樣回收率，結(jié)果見表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）Tab 1 Results of recovery test（n＝6）

2.8 樣品含量測定

精密量取3批樣品各適量，分別按“2.2.2”項下方法制備供試品溶液，再按“2.1”項下色譜條件進(jìn)樣測定并按外標(biāo)法計算含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Results of content determination of samples（n＝3）

3 討論

本文曾采用程序升溫的方法進(jìn)行含量測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)色譜峰拖尾因子較高，且基線不穩(wěn)，重復(fù)性差；且在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)本品成分并不復(fù)雜，不存在分離干擾情況，因此最終選擇固定柱溫進(jìn)行試驗(yàn)。

綜上所述，本方法操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好，可用于測定復(fù)方苯海拉明搽劑中樟腦和薄荷腦的含量。

[1]張婷，龔志成，馬虹英，等.復(fù)方薄荷腦微乳中薄荷腦與樟腦的含量測定[J].醫(yī)藥導(dǎo)報，2010，29（9）：1 224.

[2]周剛，王巨才，禹風(fēng)英，等.毛細(xì)管氣相色譜法測定復(fù)方薄荷腦滴鼻液中薄荷腦和樟腦的含量[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報，2006，22（2）：150.

[3]黃文濤，張耕，程璐.氣相色譜法測定復(fù)方薄荷腦洗劑中樟腦與薄荷腦含量[J].醫(yī)藥導(dǎo)報，2011，30（8）：1 083.

[4]謝周濤，胡進(jìn).氣相色譜法測定復(fù)方冰片搽劑中冰片、薄荷腦和樟腦的含量[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28（23）：2 063.