舒麗啟能加四磨湯促進(jìn)小鼠結(jié)腸術(shù)后胃腸功能恢復(fù)

繆向來　(武漢市普仁醫(yī)院胃腸外科，湖北 武漢 430000)

舒麗啟能加四磨湯促進(jìn)小鼠結(jié)腸術(shù)后胃腸功能恢復(fù)

繆向來(武漢市普仁醫(yī)院胃腸外科，湖北 武漢 430000)

[摘要]目的探討四磨湯輔助舒麗啟能治療結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙的臨床療效和藥理機(jī)制。方法選取昆明種小鼠(雌雄各半)200只，隨機(jī)分為4組(空白組、模型組、舒麗啟能組和聯(lián)合組)，各組50只；空白組正常飼養(yǎng)，其他3組制備結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙模型，模型制備成功后，舒麗啟能組灌胃給予舒麗啟能，聯(lián)合組灌胃給予舒麗啟能加四磨湯，模型組和空白組灌以等劑量的蒸餾水。1周后，抽取腹腔靜脈血，采用ELISA試劑盒檢測(cè)血清乙酰膽堿(ACH)和去甲腎上腺素(NE)濃度，并進(jìn)行胃排空和腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果造模后，與空白組相比，其余3組的MUPA均有明顯降低(P<0.05)，且3組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；藥物干預(yù)后，舒麗啟能組MUPA顯著高于模型組，聯(lián)合組MUPA顯著高于舒麗啟能組(P<0.05)。此外，與空白組相比，其余3組的胃排空率、小腸推進(jìn)率、血清ACH及NE濃度均有顯著降低(P<0.05)；與模型組相比，舒麗啟能組和聯(lián)合組的各項(xiàng)指標(biāo)有所升高，且聯(lián)合組高于舒麗啟能組，其組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論四磨湯輔助舒麗啟能治療結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙利于提高ACH及NE水平，促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)功能，其藥理機(jī)制可能與膽堿能系統(tǒng)和腎上腺能系統(tǒng)有關(guān)。

[關(guān)鍵詞]舒麗啟能；四磨湯；結(jié)腸切除；胃腸功能障礙

受麻醉、創(chuàng)傷、鎮(zhèn)痛等因素的影響，腹部手術(shù)后胃腸功能障礙是臨床常見術(shù)后并發(fā)癥之一[1]。結(jié)腸是人體消化系統(tǒng)的重要組成部分，有吸收、分泌、細(xì)菌消化及協(xié)助排便等多重功能，故而因結(jié)腸手術(shù)而導(dǎo)致的胃腸功能障礙更為常見。四磨湯是由木香、檳榔、烏藥、積殼等組成的純中藥制劑，起源于宋代《濟(jì)生方》，主司破滯降逆、補(bǔ)氣扶正，秉承了傳統(tǒng)中醫(yī)“以通為要”的用藥法則[2]。有研究[3]發(fā)現(xiàn)四磨湯對(duì)胃腸功能的恢復(fù)有良好的促進(jìn)作用，可輔助西藥治療各種原因?qū)е碌南涣迹欢渌幚頇C(jī)制尚未完全明確。本研究以結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙小鼠為載體，探討四磨湯輔助舒麗啟能治療結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙的臨床療效和可能的藥理機(jī)制，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1動(dòng)物和分組選取SPF級(jí)昆明種小鼠200只，體質(zhì)量18.7～24.5 g，平均(22.3±0.42)g，均由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供。采用雙盲法隨機(jī)分為4組(各組50只)：空白組、模型組、舒麗啟能組和聯(lián)合組。

1.1.2儀器和試劑低溫高速離心機(jī)(64R，Beckman)；分光光度計(jì)(UV-1900PC，Macylab Instruments Inc.)；電子分析天平(FA2004，上海雷韻試驗(yàn)儀器制造有限公司)；全自動(dòng)放射免疫分析儀(ACS180，德國(guó)拜耳)；肌電圖/誘發(fā)電位儀(NDI-092，海神)；甲基纖維素北京化學(xué)試劑有限公司)；酚酞(北京化學(xué)試劑有限公司)；小鼠ACH及NEELISA試劑盒(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1模型制備和評(píng)價(jià)適應(yīng)性喂養(yǎng) 3 d 后，空白組不做處理，取下腹部切口切除部分結(jié)腸，制備結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙模型，縫合傷口后24 h行肌電圖檢查，評(píng)價(jià)模型制備結(jié)果。小鼠仰臥位，將記錄電極插入腓腸肌，地極置于背部皮下，牽拉一側(cè)后肢，記錄運(yùn)動(dòng)單位電位的波幅(motor unit potential amplitude，MUPA)，將MUPA較空白組有顯著變化者納入本次試驗(yàn)。

1.2.2給藥方法舒麗啟能組：以馬來酸曲美布汀片研磨成粉狀物，溶解于蒸餾水灌胃。本實(shí)驗(yàn)所用舒麗啟能由天津田邊制藥有限公司提供，人體給藥量為0.01 g·d-1·kg-1，小鼠按人體給藥量的8倍劑量，即0.08 g·d-1·kg-1。聯(lián)合組：將馬來酸曲美布汀粉末和四磨湯口服液同時(shí)溶解于蒸餾水灌胃。本實(shí)驗(yàn)所用四磨湯由湖南漢森藥業(yè)有限公司提供，人體給藥量為1 mL·d-1·kg-1，小鼠按人體給藥量的8倍劑量，即8 mL·d-1·kg-1?？瞻捉M和模型組均灌以等體積的無菌蒸餾水，7 d后再次檢測(cè)MUPA，并進(jìn)行其他指標(biāo)測(cè)定。

1.2.3胃排空率和小腸推進(jìn)率的測(cè)定各組取32只小鼠，分半進(jìn)行胃排空實(shí)驗(yàn)和小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)，剩余小鼠取腹腔靜脈血，進(jìn)行血清學(xué)測(cè)定。①胃排空率：禁食12 h，灌胃1 h后灌以0.2 mL甲基纖維素酚紅溶液，15 min后處死取胃。胃組織稱重、剪碎，按1 ∶9的比例浸泡于NaOH溶液(0.1 mol·L-1)，每隔20 min震蕩搖勻1次。1 h 后取上清液500 μL轉(zhuǎn)移于EP管，加入20%三氯醋酸50 μL，4 000 rpm，離心10 min，取上清液100 μL，加入NaOH溶液(0.5 mol·L-1)400 μL顯色。采用分光光度計(jì)測(cè)定光密度(λ=560 nm)，計(jì)算吸收值A(chǔ)。胃排空率=(1-A實(shí)驗(yàn)/A對(duì)照)×100%。②小腸推進(jìn)率：禁食24 h，灌胃30 min后按體質(zhì)量0.03 mL·g-1灌以50%的墨汁，30 min 后處死開腹，分離腸系膜，結(jié)扎并剪取幽門及回盲部腸管，測(cè)量其總長(zhǎng)度(L0)及墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度(L)。墨汁推進(jìn)率=L/L0×100%

1.2.4血清學(xué)指標(biāo)的測(cè)定禁食12 h，自由飲水，0.5%的戊巴比妥鈉，腹腔麻醉。麻醉完全后，取腹腔靜脈血，常溫靜置40 min后4 000 rpm，離心10 min獲得血清，以ELISA試劑盒和全自動(dòng)放射免疫分析儀測(cè)定ACH和NE的濃度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2結(jié)果

2.1MUPA測(cè)定結(jié)果

模型、舒麗啟能及聯(lián)合組分別成功制備結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙小鼠模型44只、46只、46只。給藥前，較空白組相比，各組MUPA均有明顯降低(P<0.05)，且3組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；給藥后，舒麗啟能組MUPA顯著高于模型組，聯(lián)合組MUPA顯著高于舒麗啟能組(P<0.05)，見表1。

表1　給藥前后各組小鼠MUPA對(duì)比

*：與空白組比較，P<0.05；#：與模型組比較，P<0.05；Δ：與舒麗啟能組比較，P<0.05.

2.2胃排空率和小腸推進(jìn)率測(cè)定結(jié)果

與空白組相比，各組的胃排空率及小腸推進(jìn)率均有顯著降低(P<0.05)；與模型組相比，舒麗啟能組和聯(lián)合組胃排空率及小腸推進(jìn)率有所升高，且聯(lián)合組高于舒麗啟能組，其組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2　各組小鼠胃排空率和小腸推進(jìn)率對(duì)比

*：與空白組比較，P<0.05；#：與模型組比較，P<0.05；Δ：與舒麗啟能組比較，P<0.05

2.3給藥后血清ACH和NE測(cè)定結(jié)果

與空白組相比，各組小鼠的血清ACH和NE濃度均有顯著降低(P<0.05)；與模型組相比，舒麗啟能組和聯(lián)合組的血清ACH和NE濃度有所升高，且聯(lián)合組高于舒麗啟能組，其組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3　各組小鼠血清ACH和NE濃度對(duì)比

*：與空白組比較，P<0.05；#：與模型組比較，P<0.05；Δ：與舒麗啟能組比較，P<0.05

3討論

中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，六腑的主要生理功能是“瀉而不藏”、“以通為用”。術(shù)后胃腸功能障礙的根本原因在于腑氣不通，屬于氣滯證，接近“腹痛”、“痞滿”等范疇[4]。四磨湯由沉香、檳榔、烏藥、人參4味中藥組成，其中沉香善行脾胃滯氣、兼具止痛之效，檳榔可殺蟲消積，烏藥溫中散寒、理氣止痛，而人參補(bǔ)益中氣，諸藥合用，行氣而不耗氣，有邪正兼顧之妙。作為臨床胃腸功能性疾病的常規(guī)用藥之一，舒麗啟能對(duì)胃腸蠕動(dòng)功能的改善效能已得到醫(yī)學(xué)界廣泛認(rèn)可。四磨湯在消化系統(tǒng)疾病的治療中亦取得了一定成效，然而因其藥理學(xué)機(jī)制尚未完全明確，臨床應(yīng)用范圍受到一定的限制。

本研究采用結(jié)腸部分切除法制備胃腸功能障礙小鼠模型，并以肌電圖做模型評(píng)價(jià)指標(biāo)。與常規(guī)指標(biāo)相比，肌電圖具有更高的精確性和客觀性，有效防止了主觀性判斷帶來的誤差。切除部分結(jié)腸后，各組小鼠的MUPA均顯著降低，腸運(yùn)動(dòng)功能發(fā)生障礙，說明該模型制備成功。為初步衡量四磨湯聯(lián)合舒麗啟能的干預(yù)效果，本研究對(duì)各組小鼠的胃排空功能和小腸推進(jìn)功能做對(duì)比分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組的胃排空率和小腸推進(jìn)率明顯小于空白組，經(jīng)藥物干預(yù)，兩項(xiàng)指標(biāo)有所回升，且聯(lián)合干預(yù)組的回升程度明顯優(yōu)于舒麗啟能單一干預(yù)組。該結(jié)果說明四磨湯亦能夠促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)功能，且與舒麗啟能聯(lián)用時(shí)，可發(fā)揮協(xié)同作用，加強(qiáng)療效。以往亦有研究指出四磨湯對(duì)各種原因所致的胃腸功能障礙有良好的促進(jìn)作用，并對(duì)其藥理機(jī)制做了初步探討。藺曉源和劉杰民等[5-6]認(rèn)為四磨湯能夠調(diào)整腫瘤患者術(shù)后血清膽囊收縮素、胃動(dòng)素及瘦素水平，從而促進(jìn)術(shù)后胃腸功能恢復(fù)。蔡光先等[7]發(fā)現(xiàn)四磨湯對(duì)慢性應(yīng)激小鼠腦內(nèi)神經(jīng)降壓素和降鈣素基因相關(guān)肽表達(dá)有調(diào)節(jié)作用，可能通過中樞調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)功能。鄧娜等[8]研究證實(shí)慢性應(yīng)激所致功能性消化不良小鼠的血清促生長(zhǎng)素較正常鼠偏低，一氧化氮與瘦素較正常鼠偏高，四磨湯單藥及組方對(duì)該病理特征均有逆轉(zhuǎn)效果。陳其城等[9]指出，四磨湯能夠通過能興奮膽堿 M3受體而起到興奮胃腸道平滑肌的作用。可見，四磨湯對(duì)胃腸功能的恢復(fù)確實(shí)有促進(jìn)作用，且其藥理機(jī)制復(fù)雜，涉及到多個(gè)生理系統(tǒng)。

胃腸道調(diào)控系統(tǒng)包括中樞、周圍和腸神經(jīng)系統(tǒng)(enteric nervous system，ENS)[10-11]。結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙是多因素綜合作用的結(jié)果，任一系統(tǒng)發(fā)生障礙均可影響胃腸功能。為進(jìn)一步研究四磨湯治療結(jié)腸術(shù)后胃腸功能障礙的藥理機(jī)制，本研究對(duì)各組小鼠外周血ACH和NE做了定量研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)切除部分結(jié)腸后，小鼠的血清ACH和NE含量均有明顯降低，藥物干預(yù)可使其改善，且聯(lián)合組的改善效果明顯優(yōu)于舒麗啟能組，說明四磨湯能夠提高小鼠外周血ACH和NE含量。ACH是ENS中最為主要的興奮性遞質(zhì)，由腸平滑肌的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元和分泌神經(jīng)元分泌，在一定程度上可主導(dǎo)胃腸道功能[12-13]?？孜某傻萚14]認(rèn)為，ENS膠質(zhì)細(xì)胞是腸黏膜系統(tǒng)的重要屏障，對(duì)胃腸有重要保護(hù)作用。邱洪等[15]發(fā)現(xiàn)，通過對(duì)ACH調(diào)控可達(dá)到改善ENS功能的作用，從而緩解藥物所致胃腸異常。NE屬于人體興奮性神經(jīng)遞質(zhì)之一，由交感神經(jīng)節(jié)后神經(jīng)元和腎上腺能神經(jīng)末梢共同分泌，具有正性肌力作用，可作用于腸系膜。本研究結(jié)果說明四磨湯對(duì)胃腸功能障礙小鼠的膽堿能系統(tǒng)和腎上腺能系統(tǒng)均有影響，可能為其發(fā)揮藥理作用的重要機(jī)制之一。

綜上所述，四磨湯對(duì)結(jié)腸切除小鼠的胃腸功能障礙有明顯緩解作用，且其藥理機(jī)制可能與膽堿能系統(tǒng)和腎上腺能系統(tǒng)有關(guān)，應(yīng)作為本課題的后續(xù)工作，進(jìn)行系統(tǒng)化研究。

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(編輯：左艷芳)

Effect compare of trimebutine maleate with and without Simo decoction to improve gastrointestinal function in the treatment of mice removed part of colon

MIU Xiang-lai(Department of Gastiontestinal Surgery,Puren Hospital of Wuhan City,Wuhan Hubei 430000,China)

Abstract:ObjectiveTo discuss the efficacy and pharmacological mechanism of Simo decoction to assist the treatment of postoperative gastrointestinal dysfunction.Methods200 mice (100 male and 100 female) were randomly divided into four groups (n=50).The mice of blank group were feed as normal,and the mice in the other three groups were prepared for colon postoperative gastrointestinal dysfunction model.Then,trimebutine maleate group were given trimebutine maleate while the combined group were given trimebutine maleate and simo decoction through gavage,and model group and blank group were given the same doses of distilled water.One week later,the abdominal venous blood of mice was extracted and serum levels of acetylcholine (ACH) and norepinephrine (NE) were detected using ELISA kit.At the samd time,the gastric emptying and intestinal propulsion experiment was carried on.ResultsAfter modeling,compared with blank group,MUPA of the rest three groups were significantly decreased (P<0.05),and there was no statistical difference between the rest three groups (P>0.05).After drug intervention,MUPA of trimebutine maleate group was significantly higher than that of model group,and MUPA of combined group was significantly higher than that of trimebutine maleate group (P<0.05).In addition,compared with blank group,the gastric emptying rate,intestinal propulsion rate,serum ACH concentration and NE concentration of the rest three groups were significantly lower (P<0.05).Compared with model group,each index of both trimebutine maleate group and combined group was increased,and combined group increased higher (P<0.05).ConclusionSimo decoction combined trimebutine maleate has high effect to improve the level of ACH and NE of postoperative gastrointestinal dysfunction mice,which benefit to promote gastrointestinal peristalsis and may be one of its pharmacological mechanisms.

Keywords:trimebutine maleate;simo decoction;colectomy;gastrointestinal dysfunction

[收稿日期]2014-12-03[修回日期] 2014-12-17

[基金項(xiàng)目]湖北科技攻關(guān)項(xiàng)目(20120034)

doi:10.11659/jjssx.10E014055

[中圖分類號(hào)]R472.9+1

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1672-5042(2015)04-0400-04