四川煙草炭疽病的鑒定及防治技術研究

任文清，夏文明，張再剛，王鳳龍，孫惠青*

(1.四川省涼山州煙草公司會東分公司，四川會東 615200；2.中國農業(yè)科學院煙草研究所，山東青島 266101)

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四川煙草炭疽病的鑒定及防治技術研究

任文清1，夏文明1，張再剛1，王鳳龍2，孫惠青2*

(1.四川省涼山州煙草公司會東分公司，四川會東 615200；2.中國農業(yè)科學院煙草研究所，山東青島 266101)

[目的]鑒定四川煙草上的一種葉斑病害，并探討其防治技術。[方法]采用“柯赫氏法則”，對2012年在四川會東育苗溫室紅花大金元上發(fā)現的一種葉斑病害進行了鑒定，并研究了幾種藥劑對該病菌的防治效果。[結果]依據病害癥狀和病原形態(tài)特征確認為煙草炭疽病菌(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)；75%百菌清600倍稀釋液、80%代森鋅800倍稀釋液、80%代森錳鋅800倍稀釋液、50%退菌特800倍稀釋液、50%福美雙500倍稀釋液對炭疽病有較好的防治效果。[結論]為煙草炭疽病的防治提供了參考。

煙草炭疽??；鑒定；防治

煙草炭疽病由半知菌六包盤孢(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)引起[1]。煙草整個生育期均可發(fā)生，苗期發(fā)生普遍嚴重，發(fā)病初期葉片上發(fā)生水漬狀暗綠色小點，俗稱“雨斑”，嚴重時幼苗葉片病斑密布，成片爛掉，且大田期仍可繼續(xù)為害，嚴重影響煙草種植的經濟效益。除煙草外，炭疽病菌還侵染白菜、番茄、辣椒、茄子、瓜類、豆類等。煙草炭疽病菌在25～30 ℃的最適溫度下，潛育期僅48 h，水滴是病菌分生孢子傳播再侵染的重要條件，因此苗床低濕或大水漫灌、苗期多雨時病害發(fā)生重[2]。

煙草炭疽病在我國各煙區(qū)普遍發(fā)生，其中云南、湖南、江西等省發(fā)生較重，炭疽病菌的形態(tài)特征及防治的研究已有報道，但目前尚未見四川省關于炭疽病菌的研究報道[3-5]。2012年，在四川省會東縣育苗溫室中發(fā)現疑似煙草炭疽病的癥狀，葉片上病斑密度大，發(fā)病輕的苗床煙苗長勢衰弱，影響移栽。為確定引起該病害的病原菌，筆者從病害樣本中分離得到純培養(yǎng)物，采用“柯赫氏法則”測定其致病性，根據其形態(tài)學特征鑒定其病原，并對防治藥劑進行了篩選，以期為有效控制該病害提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料5種供試藥劑為50%退菌特(天津市興果農藥廠)、80%代森鋅(利民化工股份有限公司)、80%代森錳鋅(河北雙吉化工有限公司)、50%福美雙(河北萬特生物化學有限公司)、75%百菌清(海利爾藥業(yè)集團)。

1.2 方法

1.2.1病害調查及癥狀觀察。 2012年3～4月，在四川會東縣育苗溫室中烤煙紅花大金元上發(fā)生炭疽病，采集具典型特征的煙草葉片，觀察并記錄病害癥狀。

1.2.2病原菌的分離培養(yǎng)。發(fā)病葉片采自會東縣育苗溫室中烤煙紅花大金元，采用組織分離培養(yǎng)法。用手術刀切取病健交界處組織，用75%乙醇消毒10～15 s，無菌水洗滌3次，接到燕麥培養(yǎng)基上，25 ℃黑暗培養(yǎng)，定期觀察培養(yǎng)特征，并轉接在PDA培養(yǎng)基上，觀察培養(yǎng)特征。

1.2.3病原菌致病性檢測。待菌絲長滿PDA平皿且觀察到子實體時，用無菌水將其菌絲洗下，制備孢子懸液。接種前先用無菌注射器給葉片(烤煙紅花大金元)制造傷口，再將菌液涂抹在葉片上，26 ℃保濕培養(yǎng)，以不接菌為對照。記錄病癥病情，對接種發(fā)病的葉片再分離和鑒定。

1.2.4病原菌的形態(tài)鑒定。選取溫室自然發(fā)病和接種發(fā)病的具小黑點的病斑，挑取子實體制水玻片；將自然發(fā)病和經致病性測定后分離獲得菌株接種到PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)，挑取菌絲制水玻片。顯微鏡下觀察菌絲形態(tài)、子實體形態(tài)及分生孢子形態(tài)特征。

1.2.5藥劑防治試驗。試驗設5個藥劑處理，即50%退菌特稀釋800倍、80%代森鋅稀釋800倍、80%代森錳鋅稀釋800倍、50%福美雙稀釋500倍和75%百菌清稀釋600倍。選取發(fā)病苗床，每藥劑處理設4次重復，每重復小區(qū)面積15 m2，以噴施等量清水為空白對照，小區(qū)隨機排列。將藥劑充分溶解于適量水中，進行葉面均勻噴霧，間隔7 d，噴施2次，期間澆水避免葉面噴灑，采用苗床潤濕法。末次藥后7 d調查病情指數，每小區(qū)采用5點取樣法，每點固定調查5～10株，記錄調查總葉數及各級病葉數，嚴重度分級應符合GB/T23222的規(guī)定。應用DPS軟件計算各藥劑處理防治效果，采用鄧肯新復極差法檢驗差異顯著性。

防治效果(%)(施藥前無基數)=(空白對照區(qū)病指-處理區(qū)病指)/空白對照區(qū)病指×100

2 結果與分析

2.1 病原菌的致病性在溫室中，用孢子懸液接種于健康紅花大金元葉片上，接種3 d開始觀察到直徑約1 mm暗綠色水漬狀小點，5 d后擴展為直徑2～5 mm的圓斑。中央灰白色，稍凹陷，邊緣明顯，呈赤褐色，稍隆起。10 d左右觀察到小黑點，即病菌的分生孢子盤，表現與溫室自然病株相同的癥狀，發(fā)病率100%(圖1)。對接種發(fā)病葉片進行再分離培養(yǎng)，獲得與接種病原菌形態(tài)一致的菌株。

2.2 病原菌的形態(tài)病原菌在燕麥培養(yǎng)基及PDA培養(yǎng)基上25 ℃黑暗培養(yǎng)7 d，菌落直徑為35 mm，邊緣白色，中間灰白色，有黑色小點，即分生孢子盤，其上著生剛毛黑色，直或稍彎曲，基部稍膨大，向頂端漸尖，大小55～400 μm，具1～3個隔膜。菌絲灰白色，無分隔。分生孢子長圓筒形，兩端鈍圓，單胞，無色，含有2個油球，大小10～80 μm。(圖2)。根據病害癥狀并結合病原菌形態(tài)特征分析結果，可以明確該病害的病原菌為煙草炭疽病(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)。

2.3 不同藥劑對煙草炭疽病的防治效果由表1可知，末次藥后7 d，清水對照的病情指數為45.25，與清水對照相比，4種試驗藥劑的病情指數顯著降低，對煙草炭疽病的防效分別為63.73%、71.95%、68.58%、66.76%和64.05%，能有效控制苗床炭疽病的發(fā)展。

3 討論

煙草炭疽病于1922年由巴西首次報道，世界各國均有發(fā)生。該病菌主要隨病殘體在土壤及糞肥中越冬，亦能以分生孢子沾附于種子表面或以菌絲在種子內部越冬，成為苗床期的主要初侵染源。以分生孢子隨雨水沖濺傳播，水滴是再次侵染的重要條件，分生孢子在葉面具水膜的情況下萌發(fā)侵染[6]。大田排水不良，亦可導致成株發(fā)病，影響煙葉產量和質量。

表1 不同藥劑處理對煙草炭疽病的防治效果

注：同列數據后不同大、小寫字母分別表示處理間在0.01、0.05水平差異顯著。

煙草炭疽病在溫室中易于辨認，大田期易與氣候性斑點病混淆，均在葉片上產生褐色小斑點。炭疽病斑圓形或近圓形；初期暗綠色水漬狀，后期潮濕可產生黑色小粒點(分生孢子盤)，以此區(qū)分于氣候斑。

苗床期是煙草炭疽病的易發(fā)期，低濕、隱蔽及大水漫灌利于病害擴展，且病苗在移栽后遇雨水也易造成持續(xù)為害。因此，該病的防治關鍵期是苗床期。合理定苗，及時通風控制苗床濕度，以減少病原菌侵染機會。發(fā)病初期及時噴藥保護，可選用75%百菌清600倍稀釋液、80%代森鋅800倍稀釋液、80%代森錳鋅800倍稀釋液、50%退菌特800倍稀釋液、50%福美雙500倍稀釋液和58%甲霜靈錳鋅500倍稀釋液交替使用。每隔7～10 d噴灑一次，連續(xù)2～3次[7]，能有效控制病害發(fā)生，減輕為害。

[1] 朱賢朝，王彥亭，王智發(fā).中國煙草病害[M].北京：中國農業(yè)出版社，2001:5-9.

[2] 歐高才.煙草苗期炭疽病發(fā)生規(guī)律及防治研究[J].湖南農業(yè)科學，1997(4):41-42.

[3] 張黎明.煙草炭疽病的發(fā)生及其防治研究進展[J].江西農業(yè)學報，2011,23(8):90-92.

[4] 李東升，張一揚.煙草炭疽病的形態(tài)特征和致病性研究[J].湖南農業(yè)科學，2009(5):98,100.

[5] 楊泮川.云南煙草炭疽病形態(tài)生理研究[J].云南農業(yè)大學學報，1992,7(4):199-205.

[6] SHEN S H，GOODWIN P，HSIANG T.Hemibiotrophic infection and identity of the fungus，Colletorichumdestructivum，causing anthracnose of tobacco[J].Mycol Res，2001,105(11):1340-1347.

[7] 朱友勇，王云月，竇友萍，等.甲霜靈錳鋅對煙草炭疽病的毒力及防治研究[J].煙草科技，1993(1):44-45.

Identification and Control of Tobacco Anthracnose in Sichuan

REN Wen-qing1，XIA Wen-ming1, ZHANG Zai-gang1，SUN Hui-qing2*et al

(1. Huidong Branch Company of Liangshan Tobacco Company, Huidong, Sichuan 615200; 2. Tobacco Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Qingdao, Shandong 266101)

[Objective] The aim was to identify a leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 and explore its control technology. [Method] A leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 was identified by Koch’s Rule, and control effects of several regents on it were studied. [Result] The pathogen was identified asColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca according to symptom on tobacco leaf and pathogen shape. The fungicides trial in greenhouse showed that the five fungicides like 75%Chlorothalonil 600 times, 80% Zineb 800 times, 80% Mancozeb 800 times, 50% Tuzet 800 times and 50% Thiram 500 times could control this disease. [Conclusion] The results provide reference for control of tobacco anthracnose.

Tobacco anthracnose; Identification; Control

國家煙草專賣局項目(110200902065)。

任文清(1966-)，男，四川閬中人，助理農藝師，從事煙草栽培研究。*通訊作者，副研究員，碩士，從事煙草植保研究。

2014-12-15

S 435.72

A

0517-6611(2015)04-128-03